H_2O_2诱导的HT-29结肠癌细胞凋亡中microRNA-23表达变化

目的观察过氧化氢(H2O2)诱导的HT-29结肠癌细胞凋亡中microRNA(miRNA)的表达变化及其在细胞凋亡中的作用。方法常规培养的HT-29结肠癌细胞,给予500 nM H2O2处理48 h,构建HT-29细胞凋亡模型;常规RNA抽提后,利用miRNA颈环结构引物进行反转录反应后,采用实时荧光定量PCR分析miRNAs的表达水平。构建miR-23的Psuper过表达质粒,并将其转染HT-29细胞。实时荧光定量PCR分析Psuper-miR-23在HT-29细胞中的过表达效率。在H2O2诱导的HT-29细胞中过表达miR-23,48 h后通过流式细胞术检测HT-29细胞的凋亡情况,并通过定量PCR检测细胞中Caspase 3的表达。结果在H2O2诱导的HT-29结肠癌细胞凋亡模型中,miR-22、miR-24、miR-26、miR-30、miR-181和miR-214的表达水平在对照组与H2O2组之间表达差异没有显著性,而miR-23在处理组的表达水平明显升高。Psuper-miR-23过表达质粒转染培养的HT-29细胞能够明显提高miR-23的表达水平。在H2O2诱导的HT-29细胞过表达miR-23,能够促进HT-29细胞的凋亡。结论 miR-23在H2O2诱导的HT-29细胞凋亡模型中表达升高,将其过表达能够促进H2O2诱导的HT-29细胞凋亡作用,表明miR-23可能参与了H2O2诱导的细胞凋亡过程。

幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A、细胞毒素相关蛋白E、细胞空泡毒素A基因型与上消化道疾病的关系

目的分析幽门螺杆菌(Hp)的细胞毒素相关蛋白A(cagA)、细胞毒素相关蛋白E(cagE)、细胞空泡毒素A(vacA)基因型与上消化道疾病的关系。方法选取112例上消化道疾病患者,对其胃黏膜组织中Hp菌株的cagA、cagE、vacA基因型进行检测和分析。结果所有患者胃黏膜样本中的Hp菌株均为cagA基因和cagE基因阳性表达,阳性率均为100%。患者的vacAs1/m^2表型的阳性率最高,分别为54.1%和60.5%,其次为vacAs1/mlb表型和vacAs1/m^-表型,阳性率分别为13.2%~21.1%。消化性溃疡患者和慢性胃炎患者的Hp基因各表型的阳性率的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论上消化道疾病患者胃黏膜组织中的Hp菌株呈现cagA、cagE、vacAs1/m^2等基因亚型的优势表达,说明这些毒力因子表型在Hp引发和促进上消化道疾病的过程中具有重要的作用,但与上消化道疾病类型缺乏相关性。

环状RNA Circ-RANBP1在胰腺癌组织中的表达及其对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

背景:大量研究表明,环状RNA(circRNA)异常表达与多种肿瘤的发生、发展、预后等密切相关,是理想的诊断指标和治疗靶点。但circRNA在胰腺癌发生、发展中的作用尚需进一步探究。目的:探讨circ-RANBP1在胰腺癌组织中的表达及其对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:以原位杂交法检测circ-RANBP1在胰腺癌组织和相应癌旁正常组织中的表达。常规培养MIA PaCa-2细胞和SW 1990细胞,分别转染circ-RANBP1敲低寡聚物和过表达质粒,并设立相应对照组。qRT-PCR法检测circ-RANBP1在胰腺癌细胞中的表达。EdU实验检测circ-RANBP1对细胞增殖能力的影响。Transwell实验检测circ-RANBP1对细胞迁移、侵袭能力的影响。蛋白质印迹法和免疫荧光染色检测circ-RANBP1对细胞上皮-间质转化(EMT)进程的影响。血管形成实验评估circ-RANBP1表达对血管形成能力的影响。结果:Circ-RANBP1在胰腺癌组织中表达增高,且与患者的不良预后密切相关。Circ-RANBP1下调能抑制MIA PaCa-2细胞增殖,而circ-RANBP1过表达可促进SW 1990细胞增殖。与对照组相比,敲低circ-RANBP1能抑制MIA PaCa-2细胞迁移和侵袭,而过表达circ-RANBP1可促进SW 1990细胞迁移和侵袭。敲低circ-RANBP1可抑制EMT,过表达circ-RANBP1可促进EMT。抑制circ-RANBP1表达可明显降低血管形成能力,过表达则可明显促进血管形成。结论:Circ-RANBP1在胰腺癌组织中高表达,并可促进胰腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT和血管形成。

硫酸盐还原菌与炎症性肠病相关性的研究进展

炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是一种病因未明的难治性肠道炎性疾病,具有病程长、易复发、难治疗、危害大等特点,且发病率逐年升高。IBD发病机制错综复杂,目前认为与宿主遗传易感性、黏膜免疫和肠道微生态等密切相关。在IBD患者的肠道中发现了硫酸盐还原菌(sulfate-reducing bacteria, SRB)数量的升高,为更好的了解IBD发病机制、预防和控制IBD患者肠道炎症反应,SRB及其增殖代谢产物硫化氢(Hydrogen sulfate, H2S)与肠道的相互作用及其在IBD中的潜在作用机制一直是当前研究的重点。本文对 SRB 在IBD肠道中的分布特征、致病机理等研究进展进行综述,以期为预防、减轻甚至逆转IBD患者肠道炎症提供一定参考。

长链非编码RNA H19促进肝癌细胞增殖和侵袭

目的:肝癌是严重危害人类健康的一类恶性肿瘤,但其发病机制目前仍不明确。虽然长链非编码RNA的异常表达与多种肿瘤的发生密切相关,但在肝癌中的报导尚不多见。因此,本文将探讨长链非编码RNA H19在肝癌组织和正常组织中表达差异,进一步检测其对肝癌细胞增殖和侵袭活性的调控及其分子机制,为开发长链非编码RNA的临床诊断试剂提供实验依据。方法:收集20例肝癌手术患者的癌变组织和20例正常组织,通过real time PCR检测H19的表达差异。在转染或干扰掉该H19后,采用MTT的方法检测HepG2细胞的增殖活性,通过Transwell小室的方法检测HepG2细胞的侵袭活性。结果:real time PCR检测发现H19 mRNA在肝癌组织中高表达,而在正常组织中低表达。过表达H19导致HepG2细胞过度增殖,敲除该lncRNA,细胞增殖和侵袭活性被抑制。结论:H19在肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织,并且过表达H19导致肝癌细胞增殖活性增加,而敲除H19会导致肝癌细胞的增殖和侵袭活性明显减弱。该LncRNA在肝癌组织中的过量表达有助于肝癌的临床诊断,同时H19在肝癌的恶性肿瘤生物活性中发挥着重要的作用,因此,H19是一个潜在的治疗肝癌的药物作用靶点,为开发新的抗肿瘤药物提供了新的治疗靶点。

Sirt1促进肝癌细胞增殖和侵袭活性的分子机制

目的:探讨Sirt1基因在肝癌组织和癌旁组织中表达差异,进一步检测其对肝癌细胞增殖和侵袭活性的调控。方法:收集30例肝癌手术患者的病变组织和癌旁组织,通过Real time-PCR检测Sirt1基因的表达差异,并对其中6例组织通过western blot验证。在转染Sirt1基因或干扰掉该基因后,采用MTT的方法检测HepG2细胞的增殖活性,通过Transwell小室的方法检测HepG2细胞的侵袭活性。结果:Real time-PCR检测发现Sirt1 mRNA在肝癌组织中高表达,同样,Western blot检测也发现Sirt1在肝癌组织中高表达,而在癌旁组织中表达较低。过表达Sirt1导致HepG2细胞过度增殖,侵袭能力增加;相反,敲除该基因,细胞增殖和侵袭活性被抑制。结论:Sirt1在肝癌组织中高表达并且介导肝癌细胞增殖和侵袭活性。该基因在肝癌组织中的过量表达有助于肝癌的临床诊断,同时Sirt1在肝癌的恶性肿瘤生物活性中发挥着重要的作用,因此,Sirt1是一个潜在的治疗肝癌的药物作用靶点,为开发新的抗肿瘤药物提供了新的治疗靶点。

晚明以来宜兴玉女山庄山地理景研究

以无锡宜兴玉女山庄为例,在实地考察和文献资料搜集的基础上,利用便携三维数字扫描设备获取园林地形及建造数据,进行玉女山庄复原研究,并展开玉女潭周边建筑玉光阁变迁的推测分析,由此展现园林布局及景致随社会文化功能需求而变化的历史过程。