温经清络益肾汤治疗寒热错杂型类风湿关节炎的疗效及对血清炎症因子与OSCAR、RNKL、OPG水平的影响

目的:探讨温经清络益肾汤治疗寒热错杂型类风湿关节炎的疗效及对血清炎症因子与破骨细胞相关受体(OSCAR)、护骨素(OPG)、破骨细胞生成因子(RNKL)水平的影响。方法:选取2019年1月~2021年12月本院收治的102例寒热错杂型类风湿关节炎患者,随机数字表法分为对照组和观察组各51例,对照组给予常规治疗,观察组给予温经清络益肾汤治疗,比较两组临床疗效、血清炎症因子和OSCAR、RNKL、OPG水平以及中医证候积分。结果:观察组临床有效率90.20%高于对照组的74.51%(P<0.05);治疗后观察组白细胞介素-32(IL-32)、白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均低于对照组(P<0.05);治疗后观察组OSCAR、RNKL、OPG水平改善优于对照组(P<0.05);治疗后观察组关节肿胀、关节疼痛、晨僵、畏寒证候积分均低于对照组(P<0.05)。结论:温经清络益肾汤治疗寒热错杂型类风湿关节炎效果显著,可减轻患者炎症反应,调节OSCAR、RNKL、OPG水平,改善临床症状,有利于恢复。

反相高效液相色谱法测定治糜康栓中苦参碱和氧化苦参碱的含量

目的建立治糜康栓中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定方法,以期更全面地控制治糜康栓的质量。方法采用(RP-HPLC法)以十八烷基硅烷键合硅胶(C18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-磷酸盐缓冲液(7:93,磷酸二氢钾1.7 g加500 mL纯水溶解,用磷酸调节pH=3)为流动相,检测波长220 nm,流速1 mL/min,分别对市售治糜康栓与实验室自制治糜康栓中苦参碱及氧化苦参碱的总含量进行测定。结果市售治糜康栓中苦参碱及氧化苦参碱的总含量约为1.52 mg/粒,实验室自制治糜康栓中苦参碱及氧化苦参碱的总含量约为2.53 mg/粒。结论建立的反相高效液相色谱方法适用于治糜康栓中苦参碱及氧化苦参碱的含量测定。

Box-Behnken响应面法优化炒赤芍炮制工艺

目的:优化炒赤芍的炮制工艺,为该炮制品的质量控制提供参考。方法:采用高效液相色谱法对炒赤芍中的芍药苷进行含量测定。色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18,流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(15∶85,V/V),流速为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为230nm,进样量为10μL。以表面颜色、断面颜色、硬度、气味考察炒赤芍的外观性状;以外观性状评分和芍药苷含量评分的综合评分为考察指标,分别对投药量、炒制温度、炒制时间进行单因素考察,并根据单因素试验结果对上述3个因素进行Box-Behnken响应面法优化,并对优化后的炮制工艺进行验证。结果:芍药苷检测质量浓度的线性范围为0.02~4.15mg/mL(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合要求。炒赤芍的最优工艺为投药量374.60g、炒制温度101.61℃、炒制时间20min。在最优工艺条件下,6次平行验证试验所得炒赤芍的综合评分为97.39~98.82分,RSD为0.54%,与预测值(98.18分)相接近;炒赤芍颜色较赤芍生品略有加深,质脆,有香味。结论:优化所得炒赤芍的炮制工艺稳定、可行,适用于该炮制品的制备。

松子蛋白改善脑缺血再灌注损伤小鼠的认知学习能力作用研究

目的观察松子蛋白对脑缺血再灌注损伤小鼠学习记忆功能障碍的改善作用。方法60只小鼠随机分为6组:空白组,模型组,阳性对照组,松子蛋白低、中、高剂量组。连续灌胃给药14 d。通过Morris水迷宫和跳台实验,测试小鼠的学习记忆能力。通过生化检测法测定谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性及丙二醛(MDA)含量。结果水迷宫实验结果表明,与Model组相比,阳性对照组及松子蛋白低、中、高剂量组小鼠逃避潜伏期和总路程明显缩短(P<0.05);跳台实验结果表明,与Model组相比,阳性对照组及松子蛋白低、中、高剂量组小鼠潜伏期明显增加,错误次数明显减少(P<0.05)。给予松子蛋白后,能够降低MDA水平,升高GSH、SOD水平(P<0.05)。结论松子蛋白具有改善脑缺血再灌注损伤小鼠学习记忆功能障碍的作用。

天然产物与肠道微生物相互作用的研究进展

肠道菌群对人体的健康发挥起至关重要的作用,失衡将诱发多种疾病。天然产物已被证明可以通过调节肠道菌群的平衡来达到预防和治疗多种疾病,但具体的作用机制仍不清楚。本文主要对天然产物中的皂苷类、黄酮类、生物碱类及多糖类与肠道菌群的相互作用进行综述,对其代谢产物和代谢路径进行总结,以期为进一步研究天然产物调节肠道菌群的作用机制提供参考。

基于UPLC Orbitrap MS/MS分析锦灯笼中化学成分

利用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC Orbitrap HRMS)法分析锦灯笼干燥果实和宿萼的提取物的化学成分。采用Thermo Syncronis C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,电喷雾电离源负离子模式下利用轨道阱质量分析器检测。根据高分辨质谱提供的精确相对分子质量和串联碎片离子等信息,结合对照品、保留时间和相关文献,共鉴定出23种化学成分,包括5种有机酸类、12种黄酮类、6种酸浆苦素类化合物,其中山奈甲黄素-3-O-葡萄糖苷和锦葵色素-3-O-葡萄糖苷是首次在锦灯笼中发现。通过快速分析鉴定锦灯笼中化学成分,可为锦灯笼的药食两用提供物质基础。

治糜康栓对宫颈炎模型大鼠IL-1β、EGFR及TNF-α表达的影响

目的探讨治糜康栓治疗宫颈炎大鼠的疗效与机制。方法用苯酚胶浆阴道注射建立宫颈炎大鼠模型,60只大鼠随机分为空白组、模型组、基质组、阳性组(市售治糜康栓)和改良工艺后治糜康栓低、高剂量组。治疗12天以后,用试剂盒检测大鼠血清中表皮生长因子受体(EGFR)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。HE染色观察大鼠宫颈病理组织变化,免疫组织化学检测宫颈组织中TNF-α、EGFR和IL-1β含量。结果与空白组比较,模型组TNF-α、IL-1β含量增多(P<0.01),EGFR含量减少(P<0.01)。与模型组比较,高剂量组TNF-α、IL-1β含量减少(P<0.01),EGFR含量增多(P<0.01)。结论治糜康栓下调TNF-α、IL-1β介导的炎症反应,上调EGFR的表达,调节宫颈炎大鼠的免疫功能,这可能是其治疗宫颈炎的机制之一。

皮诺敛酸对脂多糖诱导小胶质细胞BV2炎性反应作用及机制研究

目的:探讨皮诺敛酸(PLA)对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞BV2炎性反应作用及机制研究。方法:MTT法评价PLA对BV2活力影响;细胞免疫荧光法检测自噬蛋白Beclin1、LC3B表达水平;ELISA法检测BV2上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α表达影响;分子模拟技术分析PLA与p38MAPK、p65NF-κB蛋白之间的结合能力;Western blot法检测p38MAPK/p65NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果:与模型组比较,PLA各剂量组细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01),细胞内Beclin1、LC3B蛋白表达显著减少(P<0.05,P<0.01);PLA中、高剂量组细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β含量显著降低(P<0.05);PLA与p38MAPK、p65NF-κB蛋白对接最佳Ki值分别为502.89μmol/L、19.09mmol/L;除PLA中剂量组细胞内p38MAPK蛋白外,其余3组p38MAPK/p65NF-κB蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论:PLA对LPS诱导BV2细胞炎症损伤具有保护作用,并抑制BV2细胞的自噬,降低炎症因子表达水平,其机制可能与抑制细胞内p38MAPK/p65NF-κB信号通路相关蛋白表达有关。

松子蛋白对过氧化氢致SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的:观察松子蛋白(PE)对过氧化氢(H_2O_2)致SH-SY5Y细胞损伤的影响及其机制。方法:取对数生长期细胞,分为对照组,模型组,PE低、中、高剂量组(0.1、1、10μg/mL),对照组加入等体积细胞1640培养液,然后加入H_2O_2(终浓度400μmol/L)且孵育4h造成细胞氧化应激损伤模型,采用MTT比色法检测细胞活力,利用流式细胞技术检测PE对氧化损伤SH-SY5Y细胞凋亡程度的影响,Western blot检测Bcl-2、Nrf-2、HO-1蛋白表达的情况。结果:与对照组比较,模型组SH-SY5Y细胞存活率显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05),SH-SY5Y中Nrf-2、Bcl-2、HO-1蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,PE低、中、高剂量组细胞存活率均显著升高(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.05),SH-SY5Y中Nrf-2、Bcl-2、HO-1蛋白水平均显著升高(P<0.05)。结论:PE对H_2O_2致SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与通过激活神经细胞内Nrf-2通路抑制其氧化应激,降低凋亡发生有关。

五味子乙素聚合物胶束的制备及包封率的测定

目的确定五味子乙素聚合物胶束的最佳制备工艺并建立其包封率测定方法。方法采用正交试验设计优化五味子乙素胶束的制备工艺,采用超声法制备五味子乙素胶束,采用高效液相色谱法测定胶束中五味子乙素的含量并计算其包封率。结果最佳工艺为有机相二氯甲烷,m PEG-PLA 4mg,PLA 4mg,二氯甲烷2mL,水相1mL;制备的胶束形态为规则的球形或类球形,胶束平均粒径为118.6nm,Zeta电位为-2.94mV;五味子乙素胶束平均包封率为(51.17±0.02)%,平均载药量为(10.03±0.40)%。结论超声法适用于制备五味子乙素聚合物胶束,所建立的五味子乙素包封率测定方法操作简单、准确。