烟酰胺核糖对EAE小鼠的外周抗炎作用及其机制研究

目的探讨烟酰胺核糖(NR)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的外周抗炎作用及机制。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35~55肽段(MOG35-55)诱导C57BL/6雌性小鼠制备EAE模型,随机分为EAE模型组和NR治疗组。EAE模型组每只小鼠按200μl/d剂量灌胃给予生理盐水,NR治疗组每只小鼠按500 mg/kg、200μl/d剂量灌胃给予NR,观察并记录各组小鼠临床评分和体质量。免疫后第28天处死小鼠,制备脾脏和脊髓冰冻切片,提取脊髓组织蛋白。HE染色检测外周炎性细胞浸润脊髓,免疫荧光染色检测小鼠脊髓CD4^(+)T细胞、CD68^(+)巨噬细胞数量,Western blot检测小鼠脊髓IFN-γ、IL-1β表达,免疫荧光染色检测小鼠脾脏ROCK-Ⅰ^(+)细胞、TLR4^(+)细胞、p-NF-κB^(+)细胞、TNF-α^(+)细胞、IL-1β^(+)细胞、IFN-γ^(+)细胞、IL-6^(+)细胞、IL-10^(+)细胞、IL-17^(+)细胞、i NOS^(+)细胞、Arg-1^(+)细胞数量。结果与EAE模型组相比,NR显著推迟EAE小鼠发病时间(P<0.05),降低临床评分(P<0.05或P<0.01),减轻体质量丢失,阻止外周炎性细胞浸润脊髓(P<0.01),减少脊髓CD4^(+)T细胞、CD68^(+)巨噬细胞数量(P<0.01),下调脊髓IFN-γ、IL-1β炎性因子表达(P<0.05),抑制小鼠脾脏ROCK-Ⅰ、TLR4、p-NF-κB表达(P<0.01),减少脾脏IFN-γ、i NOS、IL-6等促炎因子分泌(P<0.05或P<0.01),促进脾脏抗炎因子Arg-1、IL-10分泌(P<0.05或P<0.01)。结论NR能够有效缓解EAE小鼠临床症状,显著减轻外周和中枢神经系统炎症反应,其机制可能与抑制EAE小鼠脾脏Rho/ROCK信号通路和TLR4/NF-κB信号通路有关。

黑骨藤石油醚提取物成分及抑菌活性研究

目的提取黑骨藤非极性成分,测定其主要成分及含量并研究其抑菌作用,为黑骨藤的进一步开发利用提供依据。方法以石油醚提取黑骨藤非极性成分,利用GC-MS联用技术并结合标准谱库检索,得出黑骨藤非极性的主要成分及含量,以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、粪肠球菌、绿脓杆菌、藤黄微球菌、青霉、白色念株菌和黄曲霉为供试菌研究非极性成分对于上述微生物的最低抑菌浓度和抑菌圈大小。结果共分离了39种成分和鉴定了其中28个成分,占非极性成分的71.8%。结论用石油醚提取黑骨藤全株非极性成分,利用GC-MS联用技术并结合标准谱库的检索,从得到的39个化合物中鉴定了28种成分,检出成分占非极性成分的71.8%。其中棕榈酸含量最高,占非极性成分总量的22.94%。黑骨藤非极性成分对受试菌种中大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、藤黄微球菌、粪肠球菌、黄曲霉、白色念珠球菌有明显的抑菌作用,对枯草杆菌、青霉效果不明显。

快速制备鼻腔给予LPS诱导帕金森病动物模型及评价

目的:经鼻腔途径给予脂多糖(LPS)可诱导帕金森病(PD)动物模型,但模型的建立需5个月之久。本课题旨在探讨一个快速建立PD模型的方法。方法:C57BL/6小鼠随机分为对照组和LPS模型组,每组9只。LPS模型组小鼠通过鼻腔滴入LPS(3 mg/kg),每侧鼻孔滴10μl,每3 d一次,连续7周,共计16次,对照组鼻腔滴入等体积生理盐水。7周后通过行为学实验检测小鼠运动能力,免疫荧光染色检测黑质多巴胺能神经元,Western blot检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)、α-突触核蛋白的表达,HPLC检测黑质神经递质(多巴胺、3,4-二羟基苯乙酸、高香草酸、去甲肾上腺素、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸)含量。结果:与对照组相比,LPS模型组小鼠运动能力明显下降,黑质多巴胺能神经元数量明显减少,黑质TH表达明显降低、α-突触核蛋白的表达显著增加,黑质神经递质含量明显减少。结论:本研究通过增加每次LPS经鼻腔给药剂量、减少给药次数,建立了符合行为学及病理学特征的PD小鼠模型,并将制备过程减为7周,可明显缩短PD发病机制、治疗策略及治疗效果的研究周期。

Fasudil促进体外培养骨髓源神经干细胞的增殖与存活

目的探讨法舒地尔（Fasudil）对体外培养骨髓源神经干细胞（BMNSC）增殖和存活的影响。方法取3～4周龄的C57BL／6小鼠，分离骨髓基质细胞并诱导产生细胞球，用免疫荧光染色鉴定细胞类型。羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记细胞，检测Fasudil促进BMNSC增殖能力。利用脂多糖（LPS）和γ干扰素（IFN-γ）联合处理BV-2小胶质细胞制备炎性条件培养液处理BMNSC，Fasudil干预，通过流式细胞术检测线粒体膜电位、碘化丙啶（PI）荧光值，探讨Fasudil对BMNSC的保护效果。结果免疫荧光染色证明骨髓源细胞球为神经上皮干细胞蛋白（nestin）阳性的神经干细胞。Fasudil处理明显降低CFSE平均荧光值。在LPS和IFN-γ联合作用下，BV-2小胶质细胞释放更多的白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）等炎性细胞因子，显著高于PBS处理组。该炎性条件培养液导致BMNSC线粒体膜电位明显降低并诱导更多的细胞死亡，而Fasudil处理则显著恢复线粒体膜电位接近正常值，减少细胞死亡，并且具有明显的剂量依赖性。结论Fasudil对体外培养BMNSC的增殖和存活具有显著的促进作用。

芪苈强心胶囊联合靶向药物治疗急性肺栓塞后所致慢性血栓栓塞性肺动脉高压疗效及对血管内皮功能及心肺功能的影响

目的观察芪苈强心胶囊联合靶向药物治疗急性肺栓塞后所致慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)疗效及对血管内皮功能及心肺功能的影响。方法将60例急性肺栓塞后所致CTEPH患者按照随机数字表分为观察组30例和对照组30例,对照组给予靶向药物治疗,观察组给予靶向药物联合芪苈强心胶囊治疗,2组疗程均为12周。记录2组临床疗效,观察2组治疗前后临床症状评分、6 min步行距离、呼吸困难程度、超声心动图检查指标、血管内皮功能指标、心肺运动试验参数的变化。结果观察组临床疗效显著优于对照组(P<0.05)。2组治疗后临床症状评分、mMRC呼吸困难量表评分、肺动脉收缩压(PASP)、右室舒张末期内径(RVEDD)、右心室Tei指数及血浆内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)水平均较治疗前明显降低(P均<0.05),6 min步行距离、三尖瓣环平面收缩期位移(TAPSE)及血浆一氧化氮(NO)水平均较治疗前明显提高(P均<0.05),观察组治疗后以上指标均优于对照组(P均<0.05)。2组治疗后心肺运动试验参数中峰值功率、峰值氧耗量、无氧阈、峰值氧脉搏、峰值分钟通气量、呼气末二氧化碳分压、峰值氧饱和度较治疗前明显升高(P均<0.05),观察组治疗后以上指标均明显高于对照组(P均<0.05)。结论芪苈强心胶囊联合靶向药物治疗急性肺栓塞后所致CTEPH疗效确定,不仅能降低肺动脉压力,改善临床症状,还能保护血管内皮细胞功能,从而提高心肺功能和运动耐量。

纤维支气管镜用于重症呼吸机相关肺炎的辅助治疗研究

目的探究纤维支气管镜用于重症呼吸机相关肺炎的辅助治疗临床效果。方法选取2015年1~12月医院行重症VAP治疗患者86例,随机分为A组和B组,每组43例。A组采用常规治疗,B组采用纤维支气管镜辅助治疗,比较2组临床治疗效果,呼吸动力学指标及炎性因子水平。结果 A、B组总有效率分别为76.74%和95.35%,B组明显优于A组（P〈0.05）;且B组痊愈率为67.44%显著高于A组（P〈0.05）。B组患者机械通气时间、感染有效控制时间、治愈时间分别为（6.48±1.12）d、（6.89±1.75）d、（7.81±1.87）d,均明显短于A组（P〈0.05）,A、B组菌株清除率分别为65.12%和88.37%,B组优于A组（P〈0.05）。与治疗前比较,2组患者PIP、Raw及WOB水平均下降,且B组降低程度更为显著（P〈0.05）,而Cdyn水平2组患者与治疗前比较均明显升高,且B组患者升高至（36.24±3.25）ml/cm H_2O,与A组差异有统计学意义（P〈0.05）。B组与治疗前及A组比较均明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;A组与治疗前比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论采用纤维支气管镜对VAP患者进行治疗,可有效缓解并改善患者临床表现,提高患者呼吸情况,使患者恢复正常生活健康质量,同时为选取相应抗生素提供依据,降低患者体内炎性因子水平,对提高患者治疗效果具有一定意义,且安全性及可行性均较高,治疗过程中患者未出现明显不良症状,可作为常规治疗方法进行推广。

口服烟酰胺核糖抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎的初步研究

目的:探讨口服烟酰胺核糖(nicotinamide riboside,NR)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗效果和作用机制。方法:采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG_(35-55))免疫C57BL/6雌性小鼠制备EAE模型,随机分为EAE组和NR组。从免疫后第3天开始,EAE组小鼠灌胃给予生理盐水,NR组小鼠灌胃给予NR,每天1次至免疫后第27天。免疫当天至免疫后第28天,观察并记录各组小鼠临床评分和体重。免疫后第28天处死小鼠,制备脾细胞悬液和脊髓组织冰冻切片。HE染色和髓鞘染色分别检测脊髓炎性细胞浸润和髓鞘脱失,Western blot和免疫荧光染色分别检测脊髓组织中ROCK-II、TLR4、p-NF-κB、iNOS表达及相应的阳性细胞数量,ELISA检测脾细胞培养液中TNF-α、IL1β和IL-6的含量。结果:口服NR可推迟EAE发病时间,减轻EAE临床症状,缓解小鼠体重丢失,减少外周炎性细胞浸润脊髓,减轻髓鞘脱失,降低脊髓组织中ROCK-II、TLR4、p-NF-κB及iNOS炎性相关蛋白表达,抑制脾脏炎性因子分泌。结论:口服NR对EAE具有显著的治疗效果,其治疗机制可能与NR抑制EAE的炎症反应有关。

液液萃取和大孔吸附树脂纯化银杏外种皮黄酮类化合物的比较研究

选取5种弱极性有机溶剂和3种弱极性大孔吸附树脂,就液液萃取法和大孔吸附树脂法对银杏外种皮黄酮类化合物的纯化效果进行比较。结果表明,以芦丁为对照,液液萃取法在产品质量和黄酮类化合物含量方面均低于大孔吸附树脂法,其中DM-130大孔吸附树脂对银杏外种皮黄酮类化合物的纯化效果最好,产品中黄酮类化合物含量达25.92%。

银杏外种皮黄酮类化合物的提取方法研究

分别以水、乙醇、丙酮作为提取溶剂,对银杏外种皮黄酮类化合物的不同提取方法进行了比较研究。结果表明,以乙醇作为提取溶剂,采用回流提取法提取银杏外种皮黄酮类化合物的效果最好,提取率超过84%,标准偏差为0.0009,RSD为0.10%。为银杏外种皮资源的开发利用提供了依据。

Hand In Hand联合教学法在生物化学教学中的应用

目的:探讨Hand In Hand联合教学法在生物化学教学中的应用效果。方法:选取医学检验专业两个班,随机分为实验组和对照组,分别采用Hand In Hand联合教学法和传统教学法授课,通过考试和调查问卷评价教学效果。结果:实验组成绩明显高于对照组(P<0.01);实验组学生的学习主动性、分析问题、解决问题等能力显著提高(P<0.05)。结论:Hand In Hand联合教学法在生物化学教学中效果良好。

生物化学实验教学的几点体会

生物化学实验是生物化学教学的重要组成部分,是培养学生发现问题、分析问题、解决问题及动手能力的必备环节,就如何提高生物化学实验教学质量进行了一定的分析和探讨。

GSYB型光栅数显式引伸计标定仪示值误差的测量不确定度评定及符合性评价

针对我所研制的GSYB型引伸计标定仪,详细介绍了标定仪示值误差校准的测量不确定度及符合性评价。

抓住三个基本教学环节,提高生物化学教学质量

生物化学是生命科学领域的重要学科,是医学院校一门重要的专业基础课。其涉及的学科多,知识面广,内容枯燥复杂。如何提高该课程的教学质量,最大程度地使学生理解掌握知识,是每一个教师都需要思考的问题。立足备课、讲课、改进三个基本教学环节,紧扣生物化学的学科特点,结合教学经历,探讨提高生物化学理论教学质量的有效途径。

GSYB型光栅数显式引伸计标定仪的研制

为了解决在0.5级引伸计示值误差和进回程示值误差测量工作中存在:B类引伸计标定器的测量准确度有不满足;A类引伸计标定器的给定位移量受量块标称尺寸所限制而有测量点不能均匀分布以及测量工作效率低等问题。研制出GSYB型光栅数显式引伸计标定仪,其性能指标完全满足0.5级引伸计示值误差和进回程示值误差的测量准确度要求。同时,还可实现检测原始记录和数据处理的智能化,大大提高了检测工作效率。

烟酰胺核糖在神经系统疾病中的研究进展

烟酰胺核糖是一种天然的维生素B_(3)类营养物质,主要存在于酵母、细菌、牛奶和哺乳动物中。烟酰胺核糖具有神经保护作用,其神经保护机制包括提高机体NAD^(+)水平、抗氧化作用、保护线粒体、抗炎、增加神经营养因子分泌等,在治疗阿尔茨海默症、帕金森症等神经系统疾病方面具有一定的潜力。烟酰胺核糖具有良好的安全性和治疗窗口,但高剂量摄入会产生副作用。深入研究烟酰胺核糖的摄入剂量和在各种神经系统疾病中的神经保护机制,将为筛选神经系统疾病治疗药物和神经系统疾病的预防、治疗提供重要的实验基础和理论参考。

生命教育视域下中学体育审思

生命教育与中学体育教育能够加以连接,相辅相成,互相促进;与此同时,生命教育的理念能够对中学体育教育的价值加以拓展,为中学体育教育拓宽思路,提升战略发展的层次。

银杏外种皮双黄酮类化合物银杏黄素定性与定量检测

目的:为了对银杏外种皮不同提取分离工艺得到的产品中银杏黄素进行定性和定量检测。方法:采用TLC法,以氯仿-苯-丙酮-甲酸(3:5:1.5:1.5)为展开剂进行展开,分离银杏外种皮双黄酮类化合物,并用HPLC法进行含量测定。结果:银杏外种皮双黄酮类化合物可达到较好的分离检测效果。结论:本法简便、准确、重现性好,可用于银杏外种皮双黄酮类化合物的分离和含量测定。

三段式课堂教学法在生物化学教学中的应用研究

目的:探讨三段式课堂教学法在生物化学教学中的应用效果。方法:选取中医学专业两个班,随机分为试验组和对照组,分别采用三段式课堂教学法和传统教学法授课,通过考试成绩及调查问卷评价教学效果。结果:三段式课堂教学法考试成绩明显高于传统教学法(P<0.01),学生主动性、知识水平和综合能力显著提高(P<0.05或P<0.01)。结论:三段式课堂教学法在生物化学教学中效果良好。

大孔吸附树脂分离纯化银杏外种皮黄酮类化合物研究

本文从9种性能不同的大孔吸附树脂中,筛选出适用于分离、纯化银杏外种皮黄酮类化合物的弱极性大孔吸附树脂DM-130,其静态吸附量为6.59mg/g,静态和动态解吸率均为90%以上。同时发现升高温度,升高pH值有利于提高吸附量。实验结果表明:用DM-130作为纯化树脂,先用水洗,再用90%乙醇洗脱,用量为4～5倍树脂体积,洗脱液浓缩干燥后的产品中黄酮类化合物的含量为25.87%,收率为2.68%。