主要进出口经济鱼类及其制品分子鉴定技术的研究进展

随着我国进出口贸易的不断发展,进出口鱼类品种繁多,数量巨大。但部分国内外企业受高额利润驱使,以假充真、以劣充好事件时有发生,鱼类制品更是真伪难辨,掺假状况极其普遍。通过形态学和生物学方法已经不能满足对鱼类种属鉴定。近年来,随着分子生物技术的迅猛发展,分子检测技术在鱼类品种鉴定领域得到广泛应用。本文针对不同分子鉴定技术进行阐述,包括普通聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术、多重PCR技术、实时定量PCR技术、DNA条形码技术、环介导等温扩增检测技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、聚合酶链反应-限制性酶切多态性技术(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)以及随机扩增多态性DNA检测技术(random amplified polymorphic DNA),并根据不同检测技术的特点进行分析,为进出口鱼类鉴定提供技术支撑。

牛磺酸防治糖尿病及其并发症的研究进展

牛磺酸（Taurine）又名牛胆酸、牛胆碱、牛胆素,1827年首次从牛胆汁中分离出来的,主要存在于动物组织的细胞质中,在动物的脑、心、肝、肾、肌肉等组织中含量较为丰富。牛磺酸在过去被认为没有多少营养价值,但是通过近年来的大量研究证明,牛磺酸具有抗氧化、解毒、

水貂阿留申病毒地方强毒株ADV-LN的分离鉴定

本研究采用对流免疫电泳方法(CIEP)检测辽宁水貂养殖场疑似水貂阿留申病毒(aleutian mink disease virus,ADV)水貂血清抗体,采集抗体阳性水貂的肝脏、脾脏、肾脏和肠系膜淋巴结组织,电镜观察存在细小病毒样颗粒。组织液研磨无菌处理后,接种CRFK细胞,盲传6代,取病毒细胞分离液用PCR方法检测,呈ADV阳性。将病毒分离液纯化后接种健康水貂,隔离观察,接种后3d即出现食欲减退,贫血,被毛无光泽,后期出现拒食、狂饮、死亡,个别水貂出现神经症状,表现抽搐、痉挛、步态蹒跚、共济失调,证明分离获得的病毒为ADV强毒株,命名为ADV-LN株。

水貂阿留申病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立一种快速、敏感检测水貂阿留申病毒(AMDV)的方法,本研究根据AMDV的VP2基因保守区设计特异性引物和MGB探针,并优化检测反应条件,建立了AMDV的TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果显示,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.0×10~2拷贝/μL^1.0×10~8拷贝/μL内具有良好的线性关系,相关系数(R^2)为0.998。该方法仅对AMDV的靶基因扩增呈阳性,而对猪细小病毒、犬细小病毒、水貂肠炎细小病毒等相关病毒检测结果均为阴性,特异性良好。该方法对AMDV检测的灵敏度为10拷贝/μL,为普通PCR灵敏度的100倍;组内和组间重复性试验表明该方法的组内和组间变异系数均小于2%,具有良好的重复性。应用建立方法和普通PCR方法分别对40份疑似临床组织病料样品进行检测,该方法检出率比普通PCR高约7.5%。本研究结果表明建立的AMDV TaqMan-MGB荧光定量PCR方法灵敏、快速、特异性强、重复性好,适用于对AMDV的快速定量检测。

复合菌制剂和抗生素对断奶仔猪生长性能的研究

试验在断奶仔猪日粮中添加复合菌制剂,研究该制剂对断奶仔猪生长性能的影响及作用机制。选用平均体质量为(7.58±0.03)kg的135头杜×长×大三元杂交断奶仔猪,采用3×3两因子完全交叉试验设计,研究了饲料中添加3个复合菌制剂水平(0、0.1%和0.15%)和3个抗生素(金霉素+抗敌素)水平(0、0.1%+0.04%及0.15%+0.06%)对断奶仔猪生产性能的影响。试验设9个处理,每个处理3个重复,每重复5头猪。试验期为28d,分为前期(1～14d)和后期(15～28d)2个阶段。结果表明:1)复合菌制剂和抗生素对断奶仔猪前期、后期和全期的日增质量、采食量及料重比有显著影响;对后期腹泻率有显著影响;2)饲料中添加0.1%复合菌制剂和抗生素(0.1%金霉素+0.04%抗敌素)及添加0.1%复合菌制剂和抗生素(0.15%金霉素+0.06%抗敌素)对断奶仔猪全期日增质量及采食量的影响显著好于其他各组。这表明,复合菌制剂和抗生素可提高断奶仔猪生产性能,且二者存在互作效应。

氟苯尼考的研究进展及应用

氟苯尼考（FlorFenicol）,又称氟甲砜霉素,是氯霉素类广谱抗菌药物中甲砜霉素的3位氟衍生物。氟苯尼考是美国先灵-葆雅（ScheringPlough）公司于1988年成功研制的一种新型兽医专用氯霉素类广谱抗菌药；1990年首次在日本上市，用于水产养殖业，商品名为Aguafen，

犬瘟热病毒检测技术的研究进展

犬瘟热是由犬瘟热病毒(CDV)感染引起的一种传染性强、范围广、致死率极高的动物疾病,易感动物主要是犬科、猫科和鼬科动物,感染后不仅给宠物饲养和特种经济养殖带来巨大经济和精神损失,还会引起社会恐慌。因此,研制一种快速、准确的检测方法具有重要意义。文章从犬瘟热病毒的流行病学、发病机理及实验室检测CDV经常采用技术,包括血清学检测方法、分子生物学检测技术进行详细阐述。

甲醇对HepG-2细胞毒理作用的初步研究

以HepG-2细胞作为研究对象,不同浓度甲醇作用细胞,观察细胞形态变化,采用CCK-8法测定吸光度值,确定甲醇对细胞的凋亡诱导作用。结果表明,当甲醇浓度达到8%时,对细胞毒力作用显著,所以,在使用甲醇作为贝类毒素的溶剂时,甲醇的使用浓度要<8%。

猪圆环病毒2型检测技术研究进展

猪圆环病毒病(Porcine Circovirus Diseases,PCVDs)的临床特征和系统病理损伤与其他疾病十分相似,很难根据临床症状做出正确的诊断,因此实验室对猪圆环病毒2型(Porcine Circovirous Type2,PCV2)的检测结果成为了诊断的重要依据之一,本文将对实验室检测PVC2经常采用的血清学和分子生物学检测技术进行概述与比较。

原多甲藻酸(AZA1)对Hep-G2细胞毒理作用的研究

为了研究原多甲藻酸(AZA1)的毒理作用,试验以Hep-G2细胞为作用对象,采用CCK-8细胞增殖-毒性检测试剂盒测定吸光度值,对不同浓度原多甲藻酸的毒理作用进行测定。结果表明:当原多甲藻酸浓度达到40 nmol/L时,对细胞毒理作用显现;当浓度达到60 nmol/L时,对细胞毒理作用显著。说明双壳贝类中一定量的原多甲藻酸会对人类健康产生影响。

检疫犬使用方法的研究及探索

检疫犬作为一种特殊的检疫工具被广泛应用在旅检现场的查验工作中，具有快速、准确等特点，弥补了传统检查方式的开包率高、检出率低、通关时间长等不足。提高了查验的准确率，减少了开箱次数，缩短了通关时间，使现场查验工作更为快速、准确、

凝胶渗透色谱-气相色谱-质谱联用快速测定大豆中克百威、乙草胺、甲草胺、异丙甲草胺、氟乐灵的残留量

建立了气相色谱-质谱(GC/MS)法,电子轰击离子化(EI)法同时测定及确证大豆中克百威、乙草胺、甲草胺、异丙甲草胺、氟乐灵的残留量。试样经乙腈提取,共提物中的色素和油脂用凝胶色谱(GPC)净化去除。采用GC/MS-SIM法对克百威、乙草胺、甲草胺、异丙甲草胺、氟乐灵进行定性和定量分析。结果表明,采用GPC净化,并设定收集时间在5～15min内,能够有效避免大豆中油脂峰干扰,缩短分析时间。5种农药的加标回收率为66.6%～104.9%,测定的相对标准偏差为2.2%～12.3%。5种农药在0.01～0.1mg/L范围内具有较好的线性,相关系数达0.996以上,方法中克百威、乙草胺、甲草胺、异丙甲草胺、氟乐灵的定量限均为0.01mg/kg。

超高效液相色谱-串联质谱法检测具有治疗镇咳平喘功效的药物成分

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法检测镇咳平类药物中4种药物成分的检测方法。方法采用C18色谱柱进行分离,以水(2 mmol/L甲酸铵-50 mmol/L甲酸)-乙腈(2 mmol/L甲酸铵-50 mmol/L甲酸)作为流动相进行梯度洗脱,采用正离子电喷雾,多反应监测模式(multiple reaction monitoring, MRM)进行定性定量测定。结果在线性范围0.05~2μg/g区间内,方法相关性较好,检出限为0.02μg/g,定量限为0.05μg/g。方法回收率为85%~103%,相对标准偏差为1.02%~3.69%。结论方法灵敏度好、精密度高、操作简便,适合应用于此类保健食品中非法添加药物成分的检测。

4种鳕鱼多重PCR检测方法建立

为了建立可对鳕鱼DNA进行特异性检测的PCR方法,从GenBank数据库下载太平洋鳕、大西洋鳕、狭鳕、绿青鳕4种鳕鱼的突触素样蛋白(pantophysin Pan I)基因序列,并用Bioedit 7.0软件对上述不同鳕鱼的该基因碱基序列进行比较。根据引物设计的基本原则,选择了鳕鱼与其他鱼类碱基序列上差异位点较多片段,设计出太平洋鳕、大西洋鳕、狭鳕、绿青鳕PCR特异性引物。用该引物分别对从7种鳕鱼和14种非鳕鱼鱼类的肌肉、脏器组织中提取的DNA进行PCR扩增。实验将所设计的引物通过两种引物组合、三种引物组合以及四种引物组合,进行多重PCR试验,结果表明,大西洋鳕、绿青鳕、太平洋鳕和狭鳕四种鳕鱼分别出现597、392、266、527 bp大小的清晰条带,4种引物之间相互不干扰,具有显著特异性。该方法具有较高灵敏度,低至4 ng/μL混合样品仍可检出。

关于全球范围内三种马病疫情动态及防控思考

2019年至今,全球共发生数十起规模不等、强度不一的马病疫情。本文梳理了此期OIE通报的全球马病疫情动态,并总结疫情发生特点以及相关成员采取的调查、诊断及处理措施,重点着眼于全球马病流行特点进行防控思考总结。

犬助人力守国门

2018年2月15日晚，随着训导员邢绍原一声干脆的口令落下，大连机场检验检疫局加班的检疫犬也结束了一天忙碌而充实的工作。这是邢绍原和他的小伙伴检疫犬“五月”日常工作中的一天，也是他们一同度过的第5个除夕夜。

防生化防护服结构优化研究

防生化防护服是医疗以及从事生物化学研究人员所必需的防护装置,也是工作人员与有毒有害物质隔离的有效措施。但是,目前大多数防生化防护服都使用正压原理,使得工作人员操作的灵活性下降,并且穿脱困难不易掌握;同时,在工作中还存在着面罩结雾、服内温度高等问题,不仅舒适性差,而且严重影响工作人员的工作效率。本研究基于防护服以上弊端,在保证防护服防护性能的前提下,通过引入新设计理念、优化防护服结构,从提升防护服舒适性、灵活性方面着手,对防护服进行科学合理的优化改良,对医疗服务及生物化学相关行业发展具有十分重要的推动作用。

民族医药的“骄子”——记阜新蒙医药研究所

在祖国塞北,有一颗正在崛起的民族医药新星——辽宁省阜新蒙医药研究所。这是目前国内唯一一所集科研、医疗、教学、制药四位一体的民族卫生科研单位。在党的民族政策指引下,该所在医疗和研究中不断取得新的成绩。特别是由于医治一些疑难病症有特殊的功效,越来越引起国内外人们的注视。蒙医药有着悠久的历史。早在1669年(清康熙八年),在今阜新蒙古族自治县佛寺乡就修建了有“东藏”之称的佛教圣地”瑞应寺”。寺内“门巴扎仓”(医学院)培养出了众多的蒙医药人才。解放后,阜新蒙古族自治县十分重视扶持蒙医药的发展。1989年,经省人民政府批准。

快速鉴定虾夷马粪海胆及其制品分子生物学方法

通过在虾夷马粪海胆CoxI序列差异处设计特异性引物,建立了一种虾夷马粪海胆SYBR Green荧光PCR定性检测方法,并进行了引物特异性和灵敏度分析。结果表明:检测的虾夷马粪海胆和7种近缘物种中,只有虾夷马粪海胆出现明显扩增,该方法检测灵敏度可达0.1ng/μL。通过对市售海胆制品的检测验证,该方法特异性强,灵敏度高,可用于食品中虾夷马粪海胆成分的鉴定。