基于网络药理学探析核心中药治疗颈椎病的作用机制

目的:预测中药抗颈椎病主要活性成分及其作用靶点,探讨其成分-靶点的作用机制。方法:检索近10年内服治疗颈椎病的有效中药复方,应用Access 2003数据库录入复方,应用Apriori算法进行关联分析,运用软件Cytoscape建立中药配伍网络,选择网络相对中心度较高的前5味药作为核心中药,通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)数据库查询中药的化学成分,运用Uniprot数据库查询靶蛋白对应的Gene Name,应用Cytoscape3.6进行成分-靶标-通路的网络分析和GO分析,通过KOBAS网络富集分析。结果:共纳入复方332首,当归、葛根、黄芪、川芎和甘草构成核心中药;共得到419个疾病靶标以及包括丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated Protein Kinase,MAPK)1、MAPK14、CCND1、EGFR、FOS、SRC等10个核心靶标在内的312个药物靶标。根据靶标对应的化学成分,从五味核心中药中筛选出包括槲皮素、大豆苷元、山柰酚、葛根素等146个成分。结论:五味核心中药很可能主要作用于MAPK14、FOS、CXCL8、CCL2、MAPK1、SRC等核心靶标及IL-17通路、MAPK通路,P13k-AKT信号通路、TNF信号通路等关键通路,通过调控细胞凋亡,延缓椎间盘老化,降低炎症介质的表达,减轻疼痛,通过减少缺血性伤害治疗眩晕以及促进钙离子释放,减缓肌肉痉挛来达到治疗颈椎病的目的。

Hartley豚鼠增龄过程中腰椎间盘退变髓核组织形态变化及其生化研究

目的研究Hartley豚鼠腰椎间盘自然老化及退变过程中脊索性髓核向纤维软骨髓核转化的规律及其血液生化指标与腰椎间盘退变的关系。方法Hartley雌性豚鼠40只,分别为1、1.5、2、2.5、3月龄,每组各8只。通过HE观察豚鼠椎间盘髓核退变情况,测定其血清中蛋白多糖水平。结果2月组椎间盘形态即有退变。血清蛋白多糖含量随年龄的增长而下降,各组间差异显著。结论随着年龄的增长,椎间盘退变的同时,出现血清蛋白多糖含量的降低。随着椎间盘的不断老化,终板的软骨细胞向髓核迁移,脊索性髓核向心性皱缩并最终完全被纤维软骨性髓核取代。在Hartley雌性豚鼠椎间盘退变的过程中,这一转化完成得更快、更早。

基于免疫印迹实验验证芍药甘草汤治疗骨关节炎关键靶点和通路

目的基于免疫印迹实验深入探究芍药甘草汤对骨关节炎(osteoarthritis,OA)的药效机制。方法将40只大鼠随机分为4组,分别为假手术组(sham组)、模型组、芍药甘草汤(SGD)中剂量组(4.32 g/kg)、SGD高剂量组(8.64 g/kg)。除sham组以外的所有组大鼠使用内侧半月板失稳术(destabilization of the medial meniscus,DMM)构建骨关节炎模型,所有大鼠在手术造模后第1天开始灌胃给药,每日1次,持续8周,SGD组给予一定剂量的SGD,sham组和模型组给予等量的蒸馏水。给药8周后,对所有大鼠进行麻醉处死并取材。苏木素-伊红(HE)染色观察软骨组织形态学改变,免疫印迹法(Western blot)检测软骨组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及C-myc蛋白的表达水平。结果与sham组比较,模型组、SGD中剂量组及高剂量组大鼠关节软骨的C-myc和p38分子蛋白表达水平明显升高(P<0.01),用芍药甘草汤干预后,其蛋白表达出现下降趋势,且下降幅度与芍药甘草汤浓度呈正相关,当芍药甘草汤浓度达到8.64 g/kg时,与模型组相比差异具有统计学意义(P<0.001)。结论芍药甘草汤能抑制OA大鼠软骨中p38和C-myc蛋白的过表达。

银黄方膜分离物解热抗炎作用的研究

目的在膜分离工艺和有效成分研究的基础上,对银黄方膜分离物的解热抗炎作用进行研究,以了解膜分离工艺的物质基础对银黄方相关药效的影响。方法以解热、抗炎为主要药效学指标,观察银黄方对鲜酵母致大鼠体温升高的抑制作用,对羧甲基纤维素钠致小鼠白细胞游出抗炎作用。结果银黄方膜分离物第三、四、五级膜分离物的降温作用出现在致热后的3h,降温作用持续2h,均与模型组比较差异显著(P<0.01,P<0.001);银黄方膜分离物第三、四、五级组小鼠白细胞游出数量明显减少,与模型组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论银黄方膜分离物具有解热及抗炎作用,进一步证明了膜分离技术应用于中药复方有效成分或有效部位的分离富集的可行性。

肾气亏虚型OA未病临床诊断试验的初步研究

目的:研究骨性关节炎(OA)患者尿液中Ⅱ型胶原C-端肽(CTX-Ⅱ)、血清中软骨寡聚基质蛋白(COMP)水平与病变严重程度的相关性,探讨其作为OA早期诊断及病情评估指标的价值和意义。方法:采用ELISA方法测定OA患者、类风湿关节炎患者及同期确诊的健康人的尿液中CTX-Ⅱ和血清中COMP水平。结果:与健康人群组比较,肾气亏虚型OA未病组与肾气亏虚型OA已病组CTX-Ⅱ含量增加,差异有统计学意义;肾气亏虚型OA未病组、肾气亏虚型OA已病组与类风湿关节炎患者组COMP含量增加,差异有统计学意义。结论:CTX-Ⅱ和COMP可作为OA辅助检查指标用于OA的早期诊断。

补肾活血方对沙鼠增龄过程中腰椎软骨终板钙化干预作用的初步研究

目的:探讨补肾活血方对腰椎软骨终板钙化的干预作用。方法:选取30只2月龄和7月龄健康雄性长爪沙鼠,分别喂养至2月龄(50~60 g)和12月龄(60~80 g)建立老龄沙鼠模型,采用随机数字表方法分为5组:正常组(n=6),模型组(n=6,给予生理盐水4 ml/kg,灌胃30 d),补肾活血方低剂量组(n=6,给予补肾活血方1.9×10-3 ml/g灌胃30 d),补肾活血方中剂量组(n=6,给予补肾活血方3.8×10-3 ml/g灌胃30 d),补肾活血方高剂量组(n=6,给予补肾活血方7.6×10-3ml/g灌胃30 d),干预组从7月龄开始连续给药1.36 g,30 d。正常组2月龄及其他组12个月龄时处死动物,取腰椎间盘组织,HE染色体视法分析腰椎体软骨终板组织形态学、血管芽面积、非钙化/钙化层比值,兔单克隆抗体免疫组化染色方法测定软骨终板X型胶原、BMPs的表达。结果:软骨终板血管芽相对面积测量显示,与模型组相比,补肾活血方中剂量组,正常组增高(P<0.05),大、小剂量组虽各有不同程度的增加,但差异均无统计学意义(P>0.05);软骨终板非钙化层/钙化层厚度比值测量显示,与模型组相比,补肾活血方中剂量、正常组增加,差异具有统计学意义(P<0.05),而补肾活血方大、小剂量组虽各有不同程度的增加,但差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫组化染色软骨终板X型胶原的表达与模型组相比,正常组、补肾活血方低、中、高剂量组均降低,差异具有统计学意义(P<0.01);BMPs的表达,与模型组相比,正常组、补肾活血方中剂量组升高,差异具有统计学意义(P<0.01),大、小剂量组虽各有不同程度的升高,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾活血方中剂量可延缓增龄过程中椎间盘软骨终板钙化,提示可作为早期椎间盘退变的预防用药。

基于数据挖掘的风寒湿痹方剂用药规律研究

目的探讨风痹、寒痹和湿痹方剂用药的配伍规律。方法筛选古籍中治疗风痹、寒痹和湿痹方剂,建立数据库,运用频次分析、假设检验与关联规则分析前30味高频药物,量化方剂性味归经并以此为变量对每类方剂进行聚类分析。结果共收集338首方剂,其中风痹122首、寒痹110首、湿痹106首。3类方剂中前30味高频药物中共有21味相同药物;均以补虚药使用频次最高,其次是风痹发散风寒药、寒痹温里药、湿痹渗湿化湿药。寒痹中肉桂、附子、当归、牛膝、羌活、芍药、黄芪和湿痹中茯苓、白术使用比例明显高于其他两类药物。3类方剂均以微温为主,其次是温、平。每类方剂按药性聚为5个主类时治则分类清晰。结论风、寒、湿痹3类方剂用药相互兼顾又各具特色,多种数据挖掘方法结合能够全面分析痹证治则治法的科学内涵。

外用白脉软膏对家兔桡骨骨折模型愈合过程及骨痂组织结构的影响

目的:观察白脉软膏影响家兔骨折愈合过程的作用及可能的机制。方法:机械法建立家兔桡骨骨折动物模型,步态测试系统分析动物患肢着地力;软组织张力测试仪记录动物骨折处软组织张力;X线摄片观察骨折线形成;骨病理切片观察骨折处骨组织结构。结果:外用白脉软膏可增加模型动物患肢着地力,升高模型动物骨痂处X射线扫描评分,促进骨折后新骨生长。结论:外用白脉软膏对骨折模型动物骨伤愈合过程具有明显的促进作用。

钻孔法制造大鼠胫骨缺损性骨折动物模型初探

目的:比较两种缺损性骨折动物模型损伤量、愈合时间和愈合方式的差异,为探索建立新型缺损性骨折动物模型提供研究依据。方法:SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、锯开组和钻孔组3组,每组20只。正常组不做任何处理,其他两组动物经麻醉后,钻孔组用低速骨钻在胫骨平台下外侧钻约1mm的圆孔缺损,缺损应能达到骨髓腔,但不可钻通对侧皮质(此方法为钻孔法);锯开组用骨锯在胫骨平台下外侧锯约3mm左右的缺损,缺损应能达到骨髓腔(此方法为钻开法)。术后2周和4周两个时间点每组取10只动物,检测大鼠胫骨的骨密度、骨灰重、拍摄胫骨X线片并进行胫骨病理切片观察,检测术后2周时骨Ca、P含量。结果:造模后2周,钻孔组和锯开组的骨密度,骨灰重,骨Ca、P含量均明显低于正常组(P<0.05或P<0.01)。钻孔组和锯开组胫骨X线片可见骨折线模糊,病变端密度增高,骨痂形成。钻孔组和锯开组病理切片中均可见新生骨小梁形成。造模后4周时,钻孔组、锯开组与正常组相比骨密度、骨灰重无统计学差异(P>0.05),锯开组胫骨X线片中骨痂较钻孔组明显。钻孔组和锯开组动物胫骨病理切片示骨小梁粗大,并逐步融合成板状骨,锯开组动物骨痂处较钻孔组有较多炎性细胞浸润。结论:钻孔法和锯开法均可建立大鼠胫骨缺损性骨折模型,并且在损伤量接近的情况下,两种模型的愈合时间和方式相近。钻孔法操作相对简单规范,损伤量较易控制,并且较少出现炎性细胞浸润和骨不愈合。

基于药性组合模式的3种腰痛方剂聚类分析

目的研究腰痛方剂在"性、味结合归经"层面上的配伍关系,揭示其内在规律。方法筛选古籍文献中治疗肾虚、寒湿和瘀血腰痛的方剂,信息标准化后建立Access数据库,量化处理每个方剂的性味归经,并以此为变量对每种证型的方剂分别聚类分析。结果每种腰痛方剂聚为5个主类时以性微温或温,味辛甘苦,归肾肝脾为主。药性组合特征:肾虚型:甘-微温-肾肝(63%);辛甘苦-微温-肝脾肾(23%);辛苦-温-肾脾(4%);辛甘-热-肾脾心(4%);苦甘-微寒-肾肝(3%)。寒湿型:苦辛-微温-肾肝(31%);辛甘-温-肾肝(26%);辛苦-温-脾胃(14%);甘-微温-肝肾(12%);甘-温-脾胃(11%)。瘀血型:辛苦-微温-肝(27%);甘苦-微温-肾肝(23%);辛甘-温-肝肾(21%);辛苦-微温-脾肾肝(13%);辛-温-肝脾(7%)。结论方剂的组合药性聚类能够反映治则治法的科学内涵,可为配伍规律的研究提供新思路。

显微红外光谱法研究豚鼠膝关节软骨下骨的增龄性改变

应用显微FTIR技术原位分析雌性Hartley豚鼠随月龄增加胫骨关节软骨下骨的化学变化。红外光谱测定三种月龄(1月、2月和3月)豚鼠软骨下3个不同吸收颜色的骨小梁区(a,b,c)和中央骨髓区(d)。结果显示:(1)随月龄增加,骨小梁总面积增加,与正常骨小梁谱图相似的a区减少,d区波形有逐渐向a区发展的趋势。(2)2月龄和3月龄的b和c区AmideⅢ红移以c区红移显著并且变成肩峰,代表核酸和多糖的吸收峰峰强是a区的7倍。(3)三种月龄的c区均出现了β型糖苷键吸收峰。(4)IAmideⅠ/IAmideⅡ在2月b区最大,3月各区最小,IAmideⅢ/IAmideⅡ在2月、3月由a到c依次降低,IνsPO-2/IAmideⅡ在2月、3月的b和c区较相应a区高7倍以上。结果符合骨关节炎不同阶段软骨下骨的组织结构及化学组成的变化规律。初步研究表明,显微光谱成像技术结合FTIR可原位分析不同区域的软骨下骨小梁和骨髓的分子组成,为骨关节炎软骨下骨组织病理学的分子水平研究提供了可靠信息。

豚鼠原发性骨关节炎的关节软骨显微傅里叶变换红外光谱研究

应用显微傅里叶变换红外光谱技术原位分析雌性Hartley豚鼠胫骨关节软骨的化学组成。红外光谱测定包含三种月龄(1月、2月和3月)和3个软骨层次(表层、中层和深层)。结果表明,随着月龄的增加,表层和中层FTIR光谱的主要吸收峰峰位红移,深层吸收峰先红移后蓝移。软骨中胶原蛋白、核酸和蛋白多糖的红外光谱具有如下特征:峰强比I1 657/I1 548,I1 074/I1 548和I1 074/I1 237在软骨表层和中层随月龄递降,而在软骨深层2月龄的比值最低。结果符合关节软骨在不同退变阶段化学成分的变化规律,且显微光谱成像技术转化的各月龄胫骨平台二维图像高度符合相应的病理描述。初步研究显示,显微FTIR技术可原位分析不同层次软骨组织的分子组成,能为研究软骨疾病的发病机理提供可靠信息。

Mallory染色法在椎间盘退变组织染色中的应用

背景:椎间盘退变的同时伴随有组织结构和成分的改变。采用多种染色剂连续复染形成多元色的组织学图形,可观察到各组织成分的不同颜色以及椎间盘退变时的颜色变化,在分辨力的显现上,比单纯形态学的改变更明显且易于分辨。目的:从组织形态和颜色变化两方面观察Mallory三色染色对椎间盘的染色效果。方法:取1,1.5,2,2.5和3月龄Hartley豚鼠L4～5椎体,制备中央冠状面椎间盘组织切片。用Mallory染液染色,光学显微镜下观察髓核、软骨终板和纤维环各区域形态和颜色的变化。SPOT-Ⅱ数码成像系统拍摄图像。结果与结论:Hartley豚鼠椎间盘退变程度随鼠龄增长自然加重。1月龄豚鼠的髓核形态正常,无色透明。在1.5～3月龄豚鼠中,髓核逐渐退变,由局部发展至全部基质呈现浅蓝着色,表明有胶原沉积,其形态上可见脊索细胞呈现软骨样细胞变性,髓核面积逐渐缩小并逐渐被纤维软骨样组织替代,直至在3月龄时呈现"蛇纹石"样外观。其终板上紫红色软骨细胞带随鼠龄增长呈现出不规则形态直至消失,其形态上可见软骨细胞逐渐减少。外纤维环红色和橘黄色的面积随着鼠龄增长而增加,表明有纤维素样变性,其形态上可见明显的板层状结构。内纤维环蓝色的面积随着鼠龄增长逐渐缩小。结果显示Mallory三色法用于Hartley豚鼠椎间盘染色时,在髓核、软骨终板和纤维环上,可从色彩、形态两方面显示出对基质和细胞具有良好的组织分辨力,能从形态和成分变化的角度反映自然增龄过程中椎间盘组织的退变情况。

有关缺血再灌注损伤的研究进展

缺血再灌注损伤后的恢复是比较复杂而缓慢的过程,它对心肌梗死、中风、器官移植和心血管手术等有着重要的影响因素,缺血再灌注损伤主要发生在白细胞-内皮细胞的相互作用、钙超载、氧自由基的反应和补体系统等方面。文章综述对缺血再灌注损伤的研究进展提供新的思路和治疗手段,从而对病人的治疗取得更好的效果。

独活寄生汤治疗膝骨关节炎的研究

经典名方独活寄生汤具有抗炎、镇痛、扩张血管、改善循环和调节免疫功能等作用,在临床上广泛应用于治疗膝骨关节炎、腰椎间盘突出症、骨质疏松、颈椎病等骨科疾病疗效确切,可显著改善患者疼痛、活动受限等症状,且副作用小,不良反应较少。现代研究发现独活寄生汤治疗膝骨关节炎以黄酮类、香豆素类、甾体类及多糖类等有效化学成分为基础,通过调控相关炎症因子、干预氧化应激、抑制细胞外基质降解、影响细胞增殖和凋亡等不同途径发挥作用,体现了中药复方多成分、多靶点、多途径的治疗特点。笔者从临床疗效、有效成分及药理机制等方面对近10年的文献进行述评,以期进一步明确独活寄生汤治疗膝骨性关节炎的药效活性成分及药理作用机制,为今后的临床精准用药提供依据与参考。

糖皮质激素抑制Leptin、VEGF蛋白表达诱导骨质疏松作用机制研究

目的通过比较糖皮质激素诱导骨质疏松模型大鼠(GIOP)在成模前后骨密度、病理组织以及瘦素(leptin)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白差异表达变化阐释糖皮质激素性骨质疏松的作用机制。方法采取大腿内侧交替肌肉注射地塞米松注射液(DEX)建立骨质疏松症大鼠实验模型,连续注射8周,造模8周后处死各组大鼠,对右侧股骨胫骨进行骨密度检测、HE染色,确定最佳造模剂量,继而通过免疫组织化学、蛋白免疫印迹的方法检测正常SHAM与DEX大鼠Leptin、VEGF蛋白的表达。结果结合骨密度和HE染色的结果,确定DEX 2.5 mg/kg为地塞米松注射液诱导继发性骨质疏松的最佳造模剂量,免疫组织化学和蛋白免疫印迹检测发现,与SHAM组相比,DEX 2.5 mg/kg组大鼠Leptin、VEGF蛋白的表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖皮质激素诱导的骨质疏松是通过抑制Leptin、VEGF蛋白表达,抑制血管生成进而抑制成骨发挥作用的,据此推测Leptin、VEGF可能是糖皮质激素性骨质疏松发病的潜在作用靶点。

高速公路工作宽度受限护栏的设计与应用

为了解决部分高速公路护栏工作宽度受限问题、安全防护问题、景观设计问题,依据研究经验、理论分析数据、仿真模拟结果,提出了一种A级和一种SB级梁柱式钢护栏设计方案。按照《公路护栏安全性能评价标准》的规定,采用实车足尺碰撞试验对这2种护栏的安全性能进行评价。试验结果表明:设计的2种护栏的拦截功能、导向功能、缓冲功能均满足要求,在应用中可成功防护事故车辆,取得了良好的应用效果。

炼油厂酸性水汽提装置的典型流程和工艺设计参数的选择

对炼油厂酸性水的来源和种类进行分类说明,简要介绍了单塔低压汽提、双塔加压汽提和单塔加压侧线抽出汽提等3种酸性水汽提工艺的典型流程及其区别。针对近年国际上主流的而国内较少采用的循环泵回流的单塔低压汽提工艺进行重点阐述,按流程顺序对酸性水闪蒸罐、酸性水储罐、酸性水汽提塔、循环泵回路等各主要设备做了较为详细的工艺设计参数的分析,并探讨了设计上的着眼点和基本原则;指出在设计过程中选择合理、优化的工艺参数是酸性水汽提装置高效、平稳运行的关键。

交通运输企业财务管理存在的问题与对策

交通运输企业是经济发展中的重要组成部分之一。在进行交通运输企业发展的过程当中,财务管理也是促进行业发展的重要部分,在实际进行管理的过程当中,财务管理存在各种各样的问题。本文就对交通运输企业,财务管理存在的问题及对策进行详细的说明,从交通运输企业财务管理的重要性出发,对其存在的问题及解决措施进行详细的阐述。