泼尼松诱导试验评估儿童急性淋巴细胞白血病预后

目的探讨泼尼松诱导试验评估儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)预后的价值。方法126例ALL初治患儿按ALLXH99治疗方案行泼尼松诱导试验,口服泼尼松(60mg/m2)7d和氨甲蝶蛉加阿糖胞苷鞘内注射1次后外周血涂片计数幼稚淋巴细胞数。若幼稚淋巴细胞数<1000/μL,为泼尼松反应良好;如幼稚淋巴细胞数≥1000/μL,为泼尼松反应不良。生存分析采用KaplanMeier方法;各组生存的比较采用logrank检验;各生物学特征的比较采用χ2检验或Fisher确切概率法(双尾)。结果110例患儿表现为泼尼松反应良好,16例患儿表现为泼尼松反应不良;5年无事件生存率(pEFS)分别为73%±5%与48%±13%,差异有统计学意义(P=0.0021)。结论泼尼松诱导试验简单,易操作,可方便地评估早期治疗反应。

荧光原位杂交法检测成熟B淋巴肿瘤细胞c-myc断裂

目的建立荧光原位杂交(FISH)方法检测8号染色体c-myc基因断裂,为临床筛选Burkitt’s淋巴瘤和成熟B型淋巴细胞白血病(B-ALL)提供方法。方法11例临床标本,FISH检测5例阴性,6例阳性。结果期待阴性的5例标本全部阴性,期待阳性的6例标本4例呈现阳性。结论用FISH法检测Burkitt’s淋巴瘤/B-ALL相关的myc基因断裂可行并基本可靠。

全反式维甲酸诱导分化M_3型白血病的细胞形态观察

本文应用国产全反式RA对10例APL患者的白血病细胞进行了体外诱导分化试验.结果发现,RA处理组培养7天后,89%细胞在形态上接近成熟粒细胞:NBT阳性细胞明显增高,细胞化学染色表明诱导分化细胞向过渡或成熟中性粒细胞分化.经RA治疗后,所有病例L-CFU形成明显低落,正常造血祖细胞集落大幅度上升.上述观察证实了全反式维甲酸能诱导APL患者的早幼粒细胞沿着粒系方向分化成熟而实现CR.

流式细胞术检测骨髓微量神经母细胞瘤细胞在临床中的应用

目的建立神经母细胞瘤（NB）患儿骨髓（BM）微量肿瘤病灶（MRD）的检测方法，分析其结果与预后的关系。方法应用CD45^FITC／CD81^PE／CD56^PECy5单抗组合通过流式细胞术（FCM）检测人NBTGW细胞株的免疫表型，并确定本实验室FCM的敏感度；比较Ⅲ～Ⅳ期NB患儿治疗前及治疗中BM细胞形态学观察与FCM检测BM中的CD45^-／CD81^＋／CD56^＋细胞阳性率，分析病程中MRD检测与预后的关系。结果①TGW细胞株表达CD56和CD81，不表达CD45，本实验室FCM敏感度为1×10^-4。②58例患儿共144份标本中BM细胞形态学观察分析提示BM转移者23份，FCM检测显示表达CD45^-／CD81^＋／CD56^＋细胞的标本数62份，BM细胞形态学观察和FCM法阳性检出率差异有统计学意义（P〈0．01）。③比较平均化疗4个疗程后BMMRD结果与预后关系：31例患儿初诊时BMMRD检测阳性，化疗4个疗程后11例患儿BMMRD转阴，随访至今无复发及进展，无瘤生存率（DFS）中位时间23个月；另20例患儿化疗4个疗程后BMMRD仍为阳性，其中11例患儿复发或进展，包括1例死亡，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。④化疗后移植患儿外周血干细胞（PBSC）采集前BMMRD结果与预后的相关性：共有19例患儿接受化疗后行PBSC移植，14例患儿采集PBSC时BMMRD为阴性，其中2例患儿复发，自移植后始DFS中位时间9个月；5例患儿采集PBSC时BMMRD为阳性，均复发，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论运用FCM检测NB患儿BMMRD敏感度高、特异性强。可协助NB患儿的诊断和评估临床疗效，BMMRD残留与NB预后相关。

新生儿凝血酶抑制因子的检测

本文对新生儿三种凝血酶抑制因子进行了定量检测,发现新生儿α_1AT、α_2M和AT-Ⅲ含量分别为2.834±0.586g/L、4.470±1.056g/L和0.195±0.053g/L(活性43.5±12.3％),男女两性间无差别。初生1～2天时,α_1AT含量较高,随出生天数增加而下降,至1周后趋于稳定。α_2M和AT-Ⅲ含量初生时含量很低,以后随出生天数增加而增高,1周后趋于平稳,但AT-Ⅲ活性至1周后才见上升。新生儿的凝血酶抑制因子水平与小儿不同,α_1AT和α_2M约为小儿的80％。AT-Ⅲ含量、活性仅占小儿50％。

诱导分化剂诱导NB4来源的树突状细胞分化的研究

目的研究全反式维A酸(ATRA)联合细胞因子体外诱导NB4细胞来源的树突状细胞(DC)的适宜方法。方法在NB4细胞中,分别加入ATRA、重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)+重组人白细胞介素-4(rhIL-4)、ATRA+rhGM-CSF+rhIL-4培养诱导10d。在培养第11天,取适量细胞进行免疫表型分析和形态学观察(所有实验均重复3次)。结果经ATRA+rhGM-CSF+rhIL-4培养10d,NB4-DC表面,HLA-ABC、CD1a、CD86表达明显增高,而CD33表达明显下降,与诱导前相比,差异有统计学意义(P<0.01),经光镜下观察细胞具有典型的树突状细胞形态学特征;NB4细胞经单独ATRA诱导后向正常髓系细胞分化和成熟。结论通过ATRA、rhGM-CSF及rhIL-4的培养体系可诱导NB4-DC。[临床儿科杂志,2007,25(6):488-491]

全反式维甲酸对白血病细胞的体外诱导分化研究

应用ＡＴＲＡ对４２例各种不同类型白血病细胞进行了体外诱导分化研究，结果发现经ＡＴＲＡ１～５μｍ浓度体外诱导分化后，２６例ＡＰＬ患者获得了与临床疗效相一致的结果。ＡＴＲＡ诱导分化细胞除形态趋于成熟外，还伴有功能上的成熟。经ＡＴＲＡ治疗后，所有ＡＰＬ病例的ＣＦＵ－Ｌ形成明显减低，正常造血祖细胞集落则恢复至正常水平。表明ＡＴＲＡ除有诱导ＡＰＬ细胞分化、成熟这一特性外，在参于造血重建中有重要作用。

新生儿白细胞碱性磷酸酶活性的正常水平及其临床意义

白细胞碱性磷酸酶(简称LAP)是粒细胞重要的标志酶之一,显示LAP活性在临床上有重要意义。由于显示该酶活性的方法不同,致使LAP活性在多种疾病中的变化规律很不一致,正常值差异也很大,因此在临床使用上受到一定限制。我们曾应用萘酚AS-MX法显示LAP活性,发现该法具有偶联效应好、酶活性显示充分,且阳性指数较其它方法高,基质液可长期保存等优点.目前该法已开始应用于临床。但应用该法显示新生儿LAP活性尚无报道。现将我们观察的结果,报道如下.

上海地区新生儿群体结合珠蛋白含量的研究

本文应用免疫化学法就正常新生儿的血浆结合珠蛋白(Hp)进行了定量测定,并分别与儿童、成人作了比较.结果发现,新生儿的Hp含量8.12±7.33(g/L),男女两性间无差别.与儿童、成人比较结果表明,三组中成人Hp含量最高,新生儿最低.正常儿童血浆Hp含量约为成人血浆HP的77％,而正常新生儿血浆Hp含量显著低于儿童及成人,分别占55％和42％.

钻井液降粘剂NTF-u的室内评价与现场应用

从各类多元有机膦酸盐及衍生物中筛选出钻井液降粘剂NTF u ,在室内对其降粘性能进行了全面评价 ,综述了现场应用效果 。

NTF—u钻井液用降粘剂的室内评价与现场应用

从各类多元有机膦酸盐及衍生物中筛选出NTF—u 降粘剂,在室内对其降粘性能进行了全面评价,综述了现场应用效果,并归纳出其应用特性。

儿童合并骨髓噬血现象53例临床分析

目的探讨骨髓中出现噬血现象患儿的临床特点、诊断、治疗及其与预后之间的关系。方法回顾性分析1998年-2008年间骨髓发现噬血现象的53例住院患儿的临床特征、实验室检查、原发病诊断、治疗方法及预后。结果共53例纳入统计,其中男35例,女18例;中位年龄3岁(2个月～16岁)。出院诊断噬血细胞综合征(HLH)20例,肿瘤9例,再生障碍性贫血1例,幼年性特发性关节炎2例,特发性血小板减少性紫癜2例,郎格罕斯组织细胞增生症2例,尼曼匹克病1例,黄色肉芽肿1例,传染性单核细胞增多症1例,原发败血症1例,病情恶化自动出院或死亡时未明确诊断13例。根据国际组织细胞协会HLH诊断指南-2004标准重新评估,符合HLH诊断标准22例。是否存在脾肿大、外周血≥二系细胞减少、高三酰甘油血症或低纤维蛋白血症及骨髓噬血现象对HLH诊断意义较大。激素治疗组患儿预后较好,是否符合HLH诊断标准与预后相关性不大。结论骨髓噬血现象并非某个疾病的特异性表现,噬血细胞综合征的诊断也缺乏特异性指标,在治疗的选择上不应仅仅依靠诊断标准,而应综合考虑每个患儿的具体情况。早期开始激素治疗对预后有一定帮助。完善分子学诊断刻不容缓。

儿童急性淋巴细胞白血病治疗早期白血病细胞及微量残留病监测的预后价值

目的评价诱导治疗第19天及血液学完全缓解(CR)时骨髓存在形态学可辨认的原始、幼稚淋巴细胞数及微量残留病监测在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗中的预后价值。方法以1998年1月1日至2003年5月31日进入ALLXH99方案的193例新诊治ALL患儿为研究对象。联合化疗第19天及诱导缓解治疗结束时行骨髓形态学检查以及血液学CR时用四色多参数流式细胞仪监测微量残留病。结果①诱导治疗第19天骨髓原始、幼稚淋巴细胞≥0.050与<0.050的患儿5年无事件生存(EFS)率分别为(42.59±14.28)%和(74.24±6.67)%,差异有统计学意义(P<0.01);②诱导缓解治疗结束达血液学CR时骨髓存在形态学可识别的原始、幼稚淋巴细胞与此时无形态学可辨认的原始、幼稚淋巴细胞患儿5年EFS率分别为(63.47±9.23)%和(76.41±6.09)%,差异有统计学意义(P<0.05);③诱导缓解治疗结束血液学CR时微量残留白血病细胞≥10-4与<10-4的患儿骨髓原始、幼稚淋巴细胞数比例的差异无统计学意义(P>0.05);诱导缓解治疗结束血液学CR时微量残留白血病细胞≥10-4与<10-4的患儿22个月EFS率分别为(23.81±20.26)%和(94.44±5.40)%,差异有统计学意义(P=0.001)。结论诱导治疗第19天骨髓原始、幼稚细胞数≥0.050在儿童ALL治疗中具有独立的预后价值;

儿童B-急性淋巴细胞白血病治疗中微量残留病动态监测及其意义

目的评价微量残留病(MRD)监测在儿童B-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)治疗中的预后价值。方法2001年9月1日至2004年10月31日采用ALL-XH-99方案行MRD标记筛选并监测的B-ALL患儿102例。用四色多参数流式细胞仪监测诱导治疗结束完全缓解(CR)时、髓外白血病预防性治疗前、早期强化前、维持治疗中定期强化前、维持治疗1年及2年时患儿。MRD 。结果①行筛选并监测的102例B-ALL患儿中,对诱导治疗结束获CR的86例患儿进行了MRD监测。其中MRD ≥10^(-4)的患儿20例,占23．30％;MRD<10^(-4)的患儿66例,占76．70％,其39个月无事件生存率分别为 0．00％和(83．00±9．90)％,差异有统计学意义(P<0．01)。②单因素分析显示患儿的性别、起病时年龄、白细胞计数及染色体倍体数与CR时MRD水平无关(P>0．05);而Ph染色体、诱导治疗第19天骨髓幼稚淋巴细胞比例、CR时间、ALL-XH-99危险度分类标准与其相关(P<0．05)。③多因素分析显示 CR时MRD水平具有独立的预后价值(比例风险为5．381,95％可信区间为0．004-0．624,P<0．05)。结论诱导治疗结束CR时MRD水平可用于评估早期治疗反应,是儿童B-ALL治疗中重要的预后因素之一。

急性白血病和恶性肿瘤患者的红细胞生成素活性

用小鼠胎肝细胞为靶细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，测定了６８例正常人和８７例急性白血病（ＡＬ），３３例恶性肿瘤患者的血清红细胞生成素（Ｅｐｏ）活性。正常值为５．７±３．６ｍＵ／ｍｌ，男女间无明显差别。８７例ＡＬ中，５９例初始和复发期Ｅｐｏ含量为３６０．２±１７７．７ｍＵ／ｍｌ，与正常比较差异显著（Ｐ＜０．００１）。２８例缓解期ＡＬ患者Ｅｐｏ含量１０．８±５．８ｍｕ／ｍｌ，较正常人偏高，但无统计学意义。ＡＬ各亚型间Ｅｐｏ含量无差别。ＡＬ患者Ｅｐｏ含量与外周血Ｈｂ含量呈负相关（Ｐ＜０．００５）。３３例各种恶性肿瘤患者Ｅｐｏ增加，易发生骨髓转移的肿瘤，如淋巴瘤、多发性骨髓瘤、神经母细胞瘤，Ｅｐｏ含量较其它肿瘤更高（Ｐ＜０．０１）。

儿童急性白血病患者的谷胱甘肽S-转移酶Pi基因多态性分析

目的 研究谷胱甘肽S 转移酶Pi(GST Pi)的基因型多态性在中国儿童急性白血病 (AL)中的频率分布特征 ,探讨GST Pi基因变异与儿童白血病的易感性及化疗效应之间可能的相关性。方法 采用DNA直接测序法对 12 0例AL患儿和 85名健康儿童进行GST Pi基因型的测定 ,分析各基因型在AL儿童与健康对照者之间的分布差异。结果 AL患儿GST Pi外显子 5的突变率为 4 7 5 % ,明显高于健康儿童的 31 8% (OR =1 94 4 ,95 %CI为 1 0 88～ 3 4 73) ,其多态性分布特征与国外报道相似。其中 ,ALL患儿外显子 5的基因突变率增高更明显 ,而AML患儿与健康儿童的差异未达到显著水平 ;B系ALL患儿的总突变率 (6 0 3% )明显高于T ALL儿童 (4 7 1% ) ,但后者的纯合子突变率(17 6 % )显著高于前者 (3 4 % ) (P值均 <0 0 5 ) ;野生型ALL患儿的平均生存时间为 2 4个月 ,长于突变型患儿的 17 6个月 ,但差异未达到统计学意义 (P =0 0 80 4 ) ;外显子 5基因型对AML患儿的存活时间亦无显著影响。在所有受检儿童中 ,未发现GST Pi外显子 6存在文献报道的Ala114 Val变异基因型 ,但发现了两个新的突变基因型 :1例健康儿童的外显子 6第 99位点出现A/G杂合 ,该杂合基因型未引起氨基酸的改变 ;2例白血病儿童在外显子 6第 10 3测序位点发生G→T/G碱?

儿童急性白血病完全缓解后骨髓幼稚细胞低比例增高的临床意义

目的 了解急性白血病患儿完全缓解 (CR)后骨髓幼稚细胞比例出现 0 0 5～ 0 2 5时对预后的影响 ,为临床治疗策略的调整提供依据。方法 对 1998～ 2 0 0 1年上海儿童医学中心收治急性白血病患儿CR后按骨髓幼稚细胞比例分为A组 (<0 0 5 )和B组 (0 0 5～ 0 2 5 ) ;B组又分为B1(0 0 5～ 0 10 )、B2 (～ 0 15 )、B3(～ 0 2 5 ) 3个亚组 ,分析各组与急性白血病复发的关系。结果 急性淋巴细胞白血病 (ALL)患儿CR后骨髓幼稚细胞≥ 0 10时 ,复发率与阴性对照组差异有显著性 ;急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)患儿CR后骨髓幼稚细胞≥ 0 15时 ,复发率与阴性对照组差异有显著性。结论 ALL患儿CR后骨髓中原始淋巴细胞 +幼淋巴细胞≥ 0 10及ANLL患儿CR后骨髓中原始粒细胞 +早幼粒细胞或原始单核细胞 +幼单核细胞≥ 0 15时应考虑及时调整治疗方案。

儿童急性淋巴细胞白血病早期治疗反应的预后价值:上海儿童医学中心单中心的临床报告(英文)

目的在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗中,早期治疗反应是最重要的预后因素之一。该文评价了诱导治疗第19天及血液学完全缓解时骨髓存在形态学可辨认的幼稚淋巴细胞数及微量残留病(MRD)监测在儿童ALL治疗中的预后价值。方法1998年1月至2003年5月接受ALL-XH-99方案治疗的193例新诊治的ALL患儿为研究对象。联合化疗第19天及诱导缓解治疗结束时行骨髓形态学检查以及血液学缓解时用四色MP-FCM检测MRD。生存分析采用Kaplan-Meier方法,各组无事生存率(EFS)之间的比较采用log-rank检验,各生物学特征的比较采用χ2检验或Fisher确切概率法(双尾),COX风险比例模型用于评估预后因素。结果①诱导治疗第19天骨髓幼稚淋巴细胞≥5%与<5%的患儿4年EFS差异有非常显著性意义(42.59%±14.28%vs74.24%±6.67%;P<0.01);②诱导缓解治疗结束达血液学缓解时存在形态学可识别的幼稚淋巴细胞(幼稚淋巴细胞>0%)与此时无形态学可辨认的幼稚淋巴细胞的患儿4年EFS差异有显著性意义(63.47%±9.23%vs76.41%±6.09%;P<0.05);③诱导缓解治疗结束血液学完全缓解时MRD≥0.01%与MRD<0.01%的患儿15月EFS差异有非常显著性意义(23.81%±20.26%vs94.44%±5.40%;P<0.01)。结论诱导治疗第19天骨髓幼稚细胞数≥5%、诱导治疗结束血液学缓解时骨髓幼稚细胞>0%及MRD监测在儿童急性淋巴细胞白血病治疗中具有预后价值,可用于发展中国家儿童ALL早期治疗反应的评估。