湖羊黄体期注射PGF2α对黄体组织形态、PGF2α受体和程序性坏死相关基因表达的影响

旨在研究不同黄体期注射前列腺激素(PGF2α)对湖羊育成母羊黄体组织形态、PGF2α受体及程序性坏死通路基因表达的影响。本研究选择健康、体况良好、体重相近经同期发情处理的母羊48只,随机均分为6组,分别为黄体前期试验组和对照组、中期试验组和对照组和末期试验组和对照组母羊,试验组在发情周期第6天(黄体前期)、11天(黄体中期)、16天(黄体末期)注射1 mL PGF2α(0.1 mg),对照组在相同时间注射1 mL生理盐水,每次注射后3 h采集黄体组织,用于基因表达检测及HE组织染色检测黄体组织形态变化。结果表明,注射PGF2α后试验羊黄体组织形态发生了变化,出现炎症细胞浸润与细胞凋亡,其中黄体中期退化程度最高。未注射PGF2α的母羊,黄体前期、中期FPA mRNA表达水平显著高于黄体末期(P<0.05);黄体前期FPB表达水平显著高于黄体末期(P<0.05),与黄体中期无显著差异(P>0.05);黄体中期TNFR1表达水平显著高于黄体前期和末期(P<0.05);黄体中期RIPK 3表达水平显著高于黄体末期(P<0.05),黄体中、末期与黄体前期差异均不显著(P>0.05);TNF-α、RIPK 1和MLKL表达水平在整个黄体期没有显著变化(P>0.05)。黄体前期注射PGF2α显著降低FPA表达水平(P<0.05),显著提高FPB、RIPK 1、MLKL表达量(P<0.05),对TNF-α、TNFR 1、RIPK 3基因表达无显著影响(P>0.05);黄体中期注射PGF2α可以显著上调FPB、TNF-α、RIPK 1与MLKL表达量(P<0.05),对FPA、TNFR 1和RIPK 3表达没有显著影响(P>0.05);黄体末期注射PGF2α可以显著上调RIPK 1表达(P<0.05),对FPA、FPB、TNF-α、RIPK 3和MLKL表达没有显著影响(P>0.05)。FPA与RIPK 3和TNFR 1 mRNA表达呈正相关(P<0.05),FPB与MLKL和TNF-αmRNA表达呈正相关(P<0.05)。结果表明,PGF2α与其受体FPA、FPB结合后可能通过TNF-α/TNFR1通路启动程序性坏死,促进黄体组织退化,FPB在介导PGF2α诱导黄体退化和程序性坏死中发挥主要作用,PGF2α在黄体中期诱导黄体退化效果较好。

黄体期注射PGF2α对母羊血清生殖激素及相关细胞因子的影响

旨在研究黄体期不同阶段注射前列腺激素(PGF2α)对育成母羊生殖激素和生殖相关细胞因子的影响。本研究选择健康、体况良好、体重相近、发情周期正常的湖羊育成母羊60只,用“孕酮栓(MAP)+PMSG”法进行发情周期同步化处理后,选择发情正常的48只母羊随机均分为6组。发情当天记为第0天,黄体前期试验组、中期试验组和末期试验组母羊分别在第6(黄体前期)、11(黄体中期)、16天(黄体末期)注射1 mL PGF2α(0.1 mg),黄体前期对照组、中期对照组和末期对照组母羊分别在第6、11、16天注射1 mL生理盐水,每次注射后0.5、1、2、3 h采血,用于血液指标检测。结果表明,所有试验组和对照组母羊于注射后的0.5~3 h间血清中FSH、LH、PRL、P_(4)、E_(2)水平以及TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-β无显著变化(P>0.05);母羊在黄体期不同阶段注射PGF2α对0.5、1、2、3 h血清中FSH、LH、PRL及IL-1β、IFN-β无显著影响(P>0.05),前期试验组注射后3 h P_(4)水平显著低于前期对照组,E_(2)和IL-6水平显著高于前期对照组(P<0.05),前期试验组注射后2和3 h TNF-α水平显著高于前期对照组(P<0.05);中期试验组注射后1 h P_(4)水平显著低于中期对照组(P<0.05)。黄体前期注射PGF2α后,前期试验组0.5~3 h内FSH、E_(2)、TNF-α、IL-6整体水平显著高于前期对照组(P<0.05),P_(4)整体水平显著低于前期对照组(P<0.05),对LH、PRL、IL-1β和IFN-β无显著影响(P>0.05);黄体中期注射PGF2α后,中期试验组0.5~3 h内E_(2)整体水平显著高于中期对照组(P<0.05),P_(4)整体水平显著低于中期对照组(P<0.05),对FSH、LH、PRL、TNF-α、IL-1β、IL-6和IFN-β无显著影响(P>0.05);黄体末期注射PGF2α对生殖激素与相关细胞因子没有显著性影响(P>0.05)。本研究结果表明,PGF2α对黄体的溶解作用存在阶段性差异,母羊在黄体前期对PGF2α的短期应答反应强于黄体中、末期,且黄体前期时,卵巢可以响应PGF2α为卵泡发育营造更佳的发育环境。

P4及FSH处理对育成母羊卵泡发育和生殖激素分泌的影响

旨在研究孕激素(P_(4))与促卵泡素(FSH)联合或单独使用对湖羊育成母羊卵泡发育及生殖激素分泌的影响。选择体况良好、发情周期正常的湖羊育成母羊80只,体质量(35.16±1.66)kg,利用P_(4)阴道栓+孕马血清促性腺激素+氯前列醇钠(P_(4)阴道栓+PMSG+PG)方法进行发情周期同步处理,选择撤栓后24~48 h发情的72只羊进入正式试验,撤栓后5 d记为试验第0天。将72只试验羊随机分为9组,每组8只,其中1,2,3组在第0天埋植P_(4)阴道栓,埋植持续时间分别为5,8,11 d;4,5,6组用FSH处理,分别在试验的第4,7,10天肌肉注射FSH 2次(早上8:00注射70 IU和下午6:00注射30 IU);7,8,9组P_(4)+FSH联合处理,在第0天埋植P_(4)阴道栓,埋植持续时间分别为5,8,11 d,并在第4,7,10天肌肉注射FSH 2次(时间、剂量同4,5,6组)。9组试验羊分别在第0,5,8,11天静脉采血,并手术观察记录卵泡数。结果显示,试验9组卵泡数显著高于1,2,3,4,5,7,8组(P<0.05),试验6组卵泡数显著高于1,4,5组(P<0.05)。P_(4)、FSH和P_(4)+FSH等3个处理组间卵泡数量无显著差异(P>0.05),但P_(4)+FSH处理组的卵泡数量比FSH组和P_(4)组有增加趋势,分别高38.02%和47.12%。处理时间极显著影响了卵泡数量(P<0.01),随着处理时间的延长卵泡数量明显升高,第11天极显著高于第5,8天(P<0.01);处理及时间交互对卵泡数量无影响(P>0.05)。各处理组间血清FSH浓度无差异(P>0.05),不同处理组对血清催乳素(PRL)和P_(4)浓度影响极显著(P<0.01),对促黄体素(LH)和雌激素(E_(2))浓度影响显著(P<0.05);处理时间对FSH、LH、PRL、P_(4)、E_(2)及褪黑素(MT)浓度无影响(P>0.05);处理×时间极显著影响了P_(4)浓度(P<0.01),对FSH、LH、PRL、E_(2)、MT无影响(P>0.05)。结果表明,母羊黄体末期使用FSH单独处理促卵泡发育效果较好,P_(4)埋栓和FSH联合处理促卵泡发育效果更佳。