实时荧光核酸恒温扩增技术检测食品中金黄色葡萄球菌的方法评价

目的以传统国标培养法作为参比方法,评价实时荧光核酸恒温扩增检测(real-time simultaneous amplification and testing, SAT)方法检测食品中金黄色葡萄球菌的能力。方法依据GB 4789.10—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》对SAT法检测食品中金黄色葡萄球菌的能力进行评价。分别检测纯培养物、人工污染样品以及实际样品来评价试剂盒的灵敏度、特异性、假阴性率、假阳性率和准确度,同时采取2种方法的显著性差异分析,确定最终结果。结果 SAT法灵敏度为100%,纯培养物检出限为10^(3) CFU/mL,人工污染检出限灵敏度为10^(3) CFU/mL,假阴性率为0、假阳性率为2.9%;金黄色葡萄球菌的特异性符合要求。结论 SAT检测方法灵敏度高、特异性好,假阳性率、假阴性率、准确度等检测结果全部达标,并且检测时间短,适用于食品中金黄色葡萄球菌的快速检测。

实时荧光单引物等温扩增技术检测牛乳中的金黄色葡萄球菌

研究建立了一种实时荧光单引物等温扩增(RF-SPIA)技术以检测牛乳中的金黄色葡萄球菌。针对金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)基因设计引物,对金黄色葡萄球菌进行特异性检测。结果表明,6株金黄色葡萄球菌的检测结果为阳性,而其他17株非金黄色葡萄球菌的检测结果均为阴性。RF-SPIA检测金黄色葡萄球菌纯培养物的灵敏度为2.0×101 CFU/m L,检测人工污染牛乳的检出限为6.0×101 CFU/m L。该方法特异性强、灵敏度高,能够实现对金黄色葡萄球菌的实时、快速检测,为金黄色葡萄球菌的检测提供了一条新途径。