研讨式教学法在机能学综合实验教学中的应用

研讨式教学法是以培养学生能力为主线,使学生在主动学习的过程中逐渐加深对理论的理解,达到知识的融会贯通,把医学生培养成为既有知识又有能力的教学方法。本研究主要论述了如何将研讨式教学法应用于机能学实验教学中,如何将教学以学科为中心转变为以学生为中心,从而适应新形势下医药卫生人才培养需要。

生物素-链霉亲和素技术一步法检测人心肌肌钙蛋白T

目的:用已获得的两株抗人心肌肌钙蛋白T(cTnT)单克隆抗体N15C和N16D建立检测cTnT的生物素-链霉亲和素技术一步法。方法:应用酯化生物素对N15C进行标记,应用辣根过氧化物酶对N16D进行标记。将待检血清或抗原标准品、生物素标记的N15C和酶标记N16D加入经链霉亲和素包被的96孔酶标板微孔中,然后加入OPD,硫酸终止反应后,在λ=490 nm处读取A值,根据标准曲线求出各样本值。结果:建立的方法检测cTnT,检测灵敏度为1.0μg/L,可定量检测范围为2.0～32.0 μg/L。11例AMI患者和10例正常人用该法进行血清检测,与Enzymun-Test TnT试剂盒相比,阳性符合率为82％,特异性为100％。经重复检测表明本方法检测低浓度cTnT批内变异系数为4.70％,批间变异系数为9.36％;检测高浓度cTnT批内变异系数为3.20％,批间变异系数为8.25％。结论:该方法特异性高,重复性好,较常规双抗体夹心ELISA法有更高的灵敏度。

左心缺血再灌注损伤兔肺组织超微结构变化及IL-1β的表达

目的:探讨左心缺血再灌注损伤家兔肺组织超微结构变化及IL-1β的表达。方法:将60只成年健康家兔随机平分为实验组和对照组。实验组家兔结扎及再通左冠状动脉前降支复制左心缺血再灌注模型,对照组不结扎血管。2组均在缺血30min、再灌注20min、再灌注40min3个时间点取10只动物,描记膈神经放电曲线;取外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测外周血和BALF中的IL-1β水平;取肺组织标本,电镜下观察肺组织超微结构。结果:与对照组比较,实验组各时间点膈神经放电幅度减小(P<0.001),放电持续时间缩短(P<0.001);电镜下实验组可见Ⅰ型和Ⅱ型肺泡上皮细胞变性,呈急性炎症损伤改变,对照组无类似改变;实验组外周血和BALF中IL-1β表达水平均高于对照组(P<0.05)。结论:IL-1β参与了左心缺血再灌注所致的肺损伤。

LRP的表达与非小细胞肺癌耐药性的关系

目的探讨非小细胞肺癌的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因LRP和蛋白的表达,对比分析非小细胞肺癌的多药耐药性与LRP的关系。方法应用肿瘤细胞体外培养和MTT法对91例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物敏感性测试,观察非小细胞肺癌分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂+氟尿嘧啶三种单药和联合用药方案耐药情况和总的耐药情况,并用免疫组织化学方法对其进行LRP表达的检测,并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果91例NSCLC化疗敏感性检测结果显示:53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂+氟尿嘧啶耐药。其中,19例(20.9%)对三种用药均敏感,27例(29.8%)对三种用药均耐药,其耐药性与组织学类型和分化程度无关(P>0.05)。LRP在91例非小细胞肺癌中总的阳性表达率为53.8%鳞癌和腺癌相比LRP的表达无显著性差异(P>0.05)。且LRP的表达与三种化疗用药的耐药性均呈显著正相关(P<0.05),并且不同表达程度间也有显著差异性(P<0.05)。结论LRP在非小细胞肺癌中均有较高的阳性表达并参与介导了非小细胞肺癌固有多药耐药机制。

MRP的表达与非小细胞肺癌耐药性的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因和蛋白(MRP)的表达,对比分析非小细胞肺癌的多药耐药性与三种耐药相关基因表达的关系。方法应用肿瘤细胞体外培养和药敏实验法对91例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物敏感性测试,观察非小细胞肺癌分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂+氟尿嘧啶三种单药和联合用药方案耐药情况和总的耐药情况,并用免疫组织化学方法对其进行MRP基因表达的检测,并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果91例NSCLC化疗敏感性检测结果显示:53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂+氟尿嘧啶耐药。其中,19例(20.9%)对三种用药均敏感,27例(29.8%)对三种用药均耐药,尚不能认为其耐药性与组织学类型和分化程度有关(P>0.05)。MRP在91例非小细胞肺癌中总的阳性表达率为73.6%。鳞癌和腺癌相比MRP的表达差异无统计学意义(P>0.05),而且MRP的表达与对三种化疗用药的耐药性均呈正相关(P<0.05),并且不同表达程度间差异也有统计学意义(P<0.05)。结论MRP在非小细胞肺癌中均有较高的阳性表达并共同介导参与了非小细胞肺癌固有的多药耐药机制。

尼可刹米对丙泊酚抑制新生大鼠延髓脑片呼吸放电的拮抗作用

目的:观察尼可刹米对丙泊酚抑制新生大鼠延髓脑片呼吸放电的拮抗作用。方法:制作新生大鼠离体延髓脑片标本(完整保留舌下神经根)。取6个稳定记录到呼吸相关节律性放电活动(RRDA)的延髓脑片标本,先用改良的Kreb’s液(MKS)灌流脑片15min(T0),后用含40μmol/L丙泊酚的MKS灌流脑片20min(T1),然后洗脱,待RRDA基本恢复后用含40μmol/L丙泊酚加5mg/L尼可刹米的MKS灌流脑片20min(T2),记录舌下神经根RRDA,分析RRDA吸气时程(TI)、放电幅度积分(IA)和呼吸周期(RC)的变化。结果:3个给药阶段TI、IA和RC相比,差异均有统计学意义(F=22.837、16.926和31.053,P均<0.05)。与T0阶段比较,T1阶段TI缩短,IA降低,RC延长(P<0.05);与T1阶段比较,T2阶段TI、IA升高(P<0.05)。结论:丙泊酚对新生大鼠延髓脑片呼吸放电有抑制作用,尼可刹米能部分拮抗该作用。

mdrl的表达在非小细胞肺癌多耐药机制中的意义

目的探讨非小细胞肺癌的化疗耐药性和mdrl基因表达的关系,明确mdrl在非小细胞肺癌耐药中的作用。方法应用肿瘤细胞体外培养和MTT法对91例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物(环磷酰胺、阿霉素、顺铂+氟尿嘧啶)敏感性测试,并用免疫组化方法进行mdrl表达的检测,并进行相关分析。结果化疗敏感性:53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂+氟尿嘧啶耐药。mdrl在91例中总的阳性表达率为58.2%。鳞癌和腺癌相比mdrl的表达差异无统计学意义(P>0.05),而且mdrl与耐药性均呈显著正相关(P<0.05),并且不同表达程度间差异也有统计学意义(P<0.05)。结论mdrl参与介导了非小细胞肺癌固有化疗耐药的机制。

浅析油田企业HSE培训存在问题与对策

强化员工HSE培训，提高员工的HSE意识和技能，减少和避免各类安全事故的发生是油田企业HSE管理的重要部分。通过分析目前油田企业在HSE培训方面存在的员工思想认识不到位、工学矛盾突出、培训效果不理想、培训方式单一以及缺乏对培训效果的评估等五个方面的问题，提出了培训的对策措施，包括：转变员工思想观念、建立有效的激励机制、增强HSE培训的吸引力、培养优秀的兼职教师以及强化培训效果评估。

黏附因子-1、IL-18在大鼠左心缺血再灌注诱导的急性肺损伤中的作用

目的:探讨白介素-18、黏附因子-1在左心缺血再灌注肺损伤中的作用及对呼吸功能的影响.方法:60只SD大鼠随机均分为实验组和对照组,实验组复制左心缺血再灌注肺损伤模型并与BL-420生物信号采集分析系统相联,对照组不做左冠状动脉的前降支结扎其余操作同实验组.比较缺血30min、再灌注30min、再灌注60min3个时间点两组大鼠肺组织白介素-18、黏附因子-1表达情况、外周血和支气管肺泡灌洗液中白介素-18水平、动脉血氧分压及呼吸曲线进行比较.结果:各时间点实验组大鼠肺组织白介素-18、黏附因子-1表达高于对照组;外周血和支气管肺泡灌洗液中白介素-18水平高于对照组;PaO2低于对照组;呼吸曲线的幅度、强度、持续时间均低于对照组,上述差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:白介素-18激活黏附因子-1释放增多,吸引白细胞在肺循环发生黏附聚集释放反应,引起炎性细胞因子的进一步释放,导致肺炎症反应失衡,引起急性炎症损伤,致呼吸功能下降.

LRP及GST-π的表达与非小细胞肺癌的耐药性关系

目的探讨NSCLC的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因和蛋白LRP及GST-π的表达,对比分析NSCLC的多药耐药性与上述二种耐药相关基因表达的关系。方法应用肿瘤细胞体外培养和MTT法对91例未经化疗的NSCLC进行体外化疗药物敏感性测试,观察NSCLC分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂+5-Fu三种单药和联合用药方案耐药情况和总的耐药情况,并用免疫组织化学方法对其进行3种耐药相关基因(LRP、MRP及GST-π)表达的检测,并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果91例NSCLC化疗敏感性检测结果显示:53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂+5-Fu耐药。其中,19例(20.9%)对三种用药均敏感,27例(29.8%)对三种用药均耐药,其耐药性与组织学类型和分化程度无关(P>0.05)。LRP和GST-π在91例NSCLC中总的阳性表达率分别为:53.8%和64.8%。鳞癌和腺癌相比LRP和GST-π的表达无显著性差异(P>0.05)。且LRP和GST-π的表达与对三种化疗用药的耐药性均呈显著正相关(P<0.05),并且不同表达程度间也有显著差异性(P<0.05)。结论LRP和GST-π在NSCLC中均有较高的阳性表达并共同介导参与了NSCLC固有多药耐药机制。

油酸性急性呼吸衰竭家兔支气管肺泡灌洗液中IL-8的表达

目的探讨家兔油酸性急性呼吸衰竭的发病机制与IL-8的关系。方法健康新西兰家兔40只,随机分为复制油酸性呼吸衰竭模型组(实验组)和正常对照组,每组20只,然后分别测定对照组和实验组家兔外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平,并进行比较。结果实验组BALF中和外周血中IL-8和TNF-α表达水平明显高于对照组(P<0.01,P<0.05)。结论IL-8可使中性粒细胞广泛激活,放大炎症反应,导致呼吸功能障碍,引发急性呼吸衰竭。

左心缺血再灌注大鼠急性肺损伤组织中ICAM-1与TNF-α的表达

目的:探讨黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在左心缺血再灌注诱导的大鼠急性肺损伤中的作用及对呼吸功能的影响。方法:60只SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组30只;实验组通过结扎左冠状动脉的前降支及放松结扎线再通复制左心缺血再灌注肺损伤模型,对照组只穿线,不结扎血管。于缺血30min、再灌注30min及再灌注60min(每个时间点10只),经BL-420生物信号采集处理系统记录2组大鼠呼吸曲线,采用酶联免疫法检测大鼠外周血和支气管肺泡灌洗液中TNF-α水平,采用免疫组化SP法检测大鼠肺组织TNF-α、ICAM-1的表达。结果:各时间点实验组大鼠呼吸曲线的幅度、强度及持续时间均低于对照组(F组间=422.869,P<0.001),外周血和支气管肺泡灌洗液中TNF-α水平高于对照组(F组间=51.240和202.084,P<0.001),肺组织TNF-α、ICAM-1的表达高于对照组(P<0.001)。3个时间点实验组大鼠肺组织ICAM-1和TNF-α的表达均呈正相关(rS=0.362,0.741和0.803,P均<0.05)。结论:左心缺血再灌注后TNF-α可能通过诱导内皮细胞高表达ICAM-1,引起炎症反应失衡,致肺急性炎症损伤。

左心室缺血再灌注肺损伤模型的建立

目的:探讨建立左心室缺血再灌注肺损伤模型的方法。方法:40只家兔随机分为模型组和对照组,模型组建立左心室缺血再灌注肺损伤模型,对照组不做模型。对比2组动物心电图、膈肌放电曲线、心肌和肺组织HE染色组织病理情况、肺组织透射电镜超微结构变化情况。结果:模型组心肌出现缺血再灌注损伤表现,肺组织出现急性损伤表现,二者之间的变化呈相关性。结论:此种左心室缺血再灌注肺损伤模型是一种可行可靠的动物模型。

尼可刹米对新生大鼠大脑皮层神经元钠通道的兴奋作用

目的观察尼可刹米对新生大鼠皮层神经元电压依赖性钠通道的作用。方法应用全细胞膜片钳技术观察尼可刹米对新生大鼠脑片皮层神经元电压依赖性钠电流的作用。结果尼可刹米增加皮层神经元河豚毒素(TTX)敏感性电压依赖钠电流;尼可刹米使钠通道稳态激活曲线向超极化方向移动,钠通道半数激活电压(V1/2)从给予尼可刹米前的(-34.67±3.07)mV变为给予尼可刹米后的(-37.63±3.37)mV(n=10,P<0.05);尼可刹米使钠通道的稳态失活曲线向去极化方向移动,钠通道半数失活电压(V1/2)从给予尼可刹米前的(-43.36±3.06)mV变为给予尼可刹米后的(-33.24±2.05)mV(n=10,P<0.01)。结论尼可刹米通过改变皮层神经元钠通道的动力学特征来增加电压依赖性钠电流,这可能是尼可刹米兴奋中枢神经元的作用机制之一。

人心肌肌钙蛋白T单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

目的 :建立抗人心肌肌钙蛋白T(cTnT)单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞株。方法 :从人心肌组织中提取纯化人cTnT ,免疫BALB/C小鼠 ,采用杂交瘤技术 ,间接ELISA法选择能稳定分泌抗cTnTMcAb的杂交瘤细胞株。结果 :建立了 2株稳定分泌抗cTnTMcAb的杂交瘤细胞株N15C和N16D ,其染色体数目为 90～ 10 6 ,McAbIg亚类均为IgG1,间接ELISA法测定McAb腹水效价分别为 1 80 0 0和 1 32 0 0 0。免疫印迹结果显示 2株McAb均可识别cTnT中Mr 为 370 0 0的单一区带 ,不识别人骨骼肌提取物。间接ELISA法测定N15C和N16DMcAb与cTnT反应的最低浓度分别为 4 7μg/L和 2 3μg/L。相加试验表明 2株McAb能识别不同的抗原表位。 结论 :获得

用人文关怀如何做好病人的护理

护理工作中的"人文关怀",其核心是"以病人为中心",把对病人的关怀作为一切护理工作的出发点和归宿,人文关怀是护理工作、护理文化的核心内容,推行护理人文关怀对临床护理质量的提高和整体护理的发展有着重要的作用。

非小细胞肺癌组织Bcl-2蛋白的表达和多药耐药检测

目的:观察非小细胞肺癌组织(NSCLC)中Bcl-2蛋白的表达及其化疗耐药性。方法:应用MTT法,观测91例未经化疗的NSCLC组织对环磷酰胺、阿霉素、顺铂+氟尿嘧啶3种用药方案的药物敏感性。用免疫组织化学方法检测NSCLC组织中Bcl-2蛋白的表达,并将其表达情况与化疗耐药性进行相关分析。结果:91例中53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂+氟尿嘧啶耐药。其中,19例(20.9%)对3种用药均敏感,27例(29.8%)对3种用药均耐药。91例中Bcl-2蛋白总的阳性表达率为52.7%,其表达与组织学类型和分化程度无关(P>0.05),但与3种化疗用药方案耐药性均有关(P<0.05)。结论:NSCLC存在固有的化疗耐药性,Bcl-2蛋白参与介导了NSCLC化疗耐药的机制。

不同毒力株弓形虫速殖子消减cDNA文库的构建

目的构建不同毒力株弓形虫速殖子cDNA消减文库。方法以弓形虫强毒株RH株速殖子为Tester、弱毒株Prugniaud株速殖子为Driver,进行正向抑制性消减杂交;以Prugniaud株为Tester、RH株为Driver,进行反向抑制性消减杂交。分别将获取的2组抑制性消减杂交产物与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆并以PCR扩增鉴定插入片段。结果获得正向和反向cDNA消减文库,每个消减文库分别随机挑取384个阳性克隆,PCR扩增显示插入率为98%,片段长度在200-2000bp之间。结论通过抑制性消减杂交技术成功构建2个消减文库,为进一步筛选和鉴定弓形虫毒力相关基因奠定了基础。

尼可刹米对新生大鼠海马神经元钠通道的影响

目的:观察尼可刹米对新生大鼠海马神经元电压依赖性钠通道的影响。方法:制备大鼠海马脑组织切片,灌流含5mg/L尼可刹米的人工脑脊液,应用全细胞膜片钳技术记录给药前、给药后10min脑组织切片海马神经元电压依赖性钠电流,绘制给药前后钠通道的钠电流-测试电压(I-V)曲线、稳态激活曲线和稳态失活曲线。结果:尼可刹米在脑电位-50～+20mV范围内增大钠电流。尼可刹米使钠通道稳态激活曲线中钠通道半数激活电压由(-34.6±3.07)mV变为(-37.63±3.37)mV(t=3.38,P=0.02),曲线向超极化方向变化;尼可刹米使钠通道的稳态失活曲线中钠通道半数失活电压由(-43.36±3.06)mV变为(-33.24±2.05)mV(t=6.13,P=0.002),曲线向去极化方向变化。结论:增加电压依赖性钠电流可能是尼可刹米兴奋中枢神经元的作用机制之一。

多媒体技术在本科病理生理教学中的应用

多媒体教学，图文并茂、生动鲜明、重点突出、灵活多样，容纳更多的信息量，提高教学时效。应用多媒体教学辅助手段，可以从多个方面．不同角度来启发学生思维。提高学习能力。