不同时间异氟醚麻醉对幼龄大鼠海马神经元凋亡及自噬的影响

相关研究发现异氟醚可引起幼龄大鼠广泛的脑神经元凋亡,且近期发现异氟醚还可以介导海马神经元发生自噬。在前期试验的基础上,选取40只7日龄(P7)SD大鼠幼鼠,随机分为对照组和1.5%异氟醚麻醉2、3、4、6h组,建立实验模型。待麻醉结束后将大鼠安乐死,取脑并分离海马组织。用TUNEL染色、LC3-II免疫组化及Western blot检测等方法检测海马神经元自噬及凋亡情况。试验结果显示,随着异氟醚作用时间的增加,TUNEL染色结果显示,麻醉4h后海马阳性细胞率明显增多,而LC3-II免疫组化结果显示在3、4h时阳性率较高,6h有所下降;与对照组相比,活化的Caspase-3表达量逐渐增加;Bcl-2表达量逐渐降低。Beclin-1和LC3-II/I表达量先升高后下降,并且在异氟醚作用3h时表达量明显升高(P<0.05);此外,与异氟醚麻醉3、4h时相比,Beclin-1在麻醉6h时表达量明显下降,而Caspase-3表达量明显升高(P<0.05)。试验结果表明,异氟醚不仅可以引起幼龄SD大鼠海马神经元广泛凋亡,而且还能诱导海马神经元自噬,凋亡水平随麻醉时间延长逐渐加强,而自噬水平先升高后降低。自噬在异氟醚诱导的海马区神经元凋亡中可能发挥着保护性作用。

褪黑素对LPS致大鼠海马炎性损伤的保护作用

本研究旨在探究褪黑素(MT)对脂多糖(LPS)致大鼠海马炎性损伤的保护作用。选取40只4周龄健康雄性SD大鼠,随机分为4组:空白组(CON组)、模型组(LPS组)、褪黑素干预组(LPS+MT组)及褪黑素组(MT组)。通过腹腔注射的方式给予大鼠10 mg·kg~(-1)MT和/或10 mg·kg~(-1)LPS,4 h后,采用旷场试验对各组大鼠进行行为学测试;试验结束称大鼠体重,解剖取海马称重并计算海马体系数;苏木精-伊红(HE)染色观察脑切片中海马区域病理变化;RT-PCR技术检测海马中小胶质细胞激活标记物Iba-1和CD11b mRNA表达;Western blot法检测海马中炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10及TGF-β蛋白表达。结果表明,与CON组相比,LPS组大鼠自主探索行为减少、运动能力下降,海马组织神经细胞排列松散、细胞间隙增大、胞质固缩深染、胶质细胞浸润,小胶质细胞激活标志物Iba-1和CD11b mRNA表达极显著升高(P<0.01),促炎因子IL-1β、TNF-α及IL-6蛋白表达极显著升高(P<0.01),抗炎因子IL-10和TGF-β蛋白表达极显著降低(P<0.01)。而与LPS组相比,LPS+MT组大鼠自主探索行为增加、运动能力增强,海马组织神经细胞排列紧密,未见明显病变,小胶质细胞激活标记物Iba-1和CD11b mRNA表达极显著降低(P<0.01),促炎因子IL-1β、TNF-α及IL-6蛋白表达极显著降低(P<0.01),抗炎因子IL-10和TGF-β蛋白表达极显著增加(P<0.01)。此外,MT组与CON组相比,所有指标差异均不显著(P>0.05)。结果提示,MT可抑制小胶质细胞激活,减轻海马炎症反应,从而改善LPS造成的大鼠海马炎性损伤。

乳化异氟醚及异氟醚对犬血清中C反应蛋白及总补体含量的影响

为了研究乳化异氟醚及异氟醚对犬血清中C反应蛋白（CRP）及总补体（CH50）含量的影响,将40只犬随机均分为乳化异氟醚复合制剂麻醉组（RYM组）、异氟醚麻醉组（YM组）、乳化异氟醚复合制剂麻醉＋手术（RYMS）及异氟醚麻醉＋手术（YMS）四组。RYM、YM两组只进行麻醉不进行手术,RYMS、YMS两组在实施麻醉的同时分别进行肠管吻合术,在麻醉前（T0）、手术完成即刻（T1,而RYM和YM组在麻醉后35~40 min进行采样）、术后24 h（T2）、术后48 h（T3）、术后72 h（T4）等时间点,采血,测定血清中CRP及CH50含量。结果表明,乳化异氟醚复合麻醉及麻醉下手术对犬血清中CRP、CH50含量的影响,与异氟醚相似,两者无明显的差异。

两种犬肠管吻合术的试验比较

研制1种含有多种药物的可降解内置支撑物,将其用于小动物肠管吻合术中的支撑及术后消炎、止血和镇痛,并与传统吻合方法作比较。以健康本地犬为试验动物,分为内置支撑物组(12只)和传统手术组(8只),观测两组手术时间、操作难易程度及术后恢复情况。试验结果表明,相较于传统吻合方法,将内置支撑物用于犬肠管吻合术,可明显缩短手术时间,降低手术操作的难度,手术2 d后内置支撑物组犬体温情况、精神和活动情况、饮食欲等均优于传统手术组,术后无明显并发症,愈合良好。

利用内置支持物进行犬肠管吻合术的效果研究

为了提高肠管吻合术的效果,将淀粉膨化物制成中空、一端封闭、一端开放的形状,将消炎药和镇痛药填塞其中,外面包被上骨蜡,研制出新型可降解的内置支持物用于宠物消化系统疾病中的肠管吻合术,选取10只健康本地小型犬进行试验,以验证和评价这种新型内置支持物在肠管吻合术中的应用效果。结果表明：将这种新型可降解内置支持物置于吻合部位之后进行吻合操作,效果良好,手术全过程用时为（20.25±6.26）min,10例手术全部成功。说明该方法可快速、便捷、顺利地完成肠管吻合术操作。

2种肠管吻合手术的术后愈合及黏连情况比较

课题组前期研制出一种新型携带多种药物成分的内支撑物,并将其应用于试验犬的肠管吻合术中,此研究表明采用内支撑物应用于犬肠管吻合术,与传统吻合术比较,可降低手术操作的难度,缩短吻合时间,且术后无明显并发症,愈合良好。为了进一步探讨这种新吻合技术的可行性及相关机制,课题组从腹腔黏连评分、吻合口爆破压和羟脯氨酸含量等方面对2组犬的术后愈合情况进行比较研究。以健康本地犬为试验动物,分为内置支撑物组(NZ组,12只)和传统手术组(CS组,12只),分别在术后3,7,14,28d,剖腹探查,观察吻合部位愈合情况,进行腹腔黏连评分,并对吻合口爆破压、吻合口组织中羟脯氨酸含量等项目进行检测。腹腔黏连结果表明术后7,14,28d,CS组的腹腔黏连评分显著高于NZ组,结果具有统计学意义(P<0.05),术后3d,CS组的腹腔黏连评分与NZ组相比无显著性差异(P>0.05);术后7,14d,CS组的吻合口爆破压显著低于NZ组(P<0.05),而在术后3,28d,2组吻合口爆破压相比无显著性差异(P>0.05);2组的羟脯氨酸含量均随时间的增长而增加,而在各个时间点上2组相比无显著性差异(P>0.05)。最终试验结果表明,相对传统小动物肠管吻合术而言,使用内支撑物进行该手术能减少术后黏连,吻合部位的愈合情况更为良好。