黄连解毒汤对高脂血症小鼠血脂及炎症因子的影响

【目的】探讨黄连解毒汤对高脂血症小鼠血脂及血清炎症因子水平的调控作用。【方法】选用48只雄性C57BL/6小鼠,随机平均分为6组,即常规饲料组、高脂饲料组、常规饲料加抗生素组、高脂饲料加抗生素组、中药低剂量组(剂量为3.9g·kg-1·d-1)、中药高剂量组(剂量为7.8 g·kg-1·d-1)。常规饲料组和高脂饲料组分别进食常规饲料和高脂饲料8周;中药高、低剂量组进食高脂饲料6周后分别给予高、低剂量中药,连续灌胃2周;抗生素组分别进食常规饲料和高脂饲料6周后给予抗生素自由饮用2周。8周末处死各组小鼠,测定各组小鼠体质量、血脂(TC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、内毒素水平。【结果】黄连解毒汤低剂量组能显著降低TNF-α、IL-6、内毒素的水平(均P<0.01);但对血清总胆固醇无明显改善作用。【结论】黄连解毒汤改善高脂血症炎症状态的作用与其能降低血中炎症因子水平有关。

黄连解毒汤对高脂血症形成过程中小鼠肠道微生态的影响

目的分析黄连解毒汤对高脂血症小鼠肠道微生态的影响。方法 60只雄性C57BL/6小鼠,随机平均分为6组,即常规饲料组、高脂饲料组、常规饲料加抗生素组、高脂饲料加抗生素组、低剂量黄连解毒汤组(195mg/mL)、高剂量黄连解毒汤组(390mg/mL)。每组小鼠相应灌胃28d后,对各小鼠肠道粪便的细菌群落进行PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析。结果高脂饲料组的多样性指数、物种丰度都高于其他各组;中药高、低剂量组次之;高脂饲料加抗生素组两指标均为最低。两个抗生素组和中药高剂量组都建立了新的较固定的细菌群落结构。结论高脂饮食能促进某些细菌的生长,这些细菌可能与高脂血症发生相关,黄连解毒汤可能能抑制这些细菌的生长,调节肠道形成新的、稳定的细菌群落结构。

中医学专业实验教学新模式的探索与实践

西医学科是中医学专业的重要组成部分,实验课又是西医学科教学的重要环节。自主设计实验和团队学习模式都是注重创造性、灵活性和实践性的教学形式,两者结合的实验教学新模式应该对锻炼和加强学生科研思维和实践动手能力大有裨益。将这种新教学模式应用于中医学专业实践教学中,验证了新教学模式对学生多方面能力培养的有效性和可行性,并思考如何进一步完善新教学模式,使之更好适应现代化教育对中医学发展的要求。

基于团队模式的创新性实验在病理生理学实验课改革中的思考

教研室在2011级临床医学本科实验课中展开了以小组为基础的创新性实验。学生问卷调查显示:创新性实验可以激发学生的创新思维,提高学生自主学习能力、文献查询能力,小组模式的创新性实验也提高了学生团队合作能力。

湿热证慢性乙型肝炎T7噬菌体cDNA文库的建立

【目的】利用T7噬菌体展示技术建立湿热证乙型肝炎患者肝组织的cDNA噬菌体文库,为淘选治疗湿热证慢性乙型肝炎中草药的作用靶标等工作奠定基础。【方法】选择2例中医诊断为肝胆湿热证的慢性乙型肝炎性肝癌患者,肝移植术后分别取其手术摘除肝脏的癌旁组织,采用RNAiso Plus试剂提取总RNA,用含有dC10T30寡核苷酸的聚腺苷酸序列亲和试剂Oligotex Suspension纯化mRNA,逆转录合成双链cDNA后,加上Hind芋和EcoR I接头,并与酶切后的T7Select 10-3b载体连接,体外包装并扩增得到湿热证慢性乙型肝炎T7噬菌体cDNA文库。【结果】构建了湿热证慢性乙型肝炎T7噬菌体cDNA文库,文库初始滴度为3×105噬菌斑形成单位(pfu)/mL,扩增后文库滴度为1.8×109pfu/mL。随机挑取44个克隆经PCR后,琼脂糖凝胶电泳显示均为阳性克隆,测序结果显示其中1个阳性克隆的插入子为核糖体前体基因,其他均为mRNA。【结论】成功构建了人湿热证慢性乙型肝炎T7噬菌体cDNA文库,为下一步在中医理论指导下淘选和鉴定湿热证乙型肝炎相关中医药物有效成分的直接结合蛋白靶标奠定基础。

肢体缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的:探讨肢体缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法:用线栓法制备SD大鼠局部脑缺血模型,随机分为假手术组、缺血再灌注组和肢体缺血后处理组(n=12)。缺血再灌注后24 h分别进行神经功能评分、TTC染色、血浆SOD、MDA水平检测。结果:与缺血再灌注组比较,肢体缺血后处理组神经功能评分降低、第二脑片梗死体积缩小、血浆MDA水平降低(P均<0.05)。结论:肢体缺血后处理可改善大鼠脑缺血再灌注后神经功能,减小梗死体积,减低氧化应激水平。

多房棘球蚴组织蛋白体外刺激肝星状细胞变化的实验观察

目的观察多房棘球蚴组织蛋白体外刺激肝星状细胞(HSC)‑LX2后的细胞形态、胞内脂滴和细胞分泌α平滑肌肌动蛋白(α‑SMA)的变化。方法无菌取多房棘球蚴保种小鼠体内的多房棘球蚴组织,超声裂解法提取多房棘球蚴组织蛋白,以0.125 mg/ml终浓度加至体外培养的HSC‑LX2中刺激24、48、72、96和120 h后,取细胞进行油红O染色,光学显微镜和荧光显微镜下观察细胞形态和胞内脂滴分布。提取刺激48、72、96和120 h后的HSC‑LX2总蛋白,Western blotting检测细胞内α‑SMA的相对表达量变化。结果光学显微镜下可见,多房棘球蚴组织蛋白刺激24~96 h后,HSC‑LX2细胞形态由多边形逐渐变为长梭形,胞内脂滴数量增加且脂滴分布在细胞核周围,脂滴颗粒逐渐变大,颜色由浅黄色变为红色;刺激120 h后,绝大部分细胞都变成长梭形,多数细胞内脂滴数量有所减少且体积变小,脂滴由红色变为黄色。荧光显微下可见,刺激不同时间的HSC‑LX2胞内有红色荧光的脂滴颗粒围绕在细胞核周围,荧光信号不随着照射次数的增加而降低。Western blotting分析结果显示,HSC‑LX2胞内α‑SMA相对表达量随刺激时间延长逐渐升高,刺激至96 h时最高,为4.846±0.741,至120 h时下降至2.420±0.349,但均高于对照组的(t=8.988、7.045,均P<0.01)。结论多房棘球蚴组织蛋白体外可促进HSC‑LX2活化,细胞形态发生改变,胞内脂滴数量和体积均先升高后下降,胞内α‑SMA蛋白表达呈现先升高后降低的趋势。

结香与未结香白木香内生细菌群落结构及变化

研究采用不依赖培养方法 T-RFLP,比较结香和非结香的白木香内生细菌的群落结构及变化,研究发现结香后内生细菌的T-RFs、香农多样性指数有增加的趋势,各样品间差异的T-RFs片段数占总T-RFs片段数60%以上,说明结香前后白木香内生细菌的种类发生显著变化。在非结香样品中,内生细菌的优势菌群是Anoxybacillus,Clostridium,Candidatus endobugula,Lysinibacillus,结香样品中内生细菌的优势菌群为Clostridium,Lysinibacillus,Luteimonas,phytoplasma。另外,在结香和非结香样品中都出现一些特异的T-RFs片段,这些明显的变化使得样品聚类分析时,结香样品内生细菌群落结构相似性比较高聚在一起,非结香样品聚在一起,说明结香前后白木香内生细菌发生显著的、有规律的变化。研究旨在利用不依赖培养的方法首次探讨白木香内生细菌的群落结构及结香中的变化,为合理利用白木香内生细菌资源提供科学依据。