一株猪圆环病毒2d基因型毒株的全基因组序列及其衣壳蛋白的小鼠免疫原性分析

旨在确定引起湖北省某规模化猪场断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的主要病原。本研究采集该猪场具有PMWS典型临床症状的仔猪组织样品,经PCR检测,发现其存在猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)感染。对阳性样品中PCV2全基因组进行扩增和测序后,与国内外流行毒株进行全基因组和ORF2基因的比对,分析其核苷酸同源性。通过猪肾上皮细胞系PK-15对病毒进行分离培养和鉴定,对其核衣壳蛋白Cap的抗原表位和小鼠免疫原性进行分析和评估。病毒分离鉴定结果表明,成功分离到1株PCV2毒株(名称:XY2022;GenBank登录号:OM249965.1),全基因组长度为1767 nt,在PK-15细胞上的毒价为10~(5.70)TCID_(50)·mL^(-1);序列分析结果显示,XY2022属于PCV2d,与参考毒株的全基因组核苷酸相似性为94.3%~99.8%,ORF2核苷酸相似性为89.2%~99.6%;Cap的免疫原性分析和测定结果显示,相比于其他基因型毒株的Cap,XY2022 Cap的线性免疫优势区、线性中和表位和构象中和表位均存在差异位点,PCV2d(XY2022)Cap和PCV2b(WH)Cap均可诱导小鼠机体产生抗PCV2的中和抗体,但2d Cap诱导的中和抗体水平更稳定。本研究为湖北省PCV2的流行病学研究和变异毒株的防控提供了参考,可为研究PCV2致病机制和开发新型疫苗提供材料。

松果菊苷对阿尔茨海默病大鼠脑内兴奋性氨基酸的影响

目的应用D-半乳糖(D-galactose)及Aβ25-35联合建立阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)大鼠模型。采用脑立体定位技术、脑微透析技术及高效液相-荧光检测技术等研究松果菊苷(ECH)对阿尔茨海默病模型大鼠海马细胞外液中兴奋性氨基酸递质含量的影响,以探讨其对脑保护作用的可能机制。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和造模组,对照组10只,造模组40只。给造模组大鼠腹腔注射D-半乳糖(100 mg·kg-1),每天1次,共计腹腔注射42d。第43天用微量进样针在大鼠海马部位注射5μl Aβ25-35。对照组注射等量生理盐水。造模结束后通过Morris水迷宫检测筛选出具有行为学异常(潜伏期延长)的大鼠,将其随机分为模型组、ECH大剂量组、ECH小剂量组和石杉碱甲组,连续给药14 d,每日一次。于第14天进行大鼠海马微透析试验,将微透析液注入高效液相-荧光检测系统,测定各组海马细胞外液中兴奋性氨基酸谷氨酸和天门冬氨酸的含量。结果与模型组相比,ECH大剂量组、ECH小剂量组和石杉碱甲组海马透析液中兴奋性氨基酸的含量降低,具有统计学意义。结论应用D-半乳糖及Aβ25-35联合建立阿尔茨海默病大鼠模型的方法可行,ECH能对抗AD大鼠海马细胞外液中兴奋性氨基酸的毒性作用,可用于AD的防治。