樱桃花色苷对肥胖小鼠的降糖作用

目的:探讨樱桃花色苷(SWCN)的降糖活性,为樱桃高价值深加工与开发提供理论依据。方法:用高脂喂养雄性C57BL/6J小鼠建立肥胖小鼠模型,测定小鼠血清中葡萄糖、胰岛素含量,采用口服葡萄糖耐量实验(OGTT)和胰岛素耐量实验(ITT),评价膳食SWCN对肥胖引起的葡萄糖不耐受和胰岛素抵抗的改善作用。用实时荧光定量PCR检测SWCN对肝脏中糖代谢相关基因的差异表达水平的影响。结果:膳食SWCN能够减缓肥胖的发生,降低肥胖小鼠的血糖、胰岛素水平,减轻胰岛素抵抗和葡萄糖不耐受性。实时荧光定量PCR实验结果表明,膳食SWCN能够提高肥胖小鼠肝脏胰岛素受体底物2(IRS2)的表达水平,同时下调糖异生途径的关键酶磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(PEPCK)和葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)基因的表达水平。结论:膳食樱桃花色苷能够激活肝脏中的胰岛素信号通路,抑制糖异生途径,从而降低肥胖小鼠的空腹血糖及胰岛素含量水平,增强糖耐量和胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗状态。

案例教学法在无机及分析化学实验中的应用

无机及分析化学实验是高等院校基础课程之一。本文阐述了案例教学法在无机及分析化学实验教学中的具体实施过程,探讨如何通过实施案例教学激发学生对无机及分析化学实验的学习兴趣,提高学生独立分析、解决问题和灵活应用知识的能力。案例教学法体现了以生为本的教学理念,能够推动无机及分析化学实验教学的改革,实现创新型、实践型人才培养的目的。

植物多酚干预肥胖发生作用机制的研究进展

肥胖及其并发症严重危害公众身体健康,且肥胖发病率逐年上升,给社会和个人带来巨大的经济和心理负担。因此,肥胖的预防及治疗在学术界已成为亟待解决的重要问题。植物多酚是植物体内种类最多的一类次生代谢产物,广泛存在于水果、蔬菜、中草药以及植物源食品中,且多酚被报道具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒和抗癌等多种生物活性。此外,大量研究表明植物多酚具有良好的预防或治疗肥胖及其并发症的效果。本文从调节机体脂质代谢,影响脂肪细胞的增殖、分化与凋亡,刺激机体产热、加速能量消耗,抗炎和促进益生菌增长以调节肠道菌群等方面系统介绍了植物多酚的减肥降脂作用及其相关机制的研究进展,以期为植物多酚的开发与推广应用提供有益参考。

支持型导师指导风格对研究生教育质量的影响

高校扩招后,我国的研究生教育规模迅速扩大,研究生教育质量越来越受各方关注,如何提高研究生培养质量一直是研究生教育实践中需要不断探索的议题。在我国的研究生教育中,导师是决定研究生教育质量高低的决定性因素之一。支持型导师指导风格作为研究生教育中积极有效的导师指导方式,为我国培养了众多优秀的科研创新型人才。文章综述了支持型导师指导风格的内涵及其与研究生科研创新能力的关系,为进一步优化导师对研究生的指导模式及提高我国研究生教育质量具有一定的启示作用。

麦胚清蛋白抗氧化肽的筛选及对细胞氧化损伤的保护作用

本研究运用超滤与凝胶层析等分离纯化技术逐级分离麦胚清蛋白中性蛋白酶酶解产物,以氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)与2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid),ABTS)阳离子自由基清除率为评价指标,筛选具有较高抗氧化活性的产物组分,并以该组分为研究对象,利用液相色谱-串联质谱结合Peptide Ranker数据库活性预测技术筛选出具有高抗氧化活性的小肽,并通过高糖诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)及H2O2诱导HepG2细胞与VSMCs建立细胞氧化应激模型,评价小肽对细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,经超滤与层析筛选出分子质量较小的V组分抗氧化活性最高,液相色谱-串联质谱鉴定出该组分主要由20个小肽组成,PeptideRanker预测与抗氧化实验验证发现肽序列LNYPPY(765.3 Da)抗氧化活性最高(ORAC 3.01μmol TE/μmol)、ABTS阳离子自由基清除率(95.58%)。肽序列LNYPPY对H2O2诱导的HepG2细胞和VSMCs氧化损伤具有很好的保护作用,但对高糖诱导的VSMCs异常增殖以及活性氧水平上升无明显影响。综上,肽LNYPPY具有良好的体外抗氧化活性,且对H2O2诱导的细胞氧化损伤具有保护作用,研究可为麦胚清蛋白的开发利用提供重要的理论参考。

酶法制备大豆蛋白成骨活性肽

【目的】探究从大豆分离蛋白双酶分步酶解产物中分离促成骨细胞增殖肽的工艺,为大豆产品的开发提供参考。【方法】以促成骨细胞增殖活性作为测定指标,选用木瓜蛋白酶酶解大豆分离蛋白(SPI),采用MTT法检测不同浓度的木瓜蛋白酶酶解产物对成骨细胞的促增殖活性。采用pH-Stat法检测水解时间为1、2、3、4、5和6 h的木瓜蛋白酶酶解产物的水解度,并检测相应水解时间的酶解产物对成骨细胞的促增殖活性。然后分别采用截留分子量为30 kD和10 kD两种超滤膜对活性较高的酶解产物进行超滤,并测定各超滤组分对成骨细胞的促增殖活性。再将具有较高促成骨细胞增殖活性的超滤组分分别在0.5、1、1.5、2和2.5 h进行碱性蛋白酶酶解,并检测相应水解时间的酶解产物对成骨细胞的促增殖活性。然后选用交联葡聚糖(Sephadex G-15)对具有较高促成骨细胞增殖活性的酶解产物进行分离,并检测各分离组分对成骨细胞的促增殖活性。最后,对各分离组分进行氨基酸分析,并采用质谱(ESI-TOF MS/MS)对最高促成骨细胞增殖活性的分离组分进行结构鉴定,并筛选出具有较强促成骨细胞增殖的大豆活性肽。【结果】在浓度为200μg·mL^(-1)时,木瓜蛋白酶酶解物对成骨细胞的促增殖活性随着酶解时间的增加逐渐增强,当酶解时间为5 h时达到最高促增殖活性((118.24±2.73)%)。木瓜蛋白酶酶解产物经超滤分离、碱性蛋白酶酶解和凝胶过滤色谱分离后,对各分离组分进行氨基酸分析并筛选得到对成骨细胞具有最强增殖活性的组分F3,该组分的成骨细胞增殖率为(125.80±2.94)%,且F3中丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸等疏水性氨基酸以及芳香族氨基酸和必需氨基酸的含量明显高于其他组分。进一步通过质谱鉴定出F3主要由10个肽段组成。其中,DAMDGWFRL、GQTPLFPR、ADFYNPK、KDWYDIK的疏水性氨基酸、芳香族氨基酸以及必需氨基酸占比较高。对上述4个肽段进行活性测定,发现GQTPLFPR的促成骨细胞增殖活性最强,在浓度为100μmol·L^(-1)时,其成骨细胞增殖率为(129.11±3.12)%。【结论】采用双酶分步酶解结合超滤和凝胶过滤色谱等蛋白分离纯化技术,从大豆分离蛋白中分离纯化出了具有较强促成骨细胞增殖活性的多肽,为促成骨细胞增殖活性肽的制备和应用提供了技术参考。

麦胚源活性肽对H_(2)O_(2)诱导的成骨细胞-破骨细胞 共育体系中细胞氧化损伤的保护作用

目的:为促进麦胚的高值化利用,建立H_(2)O_(2)诱导的成骨细胞(osteoblast,OB)-破骨细胞(osteoclast,OC)共育体系氧化应激模型,探究麦胚源活性肽ADWGGPLPH对OB和OC活性的影响。方法:利用流式细胞术、噻唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT)增殖实验、异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染等方法,明确麦胚源活性肽对氧化应激环境中OB增殖和凋亡的作用。利用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活力检测、酶联免疫吸附测定以及抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色等方法研究麦胚源活性肽对氧化应激共育体系中OB和OC分化活性的影响。结果:麦胚源活性肽能够有效抑制氧化应激共育体系中OB内活性氧的增加,并通过抑制丙二醛生成,增强谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活力,提高OB免受自由基攻击以及清除自由基的能力。麦胚源活性肽可显著抑制氧化应激共育体系中OB凋亡(FITC/PI双染结果显示OB凋亡率由12.4%下调至5.3%,OB细胞活力由60.4%提高至92.8%(P<0.01)),改善了OB增殖水平。此外,麦胚源活性肽对OB早期分化活性指标ALP活力、蛋白I型胶原以及晚期分化活性指标骨钙素水平的下降具有良好改善作用,OB矿化率从21.3%提高至84.3%(P<0.01),从而使OB发挥良好的分化活性和矿化功能。TRAP染色结果显示麦胚源活性肽也能有效抑制氧化应激造成的OC过度分化(OC相对阳性面积从376.4%减小至128.1%(P<0.01))。结论:麦胚源活性肽对H_(2)O_(2)诱导的OB-OC共育体系中细胞氧化损伤具有保护作用,从而维持良好的细胞稳态,本实验可为麦胚蛋白的开发利用提供一定的理论参考。

不同壁材包埋对益生菌性能的影响

益生菌具有良好的保健效果,但在相关制品中的存活率较低。微胶囊化是保护益生菌抵抗外界不利条件,提高细菌存活率的有效方法。本文聚焦于微胶囊壁材的分类及选择,综述了不同壁材包埋对益生菌在胃肠道耐受性、耐热性、食品感官特性、储存稳定性的影响。

新型麦胚活性肽对脂多糖诱导RAW264.7细胞的抗炎作用

从小麦胚芽蛋白中筛选出具有抗炎作用的活性肽。采用碱溶酸沉法从小麦胚芽中提取麦胚蛋白,采用体外模拟胃肠道消化法,利用胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-糜蛋白酶对麦胚蛋白进行酶解得到酶解产物;采用超滤膜进行分离,得到不同分子量的活性组分:Ⅰ(>3 ku)、Ⅱ(1~3 ku)和Ⅲ(<1 ku)。通过建立脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞炎症模型筛选出抗炎活性最强的组分为Ⅲ(<1 ku)。进一步利用液相色谱-串联质谱法鉴定出Ⅲ组分含14条多肽,结合PeptideRanker数据库预测结果,最终筛选出P1(APEPEPAF)、P2(MDTSAPSPF)、P3(IDIPNGR)和P4(VDPAVPPK)4条活性多肽,其中P1可显著抑制LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞NO及IL-6、TNF-α和IL-1β的分泌,促进IL-10的分泌。

大豆活性成分的抗炎作用及其机制研究进展

大豆是我国主要的粮食作物之一,富含蛋白质、异黄酮、皂苷、低聚糖等多种生物活性成分,具有预防糖尿病、骨质疏松、心血管疾病和癌症等功效。本文综述了大豆异黄酮、大豆皂苷和大豆蛋白等活性成分通过调整肠道菌群结构、保护肠道屏障功能、调节免疫应答反应、影响氧化应激等生理途径发挥其抗炎生理活性的国内外研究进展,旨在为进一步开发利用大豆,使其成为预防和治疗炎症相关疾病的功能性成分提供理论依据。

小麦胚芽活性肽通过AMPK/SIRT1改善大鼠肝脏衰老损伤的作用机制研究

小麦胚芽作为小麦面粉加工过程中产生的副产品,资源极为丰富,但一直以来未能得到充分合理的利用.本研究以课题组前期获得的麦胚活性肽ADWGGPLPH(ADW)为对象,以自然增龄的SD大鼠作为肝脏老化损伤的动物模型,9月龄大鼠作为对照,用麦胚源活性肽持续灌胃干预至21月龄,研究麦胚源活性肽对自然增龄大鼠肝脏老化损伤的影响,并结合H2O2诱导衰老HepG2细胞模型初步探明其分子机制.结果表明,麦胚源活性肽ADW能够增加大鼠血清及肝脏中SOD,T-AOC,GSH-Px,CAT等抗氧化酶活性,同时降低MDA水平,改善大鼠肝脏中氧化应激水平;降低血清及肝脏中IL-6,IL-1β,MMP3,TNF-α水平,并且增加抗炎因子IL-10分泌,改善增龄大鼠肝脏中炎症环境;麦胚源活性肽干预后肝脏结构明显好转、脂肪空泡减少、细胞排列整齐,ALT以AST水平均显著下降.麦胚源活性肽能够有效地改善老化肝脏中细胞的结构及生长状态异常,减少增龄过程中肝脏质量损失,降低了衰老标志蛋白P53和P21的表达量,减轻肝脏老化损伤程度并减缓了肝脏的老化进程.通过加入抑制剂、激活剂、siRNA等手段,初步阐明麦胚源活性肽能够通过激活AMPK/Sirt1信号通路以调控衰老相关进程.本研究对于开发健康老龄化膳食结构以及麦胚资源的精深利用具有十分重大的意义.

冷刺激对小鼠脂肪组织褐色化和脂代谢的影响

目的:探讨4摄氏度冷刺激对小鼠脂肪组织褐色化的影响。方法:野生型小鼠在4摄氏度环境下饲养一周,称取小鼠重量并取不同的脂肪组织固定,进行H&E染色;对血液中甘油三酯、脂肪酸的水平进行检测;检测不同脂肪组织中脂肪含量和相关蛋白的表达水平。结果:野生型小鼠在4℃环境下饲养一周后体重明显降低。血液中甘油三酯、脂肪酸和甘油的水平明显下降。皮下白色脂肪组织(subcutaneous white adipose tissue, SWAT),腹腔生殖腺旁白色脂肪(gonadal visceral white adipose tissue, GWAT)和褐色脂肪(brown adipose tissue, BAT)中的脂肪含量明显降低,其中SWAT和BAT中脂肪含量降低近50%。SWAT发生明显的褐色化现象,组织中出现含有多个脂滴的脂肪细胞,同时褐色化的标志蛋白UCP1(uncoupling protein 1)和Cidea明显增加。GWAT中脂滴仍呈现单室大脂滴,脂肪细胞变小,脂肪积累降低约14%,低于SWAT和BAT中的相应变化。BAT组织中脂滴明显变小,UCP1的表达明显增加。同时我们在三种脂肪组织中都观察到线粒体相关蛋白CPT1 (Carnitine palmitoyltransferase I)的明显增加。结论:冷刺激能明显改变小鼠的脂代谢状态,全身的脂肪积累明显降低。SWAT发生明显的褐色化现象,Cidea和UCP1的表达明显增加。SWAT, GWAT和BAT脂肪组织中有明显的线粒体活性的增加。

皮下种植黑色素瘤对小鼠血液中脂肪和氨基酸代谢的影响

目的:探讨皮下种植黑色素瘤对小鼠血液中相关脂肪和氨基酸代谢的影响。方法:野生型小鼠皮下种植B16黑色素瘤细胞,两周后观察小鼠并取不同的组织称重,检测血液中甘油三酯、葡萄糖、脂肪酸、炎症因子的水平。利用质谱方法检测血液中氨基酸的水平。结果:野生型小鼠皮下肿瘤种植2周后体重没有明显变化,脾脏和肝脏的重量明显增加,皮下脂肪组织和腹腔脂肪组织的重量没有明显变化。血液中甘油三酯的水平明显增高,葡萄糖和甘油的水平明显下降。血液中炎症因子Interleukin 6(IL6)和Interferon gamma(IFNγ)的水平明显增加。血液的质谱结果显示有四种氨基酸的水平有明显变化,其中胱氨酸(Cystine)增加了约30倍,丝氨酸(Serine)、谷氨酰胺(Glutamine)和色氨酸(Tryptophan)分别有不同程度的降低。结论:皮下黑色素瘤显著影响小鼠机体营养状态和炎症,并特异性影响血液中氨基酸的代谢。