伢典微创凝胶治疗小儿龋齿的临床效果

目的探讨伢典微创凝胶治疗小儿龋齿的临床效果。方法选取2021年5月至2023年5月于山东省菏泽市巨野县妇幼保健计划生育服务中心口腔科就诊的86例龋齿患儿作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组与观察组,每组各43例。对照组予以常规牙钻磨牙法治疗,观察组予以伢典微创凝胶治疗。比较两组临床效果及咀嚼功能。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。观察组咀嚼功能优良率高于对照组(P<0.05)。结论伢典微创凝胶治疗小儿龋齿的临床效果较好,可提高患儿咀嚼功能,值得临床推广。

中国北方5城市慢性乙型肝炎患者的基因分型

目的 了解中国慢性乙型肝炎 (CHB)患者中的基因分型情况。方法 根据GenBank中 18株HBVS基因核苷酸序列 ,设计共同的外引物及其因型特异性内引物 ,对中国北方 5个城市 5 95例CHB患者血清进行基因分型 ,并对A、B、C及B、C混合型各一株进行测序。结果 5 95例血清标本中 ,A型 8例 ,占 1 4 % ;B型 5 3例 ,占 8 9% ;C型 36 0例 ,占 6 0 5 % ;B、混合型 112例 ,占 18 8% ;A、C混合型 14例 ,占 2 4 % ;A、B混合型 15例 ,占 2 5 % ;A、B、C混合型 6例 ,占 1 0 % ;未分型者 2 7例 ,占 4 5 %。 5城市间在B、C及B、C混合型的分布上有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,4份测序结果与PCR基因分型法一致。结论 在 5个城市CHB患者中HBV基因型以C型为主 ,B型次之 ,并见各种混合基因型感染 ,各地区在主要基因型分布上存在显著性差异。

恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者HBV cccDNA的影响

目的评价恩替卡韦治疗2年对慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者血清及肝细胞内HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)水平的影响。方法选择112例恩替卡韦治疗2年的慢乙肝患者,比较治疗前后血清HBV DNA、HBVcccDNA的变化。同时比较其中12例具备治疗前后肝活检标本患者的肝细胞内HBV cccDNA水平的变化。结果治疗2年后,112例患者中有96例(85.71%)血清HBV DNA低于500 copies/ml,所有患者血清中均检测不到HBV cccDNA。12例患者肝细胞内均可检测到HBV cccDNA,且与治疗前相比无明显下降。结论恩替卡韦治疗可有效抑制HBV复制,但不能清除肝细胞内的HBV cccDNA,停药后仍有病毒反弹的可能。

HIV抗原抗体光激化学发光法联合检测试剂的评价

目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿因子样本、孕妇样本、ANA阳性样本、乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎患者等干扰样本;另外有10套HIV血清转换盘共120份血清样本。检测采用LiCA 500自动光激化学发光检测仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数,定性检测血清HIV1 p24抗原和HIV1/2抗体并评价与参比试剂结果一致性和血清转化灵敏度。结果北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)血清样本检测结果和参比试剂检测结果具有较好一致性;评估试剂的血清转化灵敏度同参比试剂相当。结论北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市同品种试剂盒检测结果具有一致性,血清转换灵敏度较高,有利于筛查HIV早期感染,为临床HIV早期诊断提供有效的实验室诊断依据。

1314例HIV确证试验结果分析

目的对本实验室的1 314例HIV确证试验结果进行分析,了解HIV感染的人群特征及确证试验相关因素,为艾滋病确诊提供更详实的诊断依据。方法将2016年9月至2019年4月本实验室检测的1 314例HIV确证试验结果作为研究对象,汇总WB结果及条带情况,并将抗体初筛结果、HIV1 p24抗原结果、核酸、CD4计数等其他试验室相关检测指标录入分析体系,同时了解检测者的流行病学资料,进行分析。结果 1 314例确证结果中,阳性结果1199例,占91.3%,不确定的为99例,占7.5%,阴性的为16例,占1.2%。1 314例标本中男性1 172例,占89.2%,女性142例,占10.8%,年龄主要集中在20到50岁的青壮年男性,占到84%。不确定和阳性结果中WB试验均以p24和gp160条带为主。结论由于确证试验的敏感性低于目前的筛查试剂,在报告确证试验结果时不仅要看免疫印迹条带情况,还应该同时结合实验室多项检测结果及流行病学资料进行综合分析。多种HIV相关检测手段的建立有助于提高确证试验的准确性。

血管紧张素原基因M235T变异与HBV感染后肝硬化形成的关系

目的:探讨血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)基因M235T分子变异与肝硬化的关系.方法:提取肝硬化患者和正常人白细胞基因组DNA,通过PCR、限制性片段长度多态性和测序等技术,观察在正常组和肝硬化组的不同基因型的分布和等位基因频率的差异.结果:AGT基因M235T位点MM、MT和TT基因型的分布在肝硬化组和正常组分别为:7.8%、40.6%、51.6%与8.0%、59.7%、32.3%,两组之间不存在差异(χ2=5.120,P>0.05).结论:AGT基因M235T变异可能与肝硬化没有显著关系.

SARS病人外周血T淋巴细胞的动态变化及其在发病进程和发病机理中的意义

目的 :通过研究严重急性呼吸综合征 (SevereAcuteRespiratorySyndrome,SARS)患者外周血免疫细胞的动态变化 ,探讨外周血免疫细胞在SARS发病进程中的意义 ,初步探讨SARS的发病机理 ,并为SARS的诊断和治疗提供有力的实验室依据。方法 :回顾性动态观察我院收治的已治愈SARS病例和SARS死亡病例外周血CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞 ,评估外周血免疫细胞在SARS发病进程及预后中的作用。实验方法为流式细胞术检测和分析免疫细胞表面特异性荧光抗体标记 ,T细胞表面标志组合为CD3 CD8 CD4 5 CD4。结果 :所有治愈的SARS病人的CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞都有不同程度的可逆性下降 ,而所有的死亡病例有不可逆性显著下降 ,直至死亡。T细胞下降程度和维持的时间与病情密切相关。普通型SARS病例最低CD4 + T淋巴细胞数为 30 5± 15 0cells μl(P <0 .0 0 1)、重型为 139± 6 9cells μl(P <0 .0 0 1) ,普通型SARS病例最低CD8+ T淋巴细胞数为 2 2 3± 89cells μl(P <0 .0 0 1)、重型为 171± 92cells μl(P <0 .0 0 1)。所有普通型病例和大部分重型病例T淋巴细胞恢复正常 ,个别重型病例低于正常或接近正常 ,恢复后普通型平均为 991± 2 86cells μl,重型平均为 5 4 5± 2 2 5cells μl。恢复时间有所不同 ,普通型平均为 17±

重症手足口病患儿合并肺炎支原体感染实验室检测指标对于临床诊断及治疗的提示性作用

目的探讨肠道病毒71型合并肺炎支原体感染的重症手足口患儿的检测指标对于临床诊断及治疗是否起到提示作用。方法收集2014年3月至8月于首都医科大学附属北京地坛医院住院的手足口病患儿100例,非手足口病患儿50例,对其粪便标本采用荧光定量RT-PCR方法检测,得出核酸定性结果。对其血清标本采用被动凝集法检测以得出肺炎支原体抗体效价。分析肺炎支原体感染在手足口病组和非手足口病组中的差异,探讨肠道病毒71型合并肺炎支原体感染与手足口病严重程度的相关性。结果重症手足口病组患儿的肺炎支原体阳性率(76%)高于轻症手足口病组患儿的肺炎支原体阳性率(48%),差异有统计学意义(χ2=8.319,P=0.004)。结论肠道病毒71型阳性合并肺炎支原体感染的重症手足口病患儿,应在临床诊治中引起关注。对于降低重症手足口病患儿向危重症的转化具有提示意义。

SARS病人外周血NK细胞和B淋巴细胞的动态变化及发病机理初探

目的 :初步探讨外周血NK细胞和B细胞在严重急性呼吸综合征 (severeacuterespiratorysyndrome ,SARS)发病进程及发病机理中的意义。方法 :应用流式细胞仪检测和分析SARS病人外周血B淋巴细胞、NK细胞动态变化 ,使用的NK细胞表面标志为CD16 + CD5 6、B细胞表面标志为CD19。结果分析用BD公司的MultiSet自动分析软件。结果 :随着病程的进展92 %的SARS病人B细胞先降后升或持续升高 ,少部分病人B细胞无改变或下降。NK细胞显示不同的个体差异 ,73.7%的病人显示典型的抗病毒免疫现象 ,即发病初期NK细胞数升高 ,恢复期NK细胞数下降 ,也有部分病人NK细胞无变化 (15 .8% )或升高 (10 5 % )。结论 :在SARS发病进程中B淋巴细胞介导的体液免疫可能起一定的作用。

ntPCR-RFLP检测HBV阿德福韦耐药变异-rtN236T变异

目的:建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV) 阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异的快速检测方法. 方法:根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt236N)PCR产物中含有DraI酶切位点(5’TTTAAA3’),而变异株(rt236T)无此限制性酶切位点.同时PCR扩增2份已行HBVRT区基因测序证实未出现rtN236T 变异的慢性乙型肝炎患者血清及自行构建的对照质粒,扩增产物经DraI酶切,30 g/L琼脂糖凝胶电泳后,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析. 结果:所建立的ntPCtk-RFLP方法灵敏度高,可以检测到106copies/L的HBV DNA;特异性强,其RFLP分析结果与DNA测序结果一致. 结论:ntPCR-RFLP方法灵敏、特异、简便、实用,适用于ADV耐药变异的临床监测工作.

流行性感冒发病初期利用流式细胞仪检测相关细胞因子的临床应用价值探讨

目的通过观察流感患者发病初期细胞因子水平变化,初步建立以流式多重微球芯片技术为主要方法的临床细胞因子检验方法,并探讨其临床意义。方法选取54例甲流病毒核酸阳性和20例甲流病毒核酸阴性的流感样患者作为流感发病组,其中甲流病毒核酸阳性患者分为轻症组和重症组,甲流病毒核酸阴性的流感样患者为甲流核酸阴性组;另选取35例健康对照人群作为对照组,对所有全血标本的细胞因子进行检测和统计学分析。结果细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-21(IL-21)、白细胞介素-12p70(IL-12p70)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、趋化因子-10(IP-10)、白细胞介素-2(IL-2)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平在流感患者发病初期明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);γ-干扰素(IFN-γ)在流感发病组和对照组中比较,差异无统计学意义(P>0.05);重症组IL-6、IP-10水平比轻症组、甲流病毒核酸阴性组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-6、IL-21、IL-12p70、IL-1β、IL-10、IP-10、IL-2、MCP-1均可作为发热患者的临床生物学评价指标,其中IL-6、IP-10可作为病情进展评估的重要指标。

应用ntPCR-RFLP技术检测乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异

目的建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异及rtA181V变异的快速检测方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株rt236N PCR产物中含有DraⅠ酶切位点(5'-TTTAAA-3'),而变异株rt236T无此限制性酶切位点;使野生株rt181A PCR产物中含有BlpⅠ酶切位点(5'-GCTNAGC-3'),而变异株rt181V无此限制性酶切位点。选取4份应用ADV治疗1年以上出现HBV DNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、限制性内切酶酶切及凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各1例进行HBV RT区基因序列分析。结果建立的ntPCR-RFLP方法可以检测到102copies/L的HBV DNA;RFLP分析结果与DNA测序结果一致,4份血清标本中检测到1份rtN236T变异,2份rtA181V变异。结论应用ntPCR-RFLP方法检测HBV阿德福韦耐药变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于HBV耐药变异的监测。

拉米夫定治疗中病毒核酸无应答患者体内乙型肝炎病毒逆转录酶基因变异分析

目的:了解拉米夫定病毒核酸无应答与HBV逆转录酶基因变异之间的关系. 方法:采用PCR产物直接测序方法对3例病毒核酸无应答患者体内HBV RT区基因序列治疗前后的变异情况进行分析. 结果:治疗前后6份标本核苷酸变异率为0.63-1.52%,氨基酸变异率为0.38-1.90%,其中出现rtY203H、rtS256C、rtL269Ⅰ变异的频率较高,此外尚有1例出现rtL180M变异. 结论:拉米夫定治疗中病毒核酸无应答可能与HBV RT区基因变异有关.

血清乙肝病毒DNA煮沸抽提法的建立和应用

目的 建立一种简便的血清HBV DNA抽提方法一煮沸抽提法,并将其应用于巢式PCR扩增。方法 选取16份CHB血清,分别应用直接煮沸法和异硫氰酸胍-酚/氯仿法进行HBV DNA抽提后,进行荧光定量PCR测定;并以煮沸法抽提样品为模板,进行HBV DNA P区部分片段巢式PCR扩增。结果 将上述两种抽提方法的荧光定量PCR结果取对数后进行直线相关分析和配对样本t检验,结果显示:两种方法的定量PCR结果之间存在良好的相关性(r=0.696,P=0.003),且二者定量PCR结果无差异(P=0.663)。16份标本巢式PCR扩增均为阳性,PCR产物分子量大小与预期值相符。结论 直接煮沸法抽提HBV DNA,简便、快速、效果好,适用于HBV的科研和临床检测工作。

瘦素、脂联素和胰岛素敏感指数与艾滋病HAART后非酒精性脂肪肝相关性分析

目的探讨瘦素、脂联素和胰岛素敏感指数与艾滋病HAART后非酒精性脂肪肝(NAFLD)的相关性。方法我们利用横断面观察研究,通过彩超检测发现艾滋病HAART后合并NAFLD的患者;这些患者和非NAFLD比较,探讨HAART后合并NAFLD的患者体重指数(BMI)、CD4细胞水平、空腹血糖和血脂水平、胰岛素水平(FINS)、胰岛素敏感指数(HOMA-ISI)和抵抗指数、肝肾功能、瘦素和脂联素的变化;并运用Logistic回归分析HAART后合并NAFLD的独立风险因素。结果在75例接受HAART患者中,发现25例NAFLD患者;在Logistic回归多变量回归分析模型中,瘦素水平(OR=2.88,P=0.001)和HOMA-ISI(OR=0.56,P=0.004)与脂肪肝的发生具有高度的相关性;其中HOMA-ISI是艾滋病合并NAFLD发生的保护性因素。结论在艾滋病HAART后NAFLD的患者中,甘油三酯、胰岛素水平、胰岛素抵抗指数、瘦素水平明显增高,脂联素水平和胰岛素敏感指数显著降低;其中瘦素水平是艾滋病HAART后发生NAFLD的预测因素,胰岛素敏感指数为保护性因素。

ntPCR-RFLP检测HBV阿德福韦耐药变异-rtA181V变异

目的:建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异- rtA181V变异的快速检测方法．方法:根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt181 A)PCR产物中含有Blp Ⅰ酶切位点(5’GCTNAGC3’),而变异株(rt181V)无此限制性酶切位点．选取4份应用ADV治疗1 a以上出现HBV DNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、Blp Ⅰ酶切、30 g／L琼脂糖凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析．并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各一例进行 HBV RT区基因序列分析及对照质粒的构建．结果:自4份血清标本中检测到2例rtA181V变异．所建立的ntPCR—RFLP方法灵敏度高,可以检测到103 copies／L的HBV DNA;特异性强,其 RFLP分析结果与DNA测序结果一致．结论:应用ntPCR-RFLP方法检测rtA181V 变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于 ADV耐药变异的临床监测工作．

C型乙型肝炎病毒的全基因组序列分析

目的 探索乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组的结构特点。方法 应用直接PCR基因分型法确定HBV基因型 ,然后随机选择 1例单纯HBVC基因型感染的患者血清 ,分 3个相互重叠片段扩增HBV基因并分别克隆测序。利用VectorNTISuite 7 0软件包、GeneDoc 2 6和TreeView 1 5,将该 3个基因片段拼接为全基因组序列 ,命名为BD HB1,并进行基因进化树分析和同源性比较。结果 HBVC基因型序列全长为 3 2 15bp ,其中A占 2 2 2 % ,G占2 2 4% ,C占 2 6 8% ,T占 2 8 6% ;有S、C、P和X区 4个开放读码框架 (ORFs) ;HBsAg亚型为adr ;HBVRT区 549～552aa为YMDD ,未发生变异 ;未发现前C区nt1896G变异 :BCP区nt1762、1764发生双突变。对HBV分段序列及全基因组序列进行基因进化树分析显示 ,BDHB1与HBVVC基因型的同源性最高。结论 BDHB1基因组符合HBVC基因型结构特点 ,在BCP区存在双突变。

同时检测SEN病毒D和H聚合酶链反应法的建立

目的 建立同时检测SEN病毒D和H(SENV -D和H)巢式聚合酶链反应法 (nPCR)。方法 第一轮PCR外引物为SENV -D和H开放读码框架 (ORF) 1区的共同序列 ,第二轮PCR内引物分别为SENV -D和HORF1区型特异性引物。应用双脱氧链末端终止法对SENV -D和H的PCR产物进行克隆测序。结果 应用同时检测SENV -D和H的nPCR法最终检出SENV -D和H的血清稀释度为 10 3。序列分析表明 ,用本法检出的SENV -D(DTd株 )和SENV-H(DTh株 )与GenBank收录的SENV -D和H株核苷酸序列同源性均为 92 %。检测 173例慢性乙型肝炎 (轻、中度 )患者 ,SENV -D和H的总感染率为 5 8 4%。结论 本法可用于SENV

Beckman和BD两种机型流式细胞仪检测CD4^＋T淋巴细胞数比较研究

目的比较两种机型(Beckman Coulter FC500和BD FAC-S Calibur)流式细胞仪、两种"设门"方法平行检测艾滋病病毒(HIV)感染者CD4+T淋巴细胞绝对数。方法用两种机型流式细胞仪、前向与侧向散射光和CD45两种"设门"方法,分3批次平行检测48份HIV感染者血标本。结果两种机型流式细胞仪、两种"设门"方法检测CD4+T淋巴细胞计数结果差异无统计学意义(P>0.05),并存在高度的相关性(P<0.05),相关系数分别为0.941、0.966和0.970。结论两种机型、两种"设门"方法检测CD4+T淋巴细胞计数结果接近,且高度相关,可以互为参考。

T淋巴细胞亚群在新型冠状病毒肺炎患者中的表达及外周血白细胞水平的临床价值研究

目的探讨新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者外周血中T淋巴细胞亚群的表达及外周血白细胞水平的临床应用价值。方法选取2020年2月3日至2月29日首都医科大学附属北京地坛医院收治的46例COVID-19确诊患者作为研究对象,并按疾病严重程度分为普通组和重症组。用SPSS 17.0统计学软件回顾性分析比较两组患者中性粒细胞(N)、淋巴细胞(L)、NLR(N/L)、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、N4R(N/CD4^+)和N8R(N/CD8^+)指标的表达水平,并采用受试者工作曲线(ROC)评价以上不同指标在普通型和重症型COVID-19患者间的诊断价值。结果本研究共收集46例新冠肺炎患者,其中重症组18例(男女比例:11/7),普通组28例(男女比例:15/13),平均年龄分别是69.5岁和34岁(P<0.001)。重症组中的中性粒细胞计数(N)、NLR(N/L)、CD4^+/CD8^+、N4R(N/CD4^+)和N8R(N/CD8^+)都显著高于普通组(5.36×109 vs 2.92×109;6.40 vs 1.71;1.87 vs 1.31;0.017 vs 0.005;0.029 vs 0.004),重症组中的淋巴细胞计数(L)、CD4^+和CD8^+都显著低于普通组(0.85×109 vs 1.60×109;328 vs 496;151 vs 433)。上述差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析各个指标对COVID-19患者的诊断价值结果显示:CD8^+诊断COVID-19患者的ROC曲线下面积是0.849,特异性和灵敏度分别71.43%和83.88%;N/CD8诊断COVID-19患者的ROC曲线下面积是0.875,特异性和灵敏度分别是71.43%和100%;淋巴细胞诊断COVID-19患者的ROC曲线下面积是0.865,特异性和灵敏度分别是60.71%和100%。结论CD8^+、N/CD8^+和淋巴细胞计数(L)三者在区分COVID-19重症型和普通型上有较好的灵敏度和特异性,可以提高临床对二者的鉴别能力。