植物鞘氨醇诱导白血病细胞凋亡的作用及机制研究

目的 初步探讨植物鞘氨醇(phytosphingosine, PHS)对白血病细胞凋亡的影响及其可能机制。方法 采用人白血病细胞株K562及SUP-B15作为研究模型,CCK-8法检测细胞活力,EdU检测细胞DNA合成能力,RNA-seq检测PHS处理后差异表达基因,GO功能富集及KEGG信号通路富集分析PHS可能作用的分子途径,CTD数据库和Discovery Studio软件对PHS进行反向找靶,Discovery Studio软件对PHS和BCL-2进行分子对接,流式细胞术检测细胞凋亡变化,JC-1染色检测线粒体膜电位变化,Western blot检测凋亡相关分子蛋白水平表达变化。结果 PHS能抑制K562和SUP-B15细胞增殖,且呈剂量和时间依赖性。PHS的半数抑制浓度在K562细胞中分别为17.67μmol/L(24 h)和12.52μmol/L(48 h),在SUP-B15细胞中分别为17.58μmol/L(24 h)和14.86μmol/L(48 h)。20μmol/L PHS作用白血病细胞48 h后,能显著抑制细胞DNA的合成(P<0.05)。对PHS作用于K562细胞后差异基因进行GO富集分析发现PHS可能参与细胞凋亡正向调控、细胞质膜及组分、激酶结合与活性等生物功能。反向找靶结果提示,BCL-2作为PHS作用靶点的可能性最高。PHS作用白血病细胞48 h后细胞凋亡率显著增加(P<0.05),呈剂量依赖性;线粒体膜电位下降,抗凋亡蛋白BCL-2表达下调(P<0.05),Cleaved caspase-3及Cleaved caspase-9蛋白表达上调(P<0.05)。结论 PHS诱导白血病细胞发生线粒体依赖性细胞凋亡,抑制白血病细胞增殖,并可能与PHS/BCL-2结合体有关。

东方山羊豆盐诱导抑制差减杂交文库构建及其表达序列标签分析

为筛选东方山羊豆盐诱导差异性基因,以250 mmol/L NaCl处理的东方山羊豆cDNA为实验组,未经诱导刺激的为驱动组,利用抑制性消减杂交技术(SSH)构建消减文库并对其部分阳性克隆进行了ESTs序列分析。该消减文库克隆的重组率为92%,插入片段大部分集中在0.2～1kb之间。随机挑取500个克隆进行测序及同源性分析,获得258个cleanESTs,经聚类、拼接,去除冗余序列,共获得132个Unigene,其中含有32个contigs和100个singlets,该文库的冗余度为24%。对其进行功能预测及分类,得到大量参与信号转导、转录调控、渗透和代谢调节、机体防御以及光作用等过程的相关基因。随机选择非重复的4个差异表达的序列设计引物,以半定量PCR方法验证其消减效率,结果显示,诱导组的表达量显著高于非诱导组,表明该文库有较高质量,且所采用的技术手段有助于快速发现东方山羊豆新功能基因。

CD44抗体HI44a对急性髓系白血病细胞株HL-60细胞体外增殖、分化作用的研究

目的探讨CD44抗体HI44a对急性髓系白血病细胞株HL-60细胞增殖、分化的作用机制。方法以急性髓系白血病细胞株HL-60为研究对象,以ATRA为阳性对照,以同型抗体IgG2a为阴性对照,以HI44a作为实验组,应用台盼蓝拒染法检测HI44a对HL-60细胞增殖的影响,瑞氏染色法及流式细胞学检测HI44a对HL-60细胞分化的影响,RT-PCR方法检测HI44a处理HL-60细胞前后TGFβ1和TGFβR1基因表达变化,应用荧光定量RT-PCR法检测HI44a处理HL-60细胞前后髓系分化相关的细胞因子及受体信号通路(GM-CSFRα、OPN)基因表达变化,以及DNA序列分析法检测HI44a处理HL-60细胞前后OPN异构体表达改变。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测实验组与对照组培养上清液的OPN水平。结果经HI44a作用后,HL-60细胞增殖受抑;细胞形态变化表现为体积变大,核固缩,核浆比例降低,核仁减少,出现核分叶等特征;细胞表面分化抗原CD15表达上调;HL-60细胞的GM-CSFRα及TGFβ1 mRNA表达水平增高,而OPN mRNA表达水平降低,TGFβR1 mR-NA表达水平无变化;OPN序列分析结果表明HI44a作用后OPN的3种异构体的组成发生改变,HI44a处理后的OPN水平明显下降。结论 CD44抗体HI44a通过上调GM-CSFRα、TGFβ1及下调OPN mRNA表达水平,减少OPN的分泌,抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞分化。

东方山羊豆4香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)基因的克隆和荧光定量表达分析

东方山羊豆(Galega orientalisL.)是20世纪末引种到我国的牧草品种,为发掘其基因资源,本实验克隆出东方山羊豆4 CL基因,并深入研究4 CL基因对东方山羊豆抗逆性的影响,为今后东方山羊豆在我国的种植和应用奠定基础。结果表明:采用RACE技术结合RT-PCR方法从东方山羊豆中获得一个编码4 CL基因的cDNA全长序列,命名为Go4 CL。该序列全长1916 bp,开放阅读框1653 bp,编码510个氨基酸。利用Real-Time PCR方法检测发现,Go4 CL基因在东方山羊豆的根中表达量最高,叶中表达量最少。在PEG、ABA、MeJA、SA胁迫处理下Go4 CL基因的表达量均有不同程度的上调,说明此基因在植物抵御干旱、病菌侵袭和机械损伤等胁迫过程中能够起到调控作用。

东方山羊豆肌醇-1-磷酸合酶基因的克隆与分析

探索新的基因和基因组合在植物耐盐性的研究中是至关重要的。本试验根据在不同植物中功能相同的同源基因保守序列设计引物,以250 mM NaCl胁迫后东方山羊豆(Galega.orientalis L.)幼嫩叶片中所提取的总RNA为模板,采用RT-PCR及RACE方法从东方山羊豆中克隆了一种新的肌醇-1-磷酸合成酶基因GoMIPS,cDNA全长1 858 bp,3'非编码区为256 bp,5'非编码区为69 bp,开放阅读框为1 533 bp,编码510个氨基酸。与已报道物种的MIPS基因氨基酸序列比较分析表明,GoMIPS与其他植物MIPS基因氨基酸相似性高达87%～95%,GoMIPS推导的氨基酸序列中含有植物MIPS基因所具有典型的NAD+结合区(GWGGNNG)和底物结合位点(SYNHLGNNDG),且9种植物NAD+结合区位置比较保守,均起始于第68个氨基酸。这一结果暗示功能结构域在进化过程中具有较高的稳定性。

退化细胞ZAP-70在慢性淋巴细胞白血病的表达及预后影响

目的:探讨退化细胞、ZAP-70在慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者外周血中的表达及其对预后的影响。方法:利用光学显微镜观察退化细胞在92例CLL患者外周血涂片的检出率;采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞XAP-70的阳性率。分析二者之间的相关性,并观察这二项指标与疾病进展的关系。结果:在92例CLL患者中,Binet A期28例(30.5%),Binet B期44例(47.8%),Binet C期20例(21.7%)。外周血涂片退化细胞百分比的中位数为19%(3%～48%)。取≥20%为阳性表达,则退化细胞阳性56例(60.9%);ZAP-70阳性32例(34.8%)。双因素直线相关分析提示二者呈负相关。退化细胞阴性患者临床预后差,较阳性患者的8年无进展生存率(PFS)下降(59.4%vs.86.0%,P<0.05),ZAP-70阳性患者较阴性患者的8年PFS也下降(57.8%vs.79.5%,P<0.05);退化细胞阴性伴ZAP-70阳性患者PFS更低(27.8%,P<0.05)。结论:退化细胞阴性和ZAP-70阳性提示CLL预后不良且二者密切相关。

太行山区酸枣产业发展对策

持续发展酸枣产业,不仅有利于生态保护,还是产业兴旺和强市富农的有效途径。酸枣为沙河市浅山丘陵区常见植被,具有很高的经济价值和生态价值,沙河拥有丰富的野生酸枣资源,是酸枣仁的道地主产区之一,产业基础良好。随着市场需求的不断增长,酸枣仁应用价值日渐凸显,对酸枣产业的发展现状调查发现,当前酸枣产业存在采摘加工薄弱、优良品种缺乏、管理粗放等问题,应构建产业链标准化生产,夯实产业基础,提升产业附加值,促进酸枣仁产业可持续发展。

全球化视域下中国电影原创力革新研究

随着经济的飞速发展,电影行业的新态势和新格局也在迅速发展和形成。在面对以好莱坞电影为首的各种不同电影的市场和文化冲击,中国电影需要从各个不同的方面进行改变以应对冲击。无论是思想,内容以及市场表现,中国电影不仅需要与整个行业的发展速度相匹配,更多的是需要从自身出发,从中国特有的民族文化和民族精神出发而产生的一种对于原创力的革新。

浅析沙河市三产融合发展

近年来,我们认真贯彻落实中央"一号文件"及国家乡村振兴战略相关要求,加大农业和农村经济结构调整力度,在稳定粮食生产的同时,加强科技推广、农机服务、市场流通、生态农业园区等体系建设,坚持优化一产、开拓二产、丰富三产的发展思路,全力推进农业一二三产融合发展,推动沙河市现代农业更好发展。

知沟理论下山东高校影视类人才培养模式的创新性研究

自2016年中国电影大年始,中国电影迎来井喷式发展,但在中国电影井喷式发展的同时,中国电影各类各环节专业人才短缺却成为常态,且有大量行当人才存在民工化倾向,且在总电影票房中,中国本土民族性电影占比过少。同时,根据知沟理论,行业发展与专业人才培养之间有着极大的不平衡和差异。在创新方面,大部分高新技术后期采用外国团队,电影缺乏民族主体性,高端创意人才急剧短缺都是现在中国电影行业面临的问题。

不老莓标准化生产技术

一、'不老莓'基本介绍不老莓蔷薇科、腺肋花楸属、多年生落叶灌木。原产于北美东北部,波罗地海沿岸至太平洋沿岸均有分布。我市近几年来随着河北宝晟农业开发有限公司等先锋企业的引导,不老莓产业稳步发展,并入选河北省优势特色产业。2016年1000亩左右,2017年2000亩,2018年5000亩,随着生产规模的扩大,技术水平、标准化基地等发展水平逐渐提高。

沙河市“生态经济沟”建设现状与思考

"生态经济沟"建设是资源利用和经济发展的有效结合,不同地区发展形式不一。沙河市适宜开展"生态经济沟"建设区域较多,并且很多相关项目已经开工建设,这些项目将大大改善当地的生态环境和经济水平,但"生态经济沟"开发建设仍有很多需要完善和改进的地方。

慢性移植物抗宿主病诊断与治疗中国专家共识(2024年版)

慢性移植物抗宿主病(cGVHD)是异基因造血干细胞移植后常见且严重的并发症,严重影响患者的生存率和生活质量。近年来,随着新型靶向药物等新疗法的出现及临床研究的不断推进,cGVHD在诊断、预防、治疗等方面取得了显著进步。基于近年来cGVHD研究新进展及逐渐增多的循证医学证据,本共识在《慢性移植物抗宿主病(cGVHD)诊断与治疗中国专家共识(2021年版)》基础上进行了修订及更新,以更好地指导临床实践。

太行山区酸枣栽培技术

酸枣是太行山区浅山丘陵区常见植被之一,持续发展酸枣产业,能加速实现产业兴旺和生态保护,是强市富农的有效途径。酸枣属落叶灌木,根、茎、叶、果实均有较高的药用价值,是名贵中药材,具有养心益肝、安神等功能,对治疗失眠、多梦等症有好的效果,具有很高的经济价值和生态价值。作为酸枣仁道地主产区之一,河北省沙河市拥有良好的自然条件和丰富的野生酸枣资源,产业基础良好。随着市场需求不断增长,酸枣仁应用价值日渐凸显,沙河市重新调整产业结构,发展酸枣种植产业。介绍了酸枣种植现状,总结了肥水管理、苗木栽植、整形修剪等栽培技术要点,以期助力酸枣产业发展。

IA联合小剂量HA＋G—CSF方案序贯治疗原发初治急性髓系白血病的临床研究

目的观察IA方案[去甲氧柔红霉素（IDA）＋阿糖胞苷（Ara—C）]联合小剂量HA＋粒细胞集落刺激因子（G—CSF）方案扁三尖杉酯碱（HHT）＋Am—C＋G—CSF]序贯诱导治疗原发初治急性髓系白血病（AML）的疗效和安全．性。方法IA方案化疗后3d复查骨髓，骨髓增生程度为活跃或者减低，原始细胞比例≥30％的患者57例进入开放性非随机临床对照研究。第2个疗程化疗方案采用小剂量HA＋G—CSF方案的32例患者为研究组；仍为IA方案的25例患者为对照组。治疗过程中，观察患者临床表现、血常规、血生化和骨髓细胞学检查等指标。结果研究组完全缓解（CR）21例（65．6％），部分缓解（PR）4例（12．5％），无早期死亡；总缓解率（ORR）为78．1％。对照组CR11例（44．0％），PR2例（8．0％），早期死亡3例（12.0％）；ORR为52．0％。研究组ORR高于对照组，差异有统计学意义（X2=4．31，P=0．038）。研究组中性粒细胞缺乏持续中位时间（9．5d）短于对照组（28．0d），差异有统计学意义（U=32．5，P〈0．001），血小板计数从最低值恢复至50×10^9／L以上的中位时间（11d）也短于对照组（19d），差异有统计学意义（U=193．0，P=0．001）。研究组输注悬浮红细胞和血小板的中位数量（8U，2个治疗量）少于对照组（16U，6个治疗量），差异有统计学意义（U=206．5，P=0．002；U=149．0，P〈0．001）。研究组应用静脉抗感染药物中位时间短于对照组（14d比21d），差异有统计学意义（U=249．5，P=0．015）。研究组严重内脏出血（消化道出血和脑出血）发生率【3．1％（1／32）]低于对照组[24．0％（6／25）】，差异有统计学意义（x2=3．90，P=0．048）。结论IA联合小剂量HA＋G—CSF方案序贯诱导缓解治疗原发初治AML是安全有效的。

沙河市夏播玉米品种对比试验

为正确引导农民选用良种,促进河北省沙河市玉米生产向优质、高产方向发展,沙河市农业技术推广站从近几年市场占有量大、田间表现好的玉米品种中筛选出15个品种,以郑单958为对照,进行了田间对比试验。通过玉米各品种长势、产量的对比,结果表明:明科玉77、MC703、联创825的丰产性最好,分别比郑单958(CK)增产36.15%、33.08%和32.48%,建议加大推广面积;农华816、中地88、裕丰308和农华305产量均低于郑单958(CK),应进一步试验观察。