同时测定大鼠血浆中阿托伐他汀及其活性和毒性代谢产物的方法建立与应用

目的 建立同时测定大鼠血浆中阿托伐他汀(ATV)及其活性代谢产物2-羟基阿托伐他汀酸(2-HAT)、4-羟基阿托伐他汀酸(4-HAT)和毒性代谢产物阿托伐他汀内酯(ATL)的分析方法并应用于药代动力学研究。方法 采用液相色谱-串联质谱(LCMS/MS)法进行分析。采用一步沉淀法对血浆样品进行处理(血浆样品经酸化调节pH值防止构型转化),采用梯度洗脱分析样品,分析时间为5 min;采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正离子检测,ATV及其代谢产物2-HAT、4-HAT、ATL及内标匹伐他汀的定量离子对的质荷比(m/z)分别为559.3→440.2、575.2→440.3、575.0→440.2、540.9→448.2和422.2→290.0。对分析方法进行全面的方法学考察后测定ATV及其代谢产物2-HAT、4-HAT、ATL的浓度,并采用WinNonlin 6.1的非房室模型计算ATV及其代谢产物的药代动力学参数。结果 方法学考察结果表明,空白血浆的内源性物质不干扰待测成分的测定,标准曲线线性关系良好,ATV、2-HAT、4-HAT和ATL的定量下限分别为0.5、0.5、0.25、0.063 nmol/L。精密度、准确度、回收率、基质效应和稳定性考察均符合生物分析要求。药代动力学分析表明,大鼠灌胃给药后,ATV迅速代谢,主要以ATV和2-HAT的形式暴露于血液循环,内酯型代谢物浓度最低。结论 建立了针对ATV及其活性和毒性代谢产物的准确、快速、灵敏的血药浓度分析方法,运用该方法可全面解析阿托伐他汀钙在大鼠体内的药代动力学特征。

红景天苷对脑缺血再灌注模型大鼠的治疗作用及其在脑组织中的动态含量研究

目的探究红景天苷在缺血再灌注大鼠脑组织及血浆中的分布规律,阐明并验证红景天苷可能的起效部位。方法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,分为红景天苷高、中、低剂量(10、5、2.5 mg·kg^(-1))药效实验组及红景天苷药代实验组(15 mg·kg^(-1))。药代组于缺血后15、40、120 min 3个时间点分别取血并灌注取脑,LC-MS检测脑组织及血浆中红景天苷的含量。药效实验各组于缺血24 h后取脑,氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测脑梗死面积;ELISA法检测血浆中组织因子(TF)的表达。体外观察红景天苷对氧糖剥夺(OGD)后人脑微血管内皮细胞(HCMEC)的保护作用,CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测细胞上清中一氧化氮(NO)的含量。结果与正常组比较,模型组大鼠出现明显的梗死灶(P<0.01),红景天苷高、中、低剂量组可明显减少缺血后的脑梗死面积(P<0.05,P<0.01),且各剂量的红景天苷可明显减轻氧糖剥夺造成的内皮损伤(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠组织因子明显升高(P<0.01);而与模型组比,红景天苷高、低剂量组组织因子表达明显降低(P<0.01)。造模后脑组织与血浆中红景天苷于15 min达到最高值,左、右脑组织中红景天苷含量无明显差异,各时间点脑/血比值均低于0.1。结论红景天苷在缺血性中风急性期脑组织中的分布有限,但红景天苷可能通过保护血液侧的内皮细胞而发挥脑保护作用。

扬州漆器存在困境和发展分析

我国漆器的历史积厚流光,在这基础上发展的扬州漆器更是其中的杰出代表,。经过几千年历史积累,扬州漆器其漆器工艺水平已经达到了极高的水平。但到了现代社会,扬州漆器的发展速度放缓,到了本世纪初其发展趋势甚至有停滞的趋势。其器型还是之前明清时期的款式,缺少新意,产销方式落后,人才储备凋零,未能与互联网时代有机结合,这是其步履艰辛的主要原因。

人血浆中阿托伐他汀和5个代谢产物LC-MS/MS分析方法的建立及在药代动力学研究中的应用

目的:建立液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定人血浆中阿托伐他汀及2个活性相关的羟基他汀酸代谢物和3个毒性相关的他汀内酯型代谢物的浓度,并应用于健康人药代动力学研究和患者血药浓度分析。方法:血浆样本酸化后通过蛋白沉淀法处理。液相色谱分离采用Zorbarx SB-C_(18)(50 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱,以含0.05%甲酸的甲醇-乙腈(1∶1)和水-甲醇-乙腈(9∶0.5∶0.5)为流动相,梯度洗脱,流速0.35 mL·min^(-1)。采用电喷雾电离源,正离子模式、多反应监测扫描;检测离子对m/z分别为阿托伐他汀559.3→440.2、邻羟基阿托伐他汀酸(2-HAT)和对羟基阿托伐他汀酸(4-HAT)575.1→440.3、阿托伐他汀内酯(ATL)540.9→448.2、邻羟基阿托伐他汀内酯(2-HATL)和对羟基阿托伐他汀内酯(4-HATL)557.2→448.2及内标匹伐他汀422.2→290.0。对分析方法进行全面验证后检测健康受试者及临床患者服用阿托伐他汀钙片后血浆样品,分析阿托伐他汀和5个代谢产物的药代代动力学特征。结果:阿托伐他汀及其代谢物浓度在0.1~25 nmol·L^(-1)范围内线性关系良好,日内、日间精密度的RSD及准确度的RE均<15%,各种条件下稳定性良好。健康受试者口服20 mg阿托伐他汀钙片后,阿托伐他汀、2-HAT、4-HAT、ATL、2-HATL和4-HATL的C_(max)均值分别为11.48、4.71、0.28、1.71、2.52和2.31 nmol·L^(-1);AUC_(0-∞)均值分别为87.31、58.79、8.60、28.75、45.76、31.49 nmol·h·L^(-1);t_(1/2)均值分别为7.96、7.93、19.58、8.76、8.98和21.37 h。患者服药12 h后阿托伐他汀、2-HAT、4-HAT、ATL、2-HATL和4-HATL的血药浓度分别为(4.16±1.31)nmol·L^(-1)、(2.65±1.33)nmol·L^(-1)、(1.15±1.16)nmol·L^(-1)、(2.96±1.83)nmol·L^(-1)、(4.27±2.00)nmol·L^(-1)和(3.70±1.74)nmol·L^(-1)。结论:本研究建立的人血浆中阿托伐他汀及5个代谢物同时定量检测方法准确、快捷、灵敏、稳定,可用于临床药代动力学研究和血药浓度监测。临床试验结果表明毒性相关内酯型代谢物具有较高暴露水平,需关注可能带来的副反应风险。

区块链对漆器文化产业推广的影响

自比特币的出现,区块链逐步进入人们的视野,这种去中心化、不可篡改、全程留痕、可以追溯、集体维护、公开透明的数据库一度成为新浪潮。本文讨论区块链对于漆器文化产业的影响,包括建立新型确权及流通机制,搭建创作者和顾客的桥梁,实现不同产业互联共生的生态,并对这一技术在未来文创产业经济所担任的角色进行探索,对其本身所具有的问题进行反思,实现理论层次创新。

大数据背景下的路径选择行为建模

路径选择建模的主要任务是基于合理假设,定量分析交通参与者的路径选择行为,并估计和预测交通参与者对交通网络的使用情况。基于此,全面总结路径选择建模的研究现状,介绍各种出行数据的特点,阐释常见的选择集生成方法,对文献中提出的众多离散选择模型进行归类和讨论,对比模型估计的2类主要方法,并展望机器学习在路径选择建模中的广阔前景。研究结果表明:随着交通感知技术的全息化发展,在海量车辆轨迹数据的支撑下,路径选择研究取得了全方位的进步;路径选择模型可分为基于路径和基于路段的模型,前者以路径为基本选项,从通过确定性或随机性方法生成的选择集中选择路径,包括多项Logit(MNL)模型以及更先进的MNL修正模型、广义极值(GEV)模型、混合Logit模型和非GEV分布模型,后者以路段为基本选项,动态地求解路径选择问题,无需生成选择集,包括各种递归Logit模型;路径选择模型的参数估计可使用有标签数据或无标签数据,前者通过地图匹配在交通网络中重构出真实路径,后者则依概率考虑一系列可能的路径。近年来,基于机器学习的路径选择模型因具有更优的预测性能而受到广泛关注。在未来的路径选择研究中,应进一步结合离散选择模型和机器学习模型,使两者优势互补。

大鼠原代肝细胞药物相互作用模型的建立

目的建立并考察适用于药物相互作用研究的体外大鼠原代肝细胞模型。方法用改良Seglen两步灌流法分离肝细胞,以高糖DMEM为基础培养基培养细胞。通过检测细胞上清液中白蛋白(ALB)和尿素氮(BUN)水平、用底物探针法检测大鼠原代肝细胞中5种细胞色素P450(rCYP450)和葡萄糖醛酸转移酶(rUGT)代谢活性,考察培养时长对肝细胞功能和代谢酶活性水平的影响。原代肝细胞与利福平(RIF)、奥美拉唑(OMP)、β-萘黄酮(BNF)、苯巴比妥钠(PB)和地塞米松(DMS)共培养60 h,通过底物探针法检测代谢物的变化,用实时荧光聚合酶链反应法检测各组细胞代谢酶mRNA的表达水平,筛选多种代谢酶的阳性诱导剂。结果改良后的分离方法可得到活率大于90%,能正常分泌ALB和BUN的原代肝细胞,培养至第9天仍可维持基本功能和正常形态。rCYP1A2、rCYP2B1和rCYP3A1随培养时长活性下降迅速,48和72 h下降至20.54%~23.15%和0~7.80%。rCYP2D2和rUGT酶活性下降较缓,48和72 h可维持在57.41%~76.77%和25.25%~35.24%。诱导剂筛选结果显示:人代谢酶hCYP1A2的诱导剂OMP不能诱导rCYP1A2;hCYP2C和hCYP3A4诱导剂RIF不能诱导rCYP2C11和rCYP3A1。不同代谢酶可被一种或多种诱导剂诱导,DMS显著诱导除rCYP2B1外的其他6种代谢酶。结论本实验建立的大鼠原代肝细胞模型适用于体外药物相互作用研究。人和大鼠对代谢酶诱导剂的反应存在种属差异,DMS可作为大鼠肝细胞多种代谢酶的通用阳性诱导剂用于体外药物代谢和相互作用研究。

自我监控能力与体育运动中动作技能学习关系研究综述

阐述自我监控能力和动作技能的概念,就自我监控能力与动作技能学习关系的国内外研究进行总结,并对自我监控能力在动作技能形成方面的研究提出展望。

自我监控能力与排球运动技能学习的关系研究

运用心理实验法将自我监控理论引入排球运动训练中,以探讨自我监控能力与排球运动技能学习的关系。实验结果表明,自我监控能力能有效促进运动技能的形成,同时对运动员自信力建立起着积极作用,建议在排球运动训练中引入自我监控理论,从而达到提高运动成绩的目的。