miR-103靶向钙调磷酸酶调节蛋白1对糖尿病肾病足细胞损伤的影响

目的探讨微小RNA-103(miR-103)在高糖诱导足细胞损伤中的作用及其可能的分子机制。方法本研究从2018年1月至2019年1月期间,体外培养人足细胞(HPC),以高糖刺激足细胞6、12、24 h,qRT-PCR与Western blotting分别检测高糖刺激下HPC细胞miR-103、钙调磷酸酶调节蛋白1(RCAN1)表达;采用ELISA检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;流式细胞仪检测细胞凋亡率。检测干扰miR-103的表达及RCAN1过表达后细胞凋亡率及IL-6、TNF-α水平变化;双荧光素酶报告基因检测验证miR-103与RCAN1的靶向调控关系。结果高糖诱导的足细胞中miR-103的表达量升高[(1.00±0.07)比(4.51±0.34)](P<0.05),而RCAN1表达水平降低[mRNA(1.00±0.08)比(0.59±0.06);蛋白(0.86±0.05)比(0.36±0.04)](P<0.05),足细胞凋亡率增加[(5.31±0.52)%比(24.36±1.58)%](P<0.05),IL-6、TNF-α水平升高[(7.23±0.33)ng/mL比(18.84±0.85)ng/mL;(0.34±0.03)ng/mL比(0.95±0.07)ng/mL](P<0.05);干扰miR-103的表达及RCAN1过表达后,足细胞凋亡率降低[(22.87±1.55)%比(14.72±0.82)%;(22.76±1.14)%比(13.88±0.85)%](P<0.05),IL-6[(18.54±0.62)ng/mL比(12.74±0.44)ng/mL;(19.74±0.61)ng/mL比(14.87±0.56)ng/mL]、TNF-α[(0.92±0.05)ng/mL比(0.54±0.06)ng/mL;(0.90±0.06)ng/mL比(0.56±0.04)ng/mL]水平降低(P<0.05);miR-103与RCAN1存在靶向关系,miR-103能够负向调控RCAN1的表达与活性;干扰RCAN1的表达部分逆转干扰miR-103的表达对高糖刺激足细胞的保护作用。结论干扰miR-103的表达可通过促进RCAN1的表达而减轻糖尿病肾病足细胞损伤。

miR-16-5p下调ACE对高糖作用的肾小管上皮细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨miR-16-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法培养人肾小管上皮细胞,分为对照组和高糖组,对照组用葡萄糖浓度为5.5 mmol/L的培养液培养,高糖组用葡萄糖浓度为25 mmol/L的培养液培养;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-16-5p组(转染miR-16-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-16-5p组(转染anti-miR-16-5p)、si-NC组(转染si-NC)、si-ACE组(转染si-ACE)、miR-16-5p+pcDNA3.1组(共转染miR-16-5p和pcDNA3.1)、miR-16-5p+pcDNA3.1-ACE组(共转染miR-16-5p和pcDNA3.1-ACE)、miR-NC+WT-ACE组(共转染miR-NC和WT-ACE)、miR-NC+MUT-ACE组(共转染miR-NC和MUT-ACE)、miR-16-5p+WT-ACE组(共转染miR-16-5p和WT-ACE)、miR-16-5p+MUT-ACE组(共转染miR-16-5p和MUT-ACE)均用脂质体法转染至肾小管上皮细胞中,si-NC组、si-ACE组、miR-NC组、miR-16-5p组、miR-16-5p+pcDNA3.1组、miR-16-5p+pcDNA3.1-ACE组转染后用25 mmol/L的葡萄糖培养液培养。运用qRT-PCR检测肾小管上皮细胞中miR-16-5p的表达水平;Western印迹法检测蛋白表达;MMT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果相较于对照组,高糖组细胞中miR-16-5p的表达水平显著下降;高糖抑制了HK-2细胞增殖,诱导HK-2细胞凋亡。miR-16-5p靶向调控ACE的表达;过表达miR-16-5p和抑制ACE均可抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡和促进细胞增殖。过表达ACE能逆转miR-16-5p对高糖诱导的HK-2细胞凋亡抑制和增殖促进作用。结论miR-16-5p可抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡,促进细胞增殖,保护高糖诱导的HK-2细胞损伤,其机制可能与ACE的表达有关,将可为高糖引起的肾小管相关疾病的预防和治疗提供新思路和新靶点。

胰岛素泵和多次胰岛素强化治疗初发2型糖尿病的临床对比

目的探讨对比胰岛素泵和多次胰岛素强化治疗初发2型糖尿病的临床效果。方法选择2015年1月—2017年5月期间采用胰岛素泵和多次胰岛素强化治疗初发2型糖尿病患者共200例,两组患者均给予糖尿病的相关健康教育、饮食干预、运动干预等措施,不赘述,两组患者治疗区别在于对照组采用的是多次胰岛素强化治疗,观察组采用的是胰岛素泵的治疗。治疗两组后对比两组降糖效果和不良反应。结果治疗2周后,两组的空腹血糖、餐后2 h血糖及糖化血红蛋白水平均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后组间比较,观察组空腹血糖、餐后2 h血糖及糖化血红蛋白水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),治疗2周后,观察组患者的总有效率为96%,显著高于对照组82%,差异有统计学意义(P<0.05),观察组患者出现低血糖反应1例,占1%,对照组患者出现低血糖情况16例,占16%,对照组显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组患者均未出现其他并发症。结论在治疗初发2型糖尿病方面,胰岛素泵和多次胰岛素强化的临床对比,胰岛素泵的降糖效果更佳,不良反应少。