颗粒蛋白前体调控胃癌细胞增殖与衰老的效应研究

背景与目的:颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)是一种新型生长因子,在细胞迁移、细胞周期进展及肿瘤形成过程中发挥着重要作用。PGRN在多种恶性肿瘤细胞中高表达,不仅参与肿瘤的生长过程,还与肿瘤的发生、演变过程关系密切。本研究旨在探讨PGRN在胃癌组织中的表达,及其对胃癌BGC823细胞增殖与衰老的影响。方法:利用免疫组化方法检测胃癌组织及癌旁组织中PGRN的表达;利用实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)干扰胃癌细胞株BGC823中PGRN的表达;通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法、细胞克隆形成和细胞衰老检测实验,探讨PGRN对BGC823细胞增殖与衰老的影响。结果:PGRN在胃癌组织中高表达。PGRN表达降低后,胃癌细胞的增殖与克隆形成能力均显著降低。PGRN-siRNA细胞的克隆形成率为(25.3±3.1)%,对照组细胞的克隆形成率为(72.1±5.7)%,正常组细胞的克隆形成率为(80.3±4.0)%。两两比较,对照组与正常组间差异无统计学意义(P>0.05),实验组与其他两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。干扰PGRN表达能够明显促进BGC823细胞衰老。PGRN-siRNA细胞衰老阳性率为(27.6±2.1)%,对照组细胞衰老阳性率为(3.2±1.3)%,正常组细胞衰老阳性率为(1.9±1.2)%。两两比较,对照组与正常组间差异无统计学意义(P>0.05),实验组与其他两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:PGRN可作为新的胃癌标志物,为临床胃癌的靶向治疗提供新的思路。

Raptor对胶质瘤细胞侵袭能力的影响

目的:研究Raptor对于胶质瘤细胞侵袭能力的影响。方法:采用RNA干扰技术,向胶质瘤U87细胞转染Raptor限定性siRNA干扰质粒,Western blotting检测转染后细胞Raptor的表达水平以鉴定转染效果。体外侵袭实验检测Raptor表达降低后,U87细胞侵袭能力的变化;Western blotting检测细胞中ARK5的磷酸化情况和MMP-2、MMP-9的表达水平。免疫组织化学法检测低级别及高级别胶质瘤中Raptor的表达水平。结果:转染Raptor siRNA质粒的U87细胞命名为siRaptor/U87,转染对照组质粒的细胞命名为Scr/U87,转染成功的实验组细胞Raptor的表达降低。体外侵袭实验中siRaptor/U87较对照组穿透基质膜的细胞数少(P<0.01)。Western blotting显示实验组细胞中磷酸化ARK5、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平均较对照组低。胶质瘤组织中Raptor的表达与恶化程度存在相关性(P<0.01)。结论:Raptor表达降低可能通过磷酸化ARK5及增加MMP-2、MMP-9的表达促进胶质瘤细胞的侵袭力。

潍坊医学院形态学实验室规范化管理的探索与实践

目前国内高等医学院校形态学实验室规模不尽相同,对实验室的建设和管理大多还处和在探索阶段,缺乏规范化的实验室管理模式。文中从潍坊医学院形态学实验室的制度建设、仪器设备管理、试剂耗材管理、实验技术队伍建设、实验教学准备工作等几个方面,探讨普通高等医学院校形态学实验室的规范化管理模式。

浅谈如何培养学术型病理学硕士研究生的科研能力

科研能力是学术型病理学硕士研究生的必备能力,也是判断研究生培养质量的重要标准之一。学术型病理学硕士研究生作为科学研究的主力军,已成为国家科技发展的重要后备力量,受到了国家及各高校的高度重视。要想提高学术型病理学硕士研究生的科研能力,培养严谨的科研精神,激发他们的创新活力,就必须针对目前培养过程中存在的问题进行分析,并构建一套行之有效问题解决方案,充分发掘研究生的科研潜力,提高研究生的素质,从而不断为国家培养高素质的科研人才。

肿瘤相关巨噬细胞通过EMT促进乳腺癌的浸润转移

探讨肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)是否通过上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)促进乳腺癌浸润转移。免疫组化检测80例乳腺浸润性导管癌中TAMs标记物CD68、E-cadherin和Vimentin的表达。结果显示,乳腺浸润性导管癌中CD68阳性表达率明显高于正常乳腺组织,CD68阳性表达与分化程度、淋巴结转移程度相关,与E-cadherin表达呈负相关,与Vimentin表达呈正相关。分离新鲜肿瘤组织中的TAMs,细胞免疫荧光鉴定TAMs分离成功;乳腺癌MCF-7细胞在TAMs条件培养基培养后:细胞形态学发生改变;Transwell侵袭实验表明,细胞侵袭转移力增强;Western blot结果显示,细胞中E-cadherin表达明显减少,Vimentin表达明显增多。由此可得出,TAMs与乳腺癌的浸润转移过程密切相关,TAMs可促进MCF-7细胞发生EMT进而促进乳腺癌的浸润转移。

哺乳期双酚A暴露子代小鼠睾丸结构及雌激素受体α的表达

目的研究哺乳期暴露双酚A(bisphenol A,BPA)对初断乳雄性仔鼠睾丸结构及雌激素受体α(ERα)表达的影响及可能机制。方法将18只健康清洁级妊娠ICR母鼠随机分为6组,分别为高(50 mg/kg)、中(5 mg/kg)、低(0.01 mg/kg)剂量BPA染毒组和阳性对照[0.1 mg/kg的雌激素(E2)]组、阴性对照(玉米油)组、空白对照(未经任何处理)组,每组3只母鼠。母鼠自分娩后第2天至第21天(断乳),灌胃染毒。观察第22天仔鼠睾丸形态学改变,并测定仔鼠睾丸中不同区域曲细精管直径;分别采用免疫组化法和Western blot法测定睾丸内ERα蛋白的表达水平。结果高、低剂量BPA染毒组及阳性对照组中睾丸部分节段横切面曲细精管多呈向心性区域性聚集;且高、低剂量BPA染毒组与阳性对照组聚集区域曲细精管直径大于阴性对照组(P<0.05)。与阴性对照组比较,各剂量BPA染毒组仔鼠睾丸内ERα蛋白的表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),且ERα的表达水平随着BPA染毒剂量的升高而增加。结论哺乳期接触一定剂量BPA可不同程度地改变子代小鼠睾丸曲细精管的排列方式及成熟度,降低睾丸组织内ERα蛋白的表达水平。