乳腺癌细胞敏感株与耐药株CD_(44)V_6的表达及意义

为探讨乳腺癌细胞耐药株侵袭转移能力增强及多药耐药与侵袭转移之间的关系 ,采用免疫细胞化学方法对乳腺癌细胞敏感株 MCF- 7及其耐药株 MCF- 7/ ADR中 CD4 4V6 的表达进行了检测。结果显示 ,与 MCF- 7细胞比较 ,MCF- 7/ ADR细胞的 CD4 4V6 的表达明显增强 ,后者侵袭转移能力明显高于前者。提示耐药株细胞MCF- 7/ ADR侵袭转移能力增强与其 CD4 4V6 表达增强密切相关 ,乳腺癌侵袭转移能力的提高和多药耐药现象同时并存。

小鼠胰岛的分离纯化及体外功能检测的实验研究

目的:探讨获得高质量小鼠胰岛的分离纯化方法,评价其功能。方法:采用胆总管内胶原酶灌注膨胀消化胰腺的方法分离小鼠胰岛,不连续密度梯度离心法纯化胰岛,用双硫腙(Dithizone,DTZ)对胰岛进行特异性染色计算胰岛产量及纯度,以葡萄糖和茶碱刺激胰岛素释放检测胰岛功能。结果:胰岛的产量和活性主要与胰腺均匀膨胀和胶原酶的消化时间有关。平均每个小鼠胰腺能得到150～250个高质量胰岛,活性>95%,纯度>90%。葡萄糖及茶碱(carbachol,Cch)刺激后胰岛素释放量明显增加。结论:改良的胆总管内胶原酶灌注膨胀消化小鼠胰腺及不连续密度梯度Ficoll-400纯化胰岛的方法,可获得产量较高、纯度及功能较好的胰岛。

乙醛脱氢酶1蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨肿瘤干细胞标志物乙醛脱氢酶1(aldehy dedehydrogenase 1,ALDH1)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学染色法检测92例乳腺癌患者肿瘤组织中ALDH1蛋白的表达,并结合临床病理特征进行相关性分析和无病生存期分析。结果:ALDH1蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达与孕激素受体(progesterone receptor,PR)和cerb-B2有关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤大小、临床分期以及是否有淋巴结转移无关(P>0.05)。ALDH1阳性患者2年无病生存率显著低于ALDH1阴性患者(P<0.05),接受CEF方案化疗和内分泌治疗的ALDH1阳性患者2年无病生存率显著低于ALDH1阴性患者(P<0.05)。结论:ALDH1蛋白表达阳性的乳腺癌患者其无病生存率降低与耐药有关,ALDH1可作为乳腺癌预后判断的指标。

乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶MDR1 mRNA表达及与临床指标的相关性分析

目的:通过对乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶的多药耐药基因1(multi-drug resistance gene 1,MDR1)mRNA表达差异及与临床指标相关性进行分析,探讨肿瘤多药耐药和侵袭转移之间可能存在的相关性。方法:应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)方法检测21例浸润性乳腺癌患者的原发灶和淋巴结转移灶MDR1 mRNA的表达。结果:MDR1 mRNA在淋巴结转移灶中的表达水平明显高于原发灶(P<0.05),并且在淋巴结转移灶和原发灶中的表达有相关性(r=0.795,P<0.05)。MDR1 mRNA表达与雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、CerbB2、肿瘤大小和淋巴结转移个数等临床指标无相关性(P>0.05)。结论:MDR1 mRNA表达可能与肿瘤的侵袭转移有关。

乳腺浸润性导管癌中P-gp和C-erbB-2的表达及临床意义

目的:探讨乳腺浸润性导管癌中P-gp和c-erbB-2的表达及其与腋淋巴结等临床病理特征的相关性,寻求治疗方案个体化的依据。方法:采用免疫组化方法检测46例乳腺浸润性导管癌患者乳腺原发灶及相应腋淋巴结转移灶中P-gp和c-erbB-2的表达,结合临床表现、病理学指标,分析其相关性。结果:46例原发灶P-gp阳性表达35例(76.1%),c-erbB-2高表达18例(39.1%),相应腋淋巴结转移灶P-gp阳性表达28例(60.9%),c-erbB-2高表达16例(34.8%);P-gp蛋白表达水平与肿块大小、淋巴结转移数目均呈正相关(P<0.05),c-erbB-2蛋白表达水平与腋窝淋巴结转移数量呈正相关,与ER、PR表达呈负相关,P-gp阳性表达与c-erbB-2的表达呈正相关(P<0.05)。结论:肿瘤原发灶与转移灶存在异质性,P-gp和c-erbB-2的表达与乳腺癌的多药耐药与侵袭转移有关,检测上述两种基因在原发灶与转移灶的表达,为乳腺癌选择个体化的化疗、内分泌治疗及分子靶向治疗提供了分子生物学依据。

他莫昔芬治疗乳腺癌的副作用

他莫昔芬(ｔａｍｏｘｉｆｅｎ,ＴＡＭ)为非甾体类抗雌激素药物。长期服用ＴＡＭ可使乳腺癌患者的生存期延长,乳腺癌复发减少,对侧乳腺癌的发生率降低。在多数大规模的临床试验中,参加者多能耐受ＴＡＭ的标准治疗剂量,但是有关ＴＡＭ在治疗乳腺癌过程对眼、肝脏、卵巢、骨?..

c-erbB-2基因在乳腺浸润性导管癌及腋窝转移淋巴结中的表达相关性分析

目的:探讨乳腺浸润性导管癌中c-erbB-2的表达及其与腋窝淋巴结等临床病理因素的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测149例乳腺浸润性导管癌患者乳腺原发灶及47例腋淋巴结转移灶中c-erbB-2的表达,结合临床病理因素,分析其相关性。结果:19.46%(29/149)原发灶c-erbB-2高表达,其表达水平与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移情况呈正相关,与ER、PR表达呈负相关。47例腋窝淋巴结转移乳腺浸润性导管癌患者中,原发灶c-erbB-2高表达18例(38.30%),腋窝淋巴结转移灶c-erbB-2高表达16例(34.04%),两者差异无统计学意义(P>0.05)。5例原发灶c-erbB-2阴性或低表达患者腋窝淋巴结转移呈高表达,7例原发灶c-erbB-2高表达患者淋巴结转移呈阴性或低表达,变化率为25.53%(12/47)。结论:c-erbB-2可以作为预测乳腺癌预后的指标,指导术后治疗,但应当考虑c-erbB-2在原发灶和复发转移灶之间的差异,有必要对复发转移灶进行c-erbB-2检测。

胰岛素瘤的MRI诊断

目的 研究磁共振成像对胰岛素瘤的诊断价值。方法 16例手术证实的胰岛素瘤患者于术前行MR检查 ,扫描序列包括快速自旋回波序列T1W、T2 W及脂肪抑制T1W、T2 W。结果 16例均能准确检出 ,10例呈长T1低信号 ,13例显示不同程度的长T2 高信号 ,T1及T2 抑脂图像肿瘤同胰腺的信号对比增强 ,显示更为清晰。结论 应用MR快速成像技术和脂肪抑制序列 ,能够对胰岛素瘤进行较精确的定位诊断。

PI3K/AKT通路参与调控乳腺癌多药耐药和侵袭转移的研究

目的:探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol 3 kinase/serine-threonine kinase,PI3K/AKT)信号通路与乳腺癌多药耐药和侵袭转移的相关性。方法:以乳腺癌细胞系MCF-7为母本,持续低浓度加药诱导建立阿霉素(Adriamycin,ADR)耐药系MCF-7/ADR'。细胞免疫荧光检测两细胞系中磷酸化AKT(phosphorylated AKT,P-AKT)、P-糖蛋白(P-Glycoprotein,P-gp)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达。PI3K抑制剂LY294002作用两系前后,Western Blot检测P-AKT、MMP-2、P-gp的表达改变及qRT-PCR检测MMP-2、MDR1的表达改变。结果:P-AKT、P-gp(MDR1)、MMP-2在MCF-7中为低表达或不表达,MCF-7/ADR'中为高表达。LY294002作用两系后,P-AKT、P-gp(MDR1)、MMP-2在MCF-7/ADR'中的表达明显减低(P<0.05),MCF-7无明显改变。结论:抑制PI3K/AKT信号通路可有效降低MCF-7/ADR'耐药和侵袭转移能力,PI3K/AKT通路是调控乳腺癌多药耐药和侵袭转移的重要信号通路之一。

长程多柔比星化疗富集乳腺肿瘤干细胞

目的:探讨长程多柔比星(adriamycin,ADR)作用乳腺癌细胞株MCF-7对富集肿瘤干细胞的可能性。方法:采用长程ADR诱导的方法建立ADR耐药细胞株MCF-7/ADR’。ALDEFLUOR法检测亲本MCF-7细胞及ADR耐药细胞MCF-7/ADR’中乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)阳性的肿瘤干细胞亚群的比例,然后采用无血清悬浮培养和裸鼠成瘤实验分别检测两者在体外形成干细胞微球体和体内成瘤能力的差异。结果:MCF-7和MCF-7/ADR’细胞中ALDH1+肿瘤干细胞亚群的比例分别为(0.82±0.77)%和(8.21±2.38)%,两者差异有统计学意义(P<0.05);两者经无血清悬浮培养形成干细胞微球体的比例分别为(2.17±0.70)%和(7.87±1.39)%,差异有统计学意义(P<0.05)。MCF-7/ADR’细胞在裸鼠体内的成瘤能力明显强于MCF-7细胞。结论:长程ADR作用MCF-7后可富集肿瘤干细胞。

肿瘤多药耐药和侵袭转移关系的研究

肿瘤的侵袭转移和多药耐药是肿瘤治疗的两大难点,过去对两者的研究都是独立进行的。近年来的研究发现多药耐药和侵袭转移之间可能存在某种关联,化疗是否会促进肿瘤的侵袭转移以及多药耐药和侵袭转移之间是否密切相关均需要进一步的研究。探讨两者可能存在的临床相关性及深入了解两者之间的内在关系无疑对肿瘤治疗具有重要的指导意义。

雷尼替丁对胃癌根治术后病人的代谢调理作用

目的 本研究以胃癌根治术后病人为对象，在限制非蛋白热卡和氮源的条件下，观察雷尼替丁对术后应激反应和蛋白质代谢的影响。 方法 将３０ 例因胃癌行根治术的病人，随机分为雷尼替丁组（ｎ＝１５）和对照组（ｎ＝１５） 两组，雷尼替丁组给予雷尼替丁１００ ｍｇｉｍ ｑ１２ｈ；对照组不使用雷尼替丁或西咪替丁等类似药物。两组病人均于术后第１ 日晨开始自周围静脉给予低热卡静脉营养支持３ 天（ 非蛋白热卡：７５－６ ｋＪ·ｋｇ－１·ｄ－１；氮量：０－０８ ｇ·ｋｇ－ １·ｄ－ １） ，并监测体温、肝功能、白／球蛋白、血糖、皮质醇、尿儿茶酚胺及香草基苦杏仁酸的水平和氮平衡变化。 结果 两组相比，雷尼替丁组每日负氮平衡现象均明显改善，其中术后第１ 天与术后第３ 天有显著性差异，术后３ 天的累积氮平衡差别显著（ －２２±１０ ｖｓ． －３７±１６ ｇ，Ｐ＜ ０－０５） ；连续应用雷尼替丁３ 天，血皮质醇浓度显著降低（１７ ±５ ｖｓ．２４±９ μｇ／Ｌ，Ｐ＜０－０５）；两组病人体温、肝功能、白／球蛋白、血糖、尿儿茶酚胺及香草基苦杏仁酸变化无明显差异。 结论 在低热卡静脉营养支持下，雷尼替丁对因胃癌行根治术病人术后可改善负氮平衡现象；连续应用３

iPLA2在人胰岛β细胞的表达和对胰岛素分泌功能的影响

目的探讨Ca^2＋-非依赖性磷酸脂酶A2（iPLA2）在人胰岛的表达及在胰岛素分泌功能中的作用。方法正常人胰腺组织切片免疫组织化学染色及人胰岛Western印迹方法检测，观察iPLA2在人胰岛中的表达情况；随机分组对照研究iPLA2选择性抑制剂溴烯醇内酯（BEL）对离体人胰岛的葡萄糖刺激引起胰岛素分泌反应的影响。结果在人胰岛iPLA2高表达，与抗胰岛素染色分布一致，而外分泌腺很少表达；与对照组相比，BEL处理组胰岛素分泌反应明显减弱[（0．8285±0．0803）ng·胰岛^-1·h^-1，P〈0．01]，BEL通过抑制iPLA2活性抑制了葡萄糖刺激引起的离体人胰岛胰岛素分泌。结论iPLA2在人胰岛β细胞高表达并在葡萄糖刺激胰岛β细胞胰岛素分泌过程起到重要的作用。

乳腺肿瘤干细胞分选的相关研究

“肿瘤干细胞”学说的提出为肿瘤包括乳腺肿瘤在内的治疗提供了新的思路。乳腺肿瘤干细胞正确的分选纯化是研究的关键，其分选主要历经侧群细胞分选、无血清悬浮培养、细胞表面分子标记分选、ALDEFLUOR试剂盒检测乙醛脱氢酶1高活性分选法4个阶段；由于化疗会富集肿瘤干细胞，部分学者把化疗耐药也作为一种分选的方法。目前有关乳腺肿瘤干细胞分选结果的争论主要集中在标志物CD44＋CD24-、ALDH1＋之间。哪种分选方法或标志物的选择更适宜分选乳腺肿瘤干细胞成为亟待解决的问题。

非手术与手术治疗肝硬化并脾功能亢进患者肝功能损害的对比观察

目的对比观察非手术与手术治疗肝硬化并脾功能亢进患者肝功能损害的临床疗效和安全性。方法将58例肝硬化并脾功能亢进患者分为非手术组（34例）和手术组（24例）。并对两组患者治疗前后临床表现、肝功能[丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）]和不良反应进行比较，探讨非手术与手术治疗肝硬化脾功能亢进患者肝功能损害的疗效和安全性。结果两组治疗后1周和2周时，ALT和AST均显著降低（P〈0．01，P〈0．05）；与非手术组比较，手术组治疗后1周和2周时，ALT、AST降低显著优于非手术组（P〈0．01，P〈0．05）。两种治疗方法均能改善患者的临床症状，缓解并发症，且手术治疗较非手术治疗不良反应少。结论手术和非手术治疗均能显著改善肝硬化并脾功能亢进患者肝功能损害，且手术治疗改善肝功能疗效显著，不良反应较少，安全性较好。

iPLA2β在胰岛β细胞中的表达和作用

钙离子非依赖性磷脂酶A2β（iPLA2β）能够催化磷脂sn-2酯酰键水解，释放出游离不饱和脂肪酸和溶血磷脂，在生命活动中发挥重要作用。iPLA2β的基本结构中包含锚蛋白重复序列、丝氨酸酯酶共有序列和钙调蛋白结合位点等，其活性受钙调蛋白、蛋白激酶C和ATP等多种因素调节。近年来研究发现，该酶在胰岛β细胞表达水平较高，并参与葡萄糖刺激的胰岛素分泌的调节，其活化、水解膜磷脂释放花生四烯酸（AA），AA作为信号分子引起钙内流和胰岛素分泌。iPLA2β在β细胞的增殖和凋亡中发挥重要的调节作用，其表达和活性异常导致细胞周期G1期阻滞和细胞凋亡，提示iPLA2β可能与糖尿病的发生、发展密切相关，通过对该酶深入的研究能够为糖尿病的基因治疗和改良胰岛移植治疗提供新的途径。

P-糖蛋白与CD44在肿瘤中表达的相关性

P-糖蛋白（P—gp）是最重要的肿瘤多药耐药蛋白之一；CD44分子异常表达与肿瘤的侵袭和转移密切相关。近年来的研究发现，P-gp和CD44分子在肿瘤中的表达具有某种相关性，即肿瘤多药耐药与侵袭转移之间可能存在着某种关联。探讨两者可能存在的相关性及深入了解两者之间的内在联系，对肿瘤治疗具有重要的指导意义。