虾加工副产物抗菌型水解液制备条件优化及抑菌作用

目的:为了探究水产品加工副产物用于抗菌型水解液制备,并研究其抑菌作用,本文以南美白对虾优势腐败菌(Specific spoilage organisms of Penaeus vannamei,PV-SSOs)为实验用菌,采用虾加工副产物制备抗菌型水解液(Antibacterial hydrolysate from shrimp processing by-products,SPPH),考察对PV-SSOs的抑菌作用。方法:以中华管鞭虾加工副产物为原料,分别采用5种蛋白酶水解,测定水解液对PV-SSOs的抑菌作用。以抑菌效果最强酶为实验用酶,研究加酶量、酶解时间、酶解温度和料液比对PV-SSOs的抑菌效果影响,然后采用响应面法优化SPPH酶解条件,高效液相色谱法分析SPPH中肽段分子量分布,采用膜渗漏法测定SPPH对PV-SSOs的细胞膜渗透性影响,进一步通过扫描电子显微镜观察SPPH作用后PV-SSOs菌体微观结构变化。结果:选用胃蛋白酶为水解用酶,在酶解反应pH2.0和料液比(1:2,w/v)条件下,经响应面Box-Behnke三因素三水平试验确定抑制PV-SSOs的SPPH最佳制备条件为:胃蛋白酶添加量700 U/g,酶解2.3 h,酶解温度33℃。经测定SPPH对PV-SSOs的抑菌直径达到24.10±0.43 mm。SPPH中分子量小于3000 Da肽组分的相对百分含量接近70%。PV-SSOs经SPPH作用2~12 h菌体细胞膜渗透性均显著高于菌对照组(P<0.05),扫描电镜下PV-SSOs经SPPH处理12 h可见部分菌体发生扭曲、皱缩,细胞膜表面形成凹陷、孔洞及内容物渗出。结论:中华管鞭虾加工副产物可用于制备抗菌型水解液,SPPH通过膜损伤方式抑制PV-SSOs,本研究为SPPH进一步用于南美白对虾保鲜研究提供了理论依据。

超声改性甲壳素吸附水产品加工副产物中脂溶性维生素的作用效果研究

目的探讨超声改性甲壳素(ultrasonic modified chitin,UM-C-chitin)对水产品加工副产物中脂溶性维生素的吸附效果。方法商品甲壳素(commercial chitin,C-chitin)经超声法改性,采用扫描电镜观察甲壳素改性前后微观形貌,傅里叶变换红外光谱和X射线衍射分析甲壳素改性前后的官能团和衍射峰变化,检测UM-C-chitin对水产品加工副产物中脂溶性维生素(维生素A、维生素D和维生素E)静态吸附效果。结果C-chitin经超声处理后微观结构由致密向疏松转变,并伴有无规则孔道及小孔形成,UM-C-chitin的酰胺I基团含有与α-型甲壳素相关的1665cm^(-1)特征峰,但是1624cm^(-1)处特征峰强度减弱接近消失,X射线衍射分析中UM-C-chitin在9.18°、12.68°、19.12°、23.04°和26.16°处有α-型甲壳素特征衍射峰,但各衍射峰强度较C-chitin的出现不同程度降低。与C-chitin相比较,UM-C-chitin对水产品加工副产物中维生素E的吸附效果较好(P<0.05),吸附量达到6.10μg/mg,较C-chitin的提高了84.8%。结论超声改性会降低C-chitin的结晶度,形成的无规则孔道及小孔结构有助于提高维生素E的负载量。本研究为快速富集水产品加工副产物中脂溶性维生素,特别是维生素E提供了技术依据。

基于黄鲫蛋白肽制备南美白对虾多酚氧化酶复合生物抑制剂的研究

目的 以黄鲫蛋白肽(half-fin anchovy hydrolysate peptides,HAHp)为基料复配抗坏血酸和茶多酚制备南美白对虾多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)复合生物抑制剂(composite biological inhibitor, CBI)。方法 以南美白对虾PPO抑制率为检测指标,分别研究HAHp、抗坏血酸、茶多酚、柠檬酸和乙二胺四乙酸二钠盐(ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt, EDTA-2Na)单独抑制PPO活性,选取HAHp、抗坏血酸和茶多酚进行三因素三水平正交优化实验优化CBI配方组成,通过酶促动力学研究CBI对南美白对虾PPO的抑制模式。结果 HAHp、抗坏血酸、茶多酚、柠檬酸和EDTA-2Na对南美白对虾PPO都有一定的抑制作用,且有一定的剂量依赖性,但单一抑制剂对PPO的抑制作用有限。HAHp与天然抗氧化剂抗坏血酸和茶多酚复配,经(L933)正交实验优化CBI的最佳配方为:0.7%HAHp、0.02%抗坏血酸和0.20%茶多酚。经测定CBI对南美白对虾PPO抑制率达到94.71%±0.46%,酶促动力学结果表明CBI是一种混合型抑制剂,通过降低南美白对虾PPO对底物亲和力实现抑制PPO活力。结论 以HAHp为基料复配抗坏血酸和茶多酚制备的CBI能够有效地抑制南美白对虾PPO活性,有望开发成一种防虾黑变的天然抑制剂,为南美白对虾天然保鲜剂的研究奠定了理论基础。

糖基化改性对鲣鱼加工副产物活性肽抗氧化能力的影响

目的探究糖基化改性对鲣鱼加工副产物活性肽抗氧化能力的影响。方法通过胰酶酶解鲣鱼加工副产物,利用转谷氨酰胺酶(transglutaminase,TGase)和D-氨基葡萄糖(D-glucosaminase,D-GlcN)酶法糖基化修饰酶解物;采用单因素实验和响应面法优化反应条件;使用羟自由基测定试剂盒等对修饰产物进行4个指标的抗氧活性评价。结果酶法糖基化修饰的最优条件为:粗蛋白质量浓度为40 mg/mL、氨基糖与粗蛋白浓度比为1:1、TGase添加量为108U/g、反应pH7.5、反应温度50℃、反应时间5h。此条件下得到的修饰产物具有很强的抗氧化能力:清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的半抑制质量浓度(median inhibitory concentration,IC_(50))值为10.02 mg/mL,清除羟自由基的IC_(50)值为2.94 mg/mL;当质量浓度为10mg/mL时,修饰产物的总抗氧化能力值为0.784奎诺二甲基丙烯酸酯当量抗氧化能力(trolox equivalent antioxidant capacity,TEAC),铁离子还原能力值为1.970 OD_(700)(700 nm下测定的吸光度)。结论鲣鱼胰酶酶解物经过TGase和D-GlcN糖基化修饰后,相比修饰前,具有更强的抗氧化活性,相比常规美拉德反应,反应温度温和,不产生有害副产物,具备作为功能食品原料的潜力。

荔枝皮色素体外清除亚硝酸盐作用研究

采用分光光度法,测定荔枝皮色素体外清除亚硝酸盐能力,并与茶叶提取液和VC对亚硝酸盐的体外清除作用进行比较。结果表明,荔枝皮色素同亚硝酸盐反应10min,对亚硝酸盐的清除基本完全,亚硝酸盐的清除率随荔枝皮色素添加量的增加先增大而后趋于稳定。加热处理、反应体系酸性pH值能有效增强荔枝皮色素对亚硝酸盐的清除效果。100℃加热10min条件下,1mg/mL和10mg/mL的VC对亚硝酸盐清除率均最高,荔枝皮色素在低质量浓度(1mg/mL)时对亚硝酸盐清除率为(42.76±0.98)%,高于同质量浓度的茶叶提取液对亚硝酸盐的清除率((37.92±0.79)%)(P<0.05),但在高质量浓度(10mg/mL)下对亚硝酸盐的清除率则低于同质量浓度的茶叶提取液(P<0.05)。体外模拟胃酸和体温条件下,荔枝皮色素保持较高的亚硝酸盐清除效果,1mg/mL和10mg/mL时的清除率分别为(23.55±0.45)%和(51.62±0.91)%。

黄鲫胃蛋白酶酶解液体外抗氧化、抑菌作用研究

采用胃蛋白酶水解黄鲫,测定酶解液的蛋白提取率、可溶性肽含量、水解度及氨基酸组成,并对酶解液体外抗氧化和抑菌作用进行研究。结果表明:黄鲫胃蛋白酶酶解液的蛋白提取率、可溶性肽提取率、水解度分别为(110.28±4.81)%、(81.78±0.04)%和(18.12±0.39)%,黄鲫胃蛋白酶酶解液的人体必需氨基酸相对含量可达37.91%。黄鲫胃蛋白酶酶解液具有很强的抗氧化能力,清除羟自由基和DPPH自由基的ED50分别为4.55μg/mL和4.46μg/mL,还原力随着黄鲫胃蛋白酶酶解液质量浓度的增加而增大,在3.4μg/mL和13.6μg/mL低、中质量浓度时螯合金属离子能力与EDTA接近。体外抑菌实验显示:黄鲫胃蛋白酶酶解液具有广谱抑菌性,对大肠杆菌的抑菌效力分别与13.21～15.44mcg/mL的氨苄青霉素和325.00～340.00U/mL的硫酸链霉素相当(P>0.05)。

鱿鱼墨黑色素酶解法提取工艺优化及其紫外、红外光谱特征分析

以鱿鱼墨水解度为指标,分别测定木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶对鱿鱼墨水解效果,选用水解能力最强的胃蛋白酶为试验用酶,测定酶解反应pH值、反应时间、反应温度和加酶量对鱿鱼墨水解度的影响。在单因素试验基础上进行L9(34)正交试验优化得到胃蛋白酶水解鱿鱼墨的最佳酶解条件为酶解反应pH1.5、酶解温度37℃、酶解反应时间5h、加酶量1.5%。在最优酶解反应条件下,胃蛋白酶水解鱿鱼墨的水解度大于13.50%。紫外-可见光谱分析显示酶解法制备的鱿鱼墨黑色素在220nm处有特征吸收波长,红外光谱中的3384.54cm-1和1617.35cm-1处出现吲哚环结构归属的强吸收峰。

黄鲫(Setipinna taty)蛋白酶解液的抑菌活性及稳定性研究

以黄鲫为原料测定其氨基酸组成,比较风味蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解黄鲫蛋白所得酶解液对大肠杆菌的抑菌作用,并对抑菌效果最强的蛋白酶酶解液进行抑菌稳定性研究。结果表明:黄鲫蛋白必需氨基酸含量丰富,其中胃蛋白酶的水解液对大肠杆菌抑菌作用强,相对分子质量主要分布在3000～1000;黄鲫胃蛋白酶酶解液对热稳定,酸性低pH值可增强其抑菌效果,可耐受胰蛋白酶和β-内酰胺酶处理,该酶解液有作为天然抗菌剂应用的前景。

海产小杂鱼抗氧化肽制备工艺

以海产小杂鱼为原料,分别测定风味蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶酶切小杂鱼所得酶解液的羟自由基清除率,结果表明中性蛋白酶的酶解液羟自由基清除率最高,并且氨基态氮含量较高。以中性蛋白酶为试验用酶,通过正交试验L9(34)得到制备小杂鱼抗氧化肽最佳酶解条件为反应pH7.0、料液比1:2、加酶量500U/g、反应温度42℃,所得的酶解液对羟自由基清除率高达95%以上。Sephadex G75凝胶分离结果显示海产小杂鱼抗氧化肽混合物主要由分子质量低于3000D的肽类组成。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留酶片快速检测法的评价

本试验以黄瓜、小白菜为主要试材,利用有机磷、氨基甲酸酯类农药能够抑制乙酰胆碱酯酶活性的毒理机制,研制了一种简易快速,可定性及半定量测定蔬菜中常用的有机磷、氨基甲酸酯类农药残留的酶片快速检测法。当环境温度在10℃～40℃蔬菜中叶菜类、果菜类及根菜类均可以用此法来检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留污染程度。此法准确度较高,敌敌畏、辛硫磷、甲基对硫磷最低检测限为0.5 mg/kg、甲胺磷为0.01 mg/kg、呋喃丹为0.84 mg/kg、万灵为0.89 mg/kg。

微波杀菌保鲜面包的技术研究

面包是当今社会人们所衷爱的方便食品之一,但其在室温下保鲜期通常只有3-4d。本实验以当天焙烤的新鲜面包片为原料,经适当的微波杀菌处理后分别置于室温、冷藏(0-4℃)条件下保藏,确定适宜的保鲜期。实验结果表明,微波杀菌面包在室温下保鲜期为12d,冷藏条件下保鲜期为20d;而未经微波杀菌处理的面包在冷藏条件下保鲜期只有12d,说明适宜的微波杀菌处理有利于延长面包的保鲜期。

食物源蛋白酶解制备抗菌肽研究进展

抗菌肽广泛分布于细菌、病毒和各种动植物体内,是生物天然免疫防御系统的重要组成部分。在耐药菌株不断产生的今天,抗菌肽的研究吸引着国内外学者目光。本文综述了乳源蛋白和非乳源蛋白酶解制备抗菌肽、酶解作用提高抗菌蛋白的抗菌性、酶及酶解条件的选择、抗菌产物目的性修饰提高抗菌性的研究,并展望了食物源蛋白酶解制备抗菌肽的未来研究方向。

酶解法制备的鱿鱼墨黑色素鉴定及理化性质

测定酶解法制备的鱿鱼墨黑色素紫外、红外吸收光谱特征,并研究其溶解性、酸碱稳定性、光稳定性、热稳定性理化性质。结果表明:酶解法制备的鱿鱼墨黑色素在紫外区220 nm有特征吸收,红外光谱最强峰在1 617.36 cm-1处,有典型的黑色素红外吸收特点。鱿鱼黑色素具有碱溶酸沉溶解特性,在pH大于9.0条件下色残率高。在自然光下稳定性高,自然光照120 min的色残率为对照的96%以上(P>0.05),而紫外光照30 min后色残率降至52.1%。低温下加热稳定性高,65℃加热30 min时色残率为对照的95.4%。

薄层扫描法测定复方苦参注射液中苦参碱的含量

目的 :用薄层扫描法对复方苦参注射液中苦参碱进行了含量测定。方法 :以甲苯 -丙酮 -乙醇 -氨水 ( 10∶10∶1∶0 .1)为展开剂 ,在CS - 90 0 0飞点薄层扫描仪上以反射式锯齿扫描方式进行测定 ,λ =5 15nm。结果 :样品含量在 2 .16～ 7.5 6μg范围内呈良好线性关系 ,r =0 .9992 (n =6) ,平均回收率 99.0 % ,RSD =0 .61%。结论 :本法简便、快速、精确 ,重现性好 ,可作为复方苦参注射液的质量控制标准。

不同精制方法对鱿鱼(Ommastrephes bartrami)墨黑色素的微观形态、光谱特征及金属元素的影响

采用扫描电镜、光谱分析和元素分析法,进行了胃蛋白酶水解法、高速离心法和酸水解法精制的鱿鱼墨黑色素颗粒形态、紫外可见光谱、红外光谱及金属元素含量的研究。结果表明,酸水解法破坏了鱿鱼墨黑色素的颗粒结构;三种不同精制方法所得的鱿鱼墨黑色素在220nm附近均有强吸收。胃蛋白酶水解和酸水解法有效切除黑色素的氨基基团,但酸水解法下鱿鱼墨黑色素吲哚类化合物的特征峰由1399.64cm-1移至1307.88cm-1;高速离心法精制的黑色素则在2925.02cm-1和2854.09cm-1有新吸收峰。不同精制方法对鱿鱼墨黑色素自身的不同金属元素含量具有降低和富集效应。

酶解法制备鱿鱼蛋白抗氧化肽工艺优化

以酶解液的还原力为抗氧化性指标,测定木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶7种蛋白酶的鱿鱼蛋白酶解液抗氧化性。实验结果表明7种蛋白酶在相同加入酶量(酶活力U/底物g)条件下,中性蛋白酶在酶解1 h、3 h、5 h所得的酶解液还原力均最高。以中性蛋白酶为实验用酶,进行三因素二次正交旋转组合实验优化出酶解法制备鱿鱼蛋白抗氧化肽的最佳酶解条件为酶加入量4 841 U/g、pH 5.3、酶解时间1.3 h。所得酶解液定性检测结果为具有抗氧化性的肽类混合物,有进一步开发应用价值。

微波法浸提桔皮类黄酮及其对NO_2^-清除作用的研究

70%体积分数的乙醇为提取剂,经过L(934)正交实验,确定微波强化浸提桔皮类黄酮的最佳条件为:桔皮粉碎后过60目筛,料液比1∶15,微波浸提强度中高火,加热浸提20s。体外模拟胃液的条件下,测定类黄酮提取液清除NO2-能力,实验结果表明桔皮类黄酮提取液对NO2-有很强的清除作用。

设计性实验在“食品工程原理”中的实施与探讨

设计性实验能够有效地提高学生的学习兴趣。概述了设计性实验在食品工程原理课程中实施情况,并探讨了下一步的改革方法,为食品专业培养实践型人才奠定基础。

柑桔皮提取液的抗氧化作用研究

采用微波强化浸提法提取桔皮中的活性物质,测定提取液对羟自由基、超氧阴离子和过氧化氢的清除效果。实验结果表明:桔皮提取液对活性氧具有很高的清除作用,0.5mL桔皮提取液对羟自由基的清除率达到100%,对超氧阴离子的清除率达到98%以上,稀释100倍的桔皮提取液0.7mL对过氧化氢的清除率仍可达25%左右。在保藏猪油的抗氧化应用实验中,0.5%添加量的桔皮提取液的抗氧化效果与相同添加量的VC的抗氧化效果相当。