齐墩果酸对衰老大鼠睾丸间质细胞胰岛素/IGF1通路关键基因表达的影响

为了探讨齐墩果酸对衰老大鼠睾丸间质细胞的作用,采用MTT法确定齐墩果酸最适药物浓度,氧化应激创建大鼠睾丸间质细胞衰老模型,RT-qPCR、免疫荧光和免疫印迹检测胰岛素/胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)信号通路关键基因转录情况和蛋白翻译情况,采用INSR抑制剂处理细胞,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果显示:与正常组相比,INSR、IRS1、IRS2、IGF1的mRNA转录水平和蛋白翻译水平显著下降(P<0.05);IGFBP3的mRNA转录水平显著提高(P<0.05),免疫荧光和免疫印迹均未检测到此基因表达;与衰老组相比,齐墩果酸组明显逆转此现象(P<0.05);齐墩果酸能明显抑制衰老组细胞的凋亡(P<0.05),INSR抑制剂处理后,细胞凋亡率明显高于齐墩果酸组(P<0.05).综上可知,齐墩果酸通过调控胰岛素/IGF1信号通路关键基因的转录和翻译延缓Leydig细胞衰老.

二苯乙烯苷延缓大鼠睾丸间质细胞衰老的胰岛素/IGF-1信号通路作用机制探讨

为探讨二苯乙烯苷(何首乌的有效化合物)延缓大鼠睾丸间质(Leydig)细胞衰老的胰岛素/IGF-1信号通路调控机制,本研究采用自由基损伤的法建立大鼠睾丸Leydig细胞衰老模型,流式细胞术检测各组细胞周期变化;应用RT-qPCR、免疫荧光和Western blotting检测睾丸Leydig细胞胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因的表达水平。