坏死性凋亡在肝炎以及其他肝病发病中的作用研究进展

传统意义上,人们将细胞死亡分为凋亡和坏死两类,而越来越多的研究结果表明坏死性凋亡是一种不同于坏死或凋亡的细胞死亡途径,并在多种疾病发病中发挥着重要作用。坏死性凋亡是调节坏死的一种形式,可以被死亡受体的配体激活,或者在无凋亡状态下被能够诱导死亡受体表达的刺激激活。死亡受体配体对坏死性凋亡激活需要RIP1激酶活性,其进一步介导RIP3和MLKL的激活。RIP3和MLKL是坏死性凋亡下游重要的调节子。RIP1激酶是坏死性凋亡通路中的关键药物靶点,通过坏死抑制素阻断RIP1活性,可以抑制坏死性凋亡的激活,并且在死亡受体配体存在的情况下使得细胞生存和增殖。本文将对坏死性凋亡与凋亡和坏死的区别、坏死性凋亡产生机制及其在肝炎以及其他肝病发病中的作用作一介绍,以期对肝病治疗药物新靶点的发现提供新思路。

山奈酚干预对D-氨基半乳糖/脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭的保护作用

目的探讨山奈酚对D-氨基半乳糖(D-Ga IN)/脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝衰竭(acute hepatic failure,AHF)的干预作用。方法 37只C57 BL/6小鼠按完全随机分组法分为正常对照组(10只)、AHF模型组(13只)、山奈酚干预组(14只)。AHF模型组小鼠腹腔注射D-Ga IN(700 mg/kg)/LPS(10μg/kg),作用6 h,建立AHF模型;山奈酚干预组小鼠于建模前2 h尾静脉注射5 mg/kg的山奈酚,后腹腔注射D-Ga IN(700 mg/kg)/LPS(10μg/kg),作用6 h,建立AHF模型。正常对照组腹腔注射等量生理盐水。检测血清ALT、AST水平,观察肝脏组织病理学变化,检测肝脏组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达,检测NF-κB通路相关分子表达及肝细胞凋亡情况。结果与AHF模型组比较,山奈酚干预组小鼠的生存率提高(P<0.05)。与正常对照组比较,AHF模型组血清ALT和AST水平升高(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达升高(P<0.05),肝脏组织中NF-κB信号通路相关分子IκB-α表达降低(P<0.05),p-NF-κBp65表达升高(P<0.05),肝脏病理损伤严重,细胞凋亡增多;与AHF模型组比较,山奈酚干预组血清ALT和AST水平降低(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达降低(P<0.05),肝脏组织中NF-κB信号通路相关分子IκB-α升高(P<0.05),p-NF-κBp65表达降低(P<0.05),肝脏病理损伤减轻,细胞凋亡减少。结论山奈酚干预通过抑制炎症反应对D-Ga IN糖/LPS诱导的小鼠AHF发挥保护作用。

肝再生增强因子通过增加自噬水平促进CCl4诱导的急性肝损伤中HL-7702细胞的增殖

目的研究肝再生增强因子（ALR）保护急性肝损伤的作用及其机制。方法HL-7702细胞分为正常对照组、CCl4急性肝损伤组、ALR＋CCl4干预组、3-甲基腺嘌呤（3-MA）＋CCl4干预组以及ALR＋3-MA＋CCl4干预组，CCl4处理前8h对ALR＋CCl4和ALR＋3-MA＋CCl4干预组转染ALR质粒，对除正常对照组外其余四组给予CCl4处理，30min后对3-MA＋CCl4和ALR＋3-MA＋CCl4干预组给予3-MA处理，CCl4处理24h后收集细胞。收集HL-7702细胞和培养上清液，检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平；Westernblot检测细胞中ALR、细胞周期蛋白D、细胞周期蛋白E、增殖细胞核抗原（PCNA）、自噬相关基因7（Atg7）和自噬基因LC3、p62、Beclin-1水平；实时定量PCR检测ALRmRNA水平。多组样本均数的两两比较采用One-wayANOVA分析。结果ALR＋CCl4干预组与急性肝损伤组相比，ALR蛋白以及mRNA表达水平显著升高（P值均〈0．05）；CCl4急性肝损伤组与正常对照组相比，ALR蛋白以及mRNA表达水平同样显著升高（P值均〈0．05）。ALR＋CCl4干预组与CCl4急性肝损伤组相比，细胞上清液中ALT（0．73±0．17与1．43±0．38，P值均〈0．05）、AST（19．85±1．83与56．73±6．25，P值均〈0．05）水平显著降低（单位均为IU／L）；肝细胞中再生相关细胞周期蛋白D、细胞周期蛋白E、PCNA表达水平以及自噬相关LC3、Atg7、Beclin-1表达水平显著增高，P62表达水平显著降低，提示ALR可以保护急性肝损伤，促进肝细胞的再生，增强肝细胞的自噬水平。ALR＋3-MA＋CCl4干预组再生相关蛋白的表达水平相较于ALR＋CCl4干预组明显降低，与3-MA＋CCl4干预组相比无明显差异，提示抑制自噬后，肝细胞再生水平明显下降，ALR促进肝再生的作用也明显减弱。结论ALR可以促进肝脏实质细胞再生，这种再生是通过调节自噬完成的。