转基因植物与食用疫苗

转基因植物与食用疫苗宋长征，韩金祥，王美玲（山东省医学科学院生物技术中心，济南）转基因植物技术是随着ＤＮＡＩ组、基因的遗传转化、植物的组织培养、目的基因的整合与表达的检测等技术手段的建立而发展起来的生物技术。利用转基因植物作为生物反应器，把外源基因引...

禽流感病毒血凝素疫苗在转基因马铃薯中的表达

利用转基因马铃薯表达禽流感病毒血凝素疫苗。将含有禽流感病毒血凝素序列的表达载体导入农杆菌 ,再感染马铃薯的幼茎外植体。转化植株的再生及温室栽培。Westernblot分析表明 ,83%的转化植株在其块茎组织中表达了重组血凝素 ,表达量占总蛋白量的 0 0 3%～ 0 0 4 % 。

泛素-蛋白酶体通路的转化研究进展

泛素-蛋白酶体通路(UPP)负责细胞内大部分蛋白质的降解,在调整细胞周期、控制信号转导和调节细胞凋亡过程中起着至关重要的作用,并成为肿瘤治疗的靶标。该通路的转化研究促成第一代蛋白酶抑制剂的研发,以及临床应用治疗血液系统恶性肿瘤患者。

赤霞珠白藜芦醇合酶基因的克隆及酿酒酵母表达载体的构建

为克隆酿酒葡萄品种赤霞珠的白藜芦醇合酶基因并构建其酿酒酵母表达载体,利用改良CTAB法提取赤霞珠葡萄叶片组织中的DNA,根据文献报道的序列(Genbank登录号AF128861)设计引物扩增得到白藜芦醇合酶基因全长序列。将全长序列克隆至克隆载体后,通过重叠延伸PCR扩增到RS基因cDNA片段。然后分别将RS基因全序列和cDNA片段连接至真核表达载体pGBKT7,经克隆和测序分析后,构建两种真核表达载体pGBKT7/RSDNA和pGBKT7/RScDNA,用SD-trp选择培养基筛选出阳性克隆,菌落PCR验证得到阳性转化子。

小分子肽的化学结构及免疫调节作用

许多天然和合成的小分子肽具有免疫调节作用,其中不少的化学组成和结构已经明确。它们有特异、安全和较高的免疫学活性,研究表明这类生物制剂具有重要的临床应用价值。

病毒特异性转移因子研究近况

本文综述了病毒特异性转移因子的制备、增强组分的纯化与分离、特异活性的检测、实验性治疗和临床应用的评价。

健康投资趋向

健康投资是为了发展和恢复人群健康而消耗的经济资源,即为防治疾病,恢复和发展人类最基本、最普遍的社会活动能力而消耗的经济资源。世界银行在《向健康投资》的年度报告中提出新的配置卫生资源的方法,并提出健康投资同经济建设投资、智力投资一样,都是十分重要的投资。

不同酿酒葡萄品种白藜芦醇合酶基因的克隆和序列分析

以红葡萄品种"赤霞珠"、"品丽珠"、"黑比诺"和白葡萄品种"雷司令"为试材,采用改良CTAB法提取葡萄叶片组织中的DNA,并扩增得到4个酿酒葡萄品种的白藜芦醇合酶基因部分片段。结果表明:红葡萄品种"赤霞珠"、"品丽珠"、"黑比诺"的扩增产物均为1 419bp,白葡萄品种"雷司令"扩增产物为1 417bp。通过序列多重比较分析,所得到的4个白藜芦醇基因片段与Genbank中河岸葡萄(AF128861)的该基因序列同源性较高(90%以上),外显子区同源性高于内含子;红色葡萄姊妹品种之间、红色葡萄不同品种之间、红色葡萄与白色葡萄品种之间的序列同源性依次递减。

病毒的致瘤性与治瘤性

随着科学技术的发展,在肿瘤病因研究中,人们对致瘤病毒的研究已全面地进入分子水平,发展成一门边缘学科——病毒肿瘤学,并成为当代肿瘤基础理论研究中十分活跃的领域。事物都是一分为二的,除了病毒的致瘤性外,病毒对肿瘤的治疗作用却鲜为人知。作者综合了诸多资料,对病毒的治瘤性作了一个比较完整的再认识。

乙脑病毒特异性转移因子及其增强组分的高压液相色谱分析

Lawrence等发现转移因子(TF)中存在两种抗原特异性相拮抗的物质:增强组分可将非免疫反应细胞转变为抗原特异性的免疫反应细胞。

无症状HBsAg携带者的免疫耐受性

本文从宿主因素、HBsAg的性质和在遗传因素控制下的特异性体液免疫和细胞免疫的异常等几个方面,对无症状HBsAg携带者的免疫耐受性进行探讨,为这类患者的临床防治提供理论依据。

新药研制的经济观

我国正处在社会主义初级阶段,我们应当根据我国经济发展的特点进行新药研制,发展医药卫生事业,使其适应我国当今社会发展的要求。药品作为防病治病、计划生育、康复保健的一种特殊商品,它的研制在严格保证质量的前提下,还应解决盲目生产的问题,减少医药卫生资源浪费,减轻国家和人民的经济负担。新药研制面临着讲究经济效益和健全价值补偿机制的严峻课题,因此有必要对新药研制的经济观进行探讨。

链霉素耐药结核分支杆菌rpsL基因分析

结核分支杆菌 (Mycobacteriumtuberculosis.TB)的rpsL基因突变往往与链霉素 (Streptomycin .SM)耐药变异有关。选择了 77例TB临床分离株 ,应用BACTEC4 6 0快速培养系统进行常规药敏实验 ,同时针对rpsL基因进行聚合酶链反应 (PCR) ,对PCR产物进行单链构型多态性 (SSCP)分析 ,MboⅡ酶切后的限制性片段长度分析 (RFLP)和序列测定分析。常规药敏实验显示 :有 2 0株为SM敏感 ,5 7株为耐药。SSCP显示 :34株的rpsL基因为野生型 ,4 3株为突变型。与常规药敏相比SSCP的特异性和阳性预期值分别为 95 %和 98%。RFLP显示 :81 4 %的突变类型使其失去MboⅡ酶切位点。序列测定显示 :失去MboⅡ酶切位点的突变为rpsL基因 4 3位密码子存有单碱基突变 (AAG→AGG)。实验结果表明 ,TB对SM耐药变异与rpsL基因突变相关 ,其中第 4 3位密码子的突变是最常见的原因。

重组HIV-1壳体蛋白在转基因枸杞根系中的分泌表达

P24壳体蛋白(capsid,CA)是HIV-1早期感染的一个重要标志。用含有植物表达载体pCAMBIA1305.2-MA4-CA(包含GRP信号肽和MA4-CA融合基因)的农杆菌菌株侵染枸杞,将转有MA4-CA融合基因的转化株诱导生根,并进行毛状根的培养;Westernblot证实根系及培养液中的MA4-CA融合蛋白以两种形式存在,分别为37kDa和50kDa左右,前者可能为糖基化形式的单体,后者为二聚体;免疫组织化学显示,CA定位在细胞浆、细胞壁和细胞间隙中,充分证实了利用GRP信号肽可以引导重组蛋白分泌表达。建立枸杞中HIV-1壳体蛋白的根分泌表达系统,为研究植物HIV-1CA-病毒样颗粒(VLPs)疫苗奠定基础。

干扰素-tau微囊的制备工艺优化

目的用壳聚糖和海藻酸钠为原料,制备干扰素-tau微囊。方法采用凝聚法制备了干扰素-tau壳聚糖-海藻酸钠微囊,以包封率、微囊强度为指标,设立总的评估指数,用L9(34)表进行正交实验优化制备工艺。结果最终的优化方案为:2.0%海藻酸钠、0.4%壳聚糖、0.3%干扰素-tau以及1.0%氯化钙溶液。结论该工艺简便、稳定,壳聚糖-海藻酸钠微囊有望用作干扰素-tau或其它蛋白质药物的口服制剂技术。

壳聚糖-海藻酸钠微囊对干扰素-tau的控释作用

目的用壳聚糖和海藻酸钠为原料,制备干扰素-tau微囊,希望开发成为一种口服干扰素制剂。方法使用注射器手工滴制的方法,在滴加过程中,速度和距离是影响囊形的主要因素。结果壳聚糖-海藻酸钠微囊法应用于干扰素-tau药物的包封,其制备简单快速,干扰素-tau包封率很高,并且具有肠溶缓释作用。结论壳聚糖-海藻酸钠微囊有望用作干扰素-tau或其它肽类药物的口服制剂。

干扰素-tau的原核表达、纯化和活性测定

干扰素-tau(IFN-tau)是一种新发现的I型干扰素,为了更清楚地研究它的生物学功能,在已克隆IFN-tau cDNA的基础上,PCR扩增出IFN-tau ORF,与原核表达载体pBV220重组后,成功地构建了IFN-tau的原核表达质粒pBV220/IFN-tau。重组质粒转化大肠杆菌BL21,该菌经过诱导,用凝胶过滤色谱层析的方法获得了纯化的目的蛋白,该蛋白经过氨基酸序列分析证实是IFN-tau;用细胞病变抑制法测定IFN-tau经过透析复性后的活性为2.09×106IU/ml,比活性为2.35×106IU/mg。