侧脑室注射α-突触核蛋白对黑质和纹状体单胺氧化酶B表达的影响

目的探讨侧脑室注射α-突触核蛋白(α-syn)对小鼠黑质和纹状体区单胺氧化酶B(MAO-B)蛋白表达以及运动功能的影响。方法将8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组以及0.04、0.20和2.00 ng的α-syn组,给予侧脑室连续注射生理盐水或α-syn共7 d,采用转棒实验检测小鼠运动能力,采用免疫印迹法检测小鼠黑质和纹状体区酪氨酸羟化酶(TH)和MAO-B蛋白表达。结果与生理盐水组相比,0.20和2.00 ng的α-syn组小鼠在转棒上运动时间明显缩短(F=4.877,P<0.05),且纹状体区MAO-B蛋白表达水平显著升高(F=9.662,P<0.05),但0.04 ng的α-syn组小鼠运动水平和纹状体区MAO-B蛋白表达水平均没有明显变化(P>0.05)。各组小鼠黑质区TH和MAO-B蛋白表达水平比较差异均无显著性(P>0.05)。结论侧脑室注射α-syn可引起小鼠纹状体区MAO-B蛋白表达增加和运动功能障碍。

柠檬酸铁胺对SH-SY5Y细胞中葡萄糖脑苷脂酶活性及其蛋白表达的影响

目的探究柠檬酸铁胺(FAC)对SH-SY5Y多巴胺能细胞系葡萄糖脑苷脂酶(GCase)活性及其蛋白表达的影响。方法用FAC、GCase活性抑制剂环己烯四醇环氧化物(CBE)分别或共同处理细胞48 h,应用荧光法检测GCase活性,免疫印迹法检测GCase蛋白表达。结果FAC和CBE两种因素共处理,对GCase活性及其蛋白表达的影响不存在交互作用(P>0.05)。FAC处理SH-SY5Y细胞后,GCase活性降低,蛋白表达升高,与对照组比较差异具有统计学意义(F=8.191、4.934,P<0.05);CBE处理SH-SY5Y细胞后,GCase活性降低,蛋白表达升高,与对照组比较差异具有统计学意义(F=14.605、4.182,P<0.05)。结论高铁可降低SH-SY5Y细胞中GCase的活性,升高蛋白的表达。

α-突触核蛋白高表达对PC12细胞ferroportin、铁调节蛋白1和铁调素表达的影响

目的探讨PC12细胞高表达野生型(WT)α-突触核蛋白(α-Syn)对ferroportin(FPN)、铁调节蛋白1(IRP1)蛋白表达以及铁调素mRNA表达的影响。方法PC12细胞用基础培养液处理24 h(对照组)或用2 mg/L多西环素(DOX)处理24 h(DOX处理组)。采用免疫印迹法检测α-Syn、FPN和IRP1蛋白表达情况,采用实时荧光定量PCR检测铁调素mRNA表达情况。结果2 mg/L DOX可诱导PC12细胞α-Syn高表达(t=5.245,P<0.05)。与对照组相比,DOX处理组细胞铁调素mRNA表达水平显著升高(t=4.162,P<0.05),但FPN和IRP1蛋白表达水平没有明显变化(t=0.092、0.268,P>0.05)。结论α-Syn高表达不影响PC12细胞FPN和IRP1蛋白表达,但可以诱导铁调素mRNA水平升高。