缬沙坦通过Akt信号通路抑制宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的研究

目的:观察血管紧张素II 1型受体拮抗剂缬沙坦(Valsartan)对宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭的影响及机制。方法:体外培养宫颈癌Hela细胞。采用不同浓度(0.1、1、10和100 μmol/L)的缬沙坦分别处理Hela细胞0、24、48 h,CCK-8法检测Hela细胞的增殖能力。缬沙坦(100 μmol/L)处理Hela细胞24 h后,采用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验分别检测迁移及侵袭能力,蛋白质印迹法检测缬沙坦(10和100 μmol/L)处理Hela细胞24 h后,Hela细胞中Akt、p-Akt蛋白的表达情况。随后,在Hela细胞中加入Akt激动剂预处理1 h后,再加入缬沙坦(100 μmol/L)培养Hela细胞,采用cck-8法检测Hela细胞增殖能力,采用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验,检测Hela细胞的迁移和侵袭能力。结果:使用缬沙坦(10和100 μmol/L)处理Hela细胞,能够抑制Hela细胞的增殖作用(p 【0.01),缬沙坦(100 μmol/L)处理细胞后能够明显抑制Hela细胞的迁移及侵袭能力(p 【0.01);缬沙坦(100 μmol/L)处理过的Hela细胞中p-Akt蛋白的表达量降低(p 【0.01)。Akt激动剂减弱了缬沙坦对Hela细胞的增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论:缬沙坦对宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭能力有明显的抑制作用,这种抑制作用可能是通过抑制Akt信号通路实现的。

硫酸右旋糖酐对卵巢癌细胞A2780增殖和迁移及侵袭机制研究

目的观察硫酸右旋糖酐(DS)对人卵巢癌细胞A2780生物学行为的影响及可能的分子机制。方法体外培养人浆液性卵巢癌细胞A2780,将其分为空白对照组、不同浓度(质量分数分别为0.1%、0.3%、0.6%和1%)DS处理组及1%DS+AKT激动剂组。通过细胞增殖实验、划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验检测A2780细胞的增殖、迁移和侵袭的影响;蛋白质印迹法检测AKT和p-Akt的表达。两独立样本比较采用t检验,双因素数据间比较采用两因素方差分析。结果细胞实验表明,DS对A2780细胞的增殖具有抑制作用,并呈浓度和时间依赖性,差异有统计学意义(F_(处理)=81.66;F_(时间)=321.2;F_(处理×时间)=15.84,均P<0.0001)。划痕实验显示,DS呈剂量依赖性地抑制A2780细胞迁移,0、0.3%和1%DS处理A2780细胞不同时间后,差异有统计学意义(F_(处理)=40.96,P<0.0001;F_(时间)=73.32,P<0.0001;F_(处理×时间)=5.075,P=0.0017)。Transwell实验结果表明,空白对照组、0.3%DS处理组和1%DS处理组迁移细胞数分别为(514.13±19.56)、(251.59±15.95)和(101.67±10.07)个/HP,两处理组分别与空白对照组相比差异均有统计学意义,t值分别为32.47和18.02,均P<0.0001;0.3%DS处理组和1%DS处理组相比差异有统计学意义,t=13.77,P<0.001。空白对照组、0.3%DS处理组和1%DS处理组侵袭细胞数分别为(553.27±18.79)、(231.67±17.75)和(91.54±7.13)个/HP,两处理组分别与空白对照组相比差异有统计学意义,t值分别为21.55和39.79,均P<0.0001;0.3%DS处理组和1%DS处理组相比差异有统计学意义,t=12.69,P<0.001。蛋白质印迹结果显示,0.3%和1%DS处理A2780细胞24 h后,AKT表达量与对照组相比没有改变;p-AKT蛋白相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义,t值分别为8.143和26.19,均P<0.005;0.3%DS处理组与1%DS处理组相比差异有统计学意义,t=11.67,P<0.001。加入AKT激动剂后,DS对卵巢癌细胞的抑制作用消失。结论DS能够抑制A2780细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与人卵巢癌细胞A2780 p-AKT蛋白表达量降低与抑制PI3K/AKT信号通路有关。