低氧诱导人乳腺癌细胞VEGF的表达及机制

目的:研究低氧对体外培养乳腺癌细胞株MD -MBA - 4 35S血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactorVEGF)表达的影响。方法:建立MD -MBA - 4 35S细胞体外低氧培养模型。在缺氧处理后( 4h、8h、12h、16h和2 0h) ,RT -PCR和Westernblot分别检测VEGF基因和HIF - 1α蛋白、VEGF蛋白的表达变化,台盘兰排斥法检测2 0h以内细胞的存活率。结果:缺氧2 0h以内对细胞生存率影响较小;缺氧4h后,VEGFmRNA的两个亚型VEGF12 1及VEGF16 5的表达相对常氧条件下有显著增加,且随着缺氧时间的增加呈时间效应关系。免疫细胞化学及Westernblot证实VEGF蛋白的表达与VEGFmRNA的表达同步;HIF - 1α蛋白在常氧条件下很少表达,缺氧4h即有显著表达,且表达量随缺氧时间而升高,Pearson级差相关分析显示HIF - 1α蛋白水平和VEGF165mRNA及蛋白表达显著正相关。结论:缺氧可以显著增加乳腺癌细胞VEGF的表达,且HIF - 1α蛋白在其中发挥重要作用。

哲学在临床教学中的应用思考之一——矛盾分析方法的应用

医学与哲学有着密切关系,这种关系可以追溯到医学的起源,并贯穿于医学发展的整个历史进程。哲学是世界观与方法论的有机结合,其方法论在指导医学教学中的作用尤为突出。对立统一规律揭示了事物发展的源泉和动力,是唯物辩证法的实质和核心。对立统一即矛盾,矛盾具有普遍性。医学治疗过程本身也充满了各种矛盾,比如血栓形成和出血之间的矛盾等。有些矛盾错综复杂,令人难以适从。在扎实学习医学知识的基础之上,应用矛盾分析方法 -抓住主要矛盾,兼顾次要矛盾,作为指导思想来解决临床治疗中的各种复杂问题,有可能化繁为简,从而使问题迎刃而解。

损伤控制外科技术在32例严重交通伤治疗中的应用

目的探讨损伤控制外科技术(DCS)在严重交通伤中的应用。方法选择2004年1月至2011年12月该院收治的严重交通伤患者69例(ISS值大于或等于25),参照Moore等提出的损伤控制纳入条件,其中32例为DCS组,其余37例采用传统救治方案为传统组,比较两组患者的治疗效果。结果传统组患者术后并发症明显高于DCS组(P<0.05)。结论早期准确的伤情评估、多学科、联合救治、合理地运用DCS,可以提高严重交通伤救治成功率。

门诊治疗淋巴结结核的疗效观察及护理干预

目的:探讨在局部治疗联合全身化疗方案治疗脓肿型、溃疡型淋巴结结核疗效同时,运用相应的护理措施,注重治疗过程的重要护理环节,确保医疗效果。方法:收集门诊治疗的脓肿型、溃疡型淋巴结结核83例;建立淋巴结结核门诊病人治疗档案及依从性调查表、健康教育执行登记表,并对患者进行系统的健康教育;全身化疗方案:2HRZ/7HR;局部治疗方案:清创+换药+药物封闭+缝合;观察治疗时间与疗效。结果:治疗1个月治愈36例(43.37%),2个月治愈61例(73.49%),3个月治愈83例(100%)。结论:应用局部治疗联合全身化疗治疗脓肿型、溃疡型淋巴结结核能缩短治疗时间;建立淋巴结结核门诊病人档案及依从性调查,加强健康教育,提高病人的医嘱依从性是保证疗效的关键。

封闭负压引流技术对人慢性创面组织中C-ski及Smad3表达的影响

目的观察封闭负压引流技术(vacuum-assisted closure,VAC)治疗慢性创面前后创缘组织中C-ski及Smad3表达的改变,从创面愈合启动方面探讨VAC促进创面愈合的机制。方法临床选取慢性创面病例14例,分别于治疗前,治疗后1、4、7d取创缘全层皮肤组织,应用免疫组织化学检测样本组织的C-ski及Smad3的表达变化,应用RT-PCR检测样本组织中C-ski mRNA和Smad3mRNA的变化。结果治疗前创缘组织中C-ski的表达较少,治疗后逐渐增加,治疗后第4天起较治疗前显著增加(P<0.05)。相反,治疗前创缘组织中Smad3的表达较多,治疗1d后轻微减少,治疗4d和7d后显著减少(P<0.05),C-ski mRNA和Smad3mRNA的表达趋势同其蛋白一样。C-ski阳性表达与Smad3阳性表达呈显著负相关(r=-0.873,P<0.01)。结论VAC治疗后,能够使创缘组织中的C-ski表达增加并且抑制了Smad3的表达。

转染Elafin对百草枯诱导的肺泡上皮凋亡的影响

目的:探讨转染Elafin对百草枯(Paraquat,PQ)诱导的肺泡上皮凋亡的影响及可能机制。方法:电穿孔法转染p EGFP-C1-Elafin进入A549细胞,培养24 h后,RT-PCR检测Elafin mRNA在A549细胞中的表达情况;并给予生理盐水、不同浓度PQ(5、50、100μmol/L)作用后,Annexin V/PI双染法流式细胞仪检测A549细胞凋亡率、活性氧类物质(Reactive oxygen species,ROS)含量。Western blot检测核因子相关因子2(Nuclear factor erythroid like-2,Nrf2)、血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)表达情况。结果:转入A549细胞Elafin成功表达。PQ呈浓度依赖性导致A549细胞凋亡;PQ可使ROS含量明显增加,Nrf2、HO-1表达下调。Elafin可抑制PQ诱导的细胞调亡,上调Nrf2、HO-1蛋白表达。结论:Elafin可以一定程度抑制PQ诱导的A549细胞凋亡,其机制可能与其上调抗氧化蛋白Nrf2等有关。

超声破坏载pcDNA3-bFGF-NGF基因纳泡治疗糖尿病大鼠烫伤创面的实验研究

目的探讨超声破坏载pcDNA3-bFGF-NGF基因纳泡对糖尿病大鼠烫伤创面的治疗作用。方法制备载pcDNA3-bFGF-NGF基因纳泡,检测其基本特性;MTT法检测其对大鼠真皮成纤维细胞活性的影响;Western-blot检测其在大鼠真皮成纤维细胞中的基因表达水平及转染效率。选取糖尿病大鼠27只,分为空白对照组、载基因纳泡组及超声破坏载基因纳泡组,超声破坏载基因纳泡组又分别于1 d、2 d、3 d、4 d、7 d、14 d及21 d观察创面愈合情况,以及bFGF及NGF蛋白表达水平及转染效率,并与空白对照组、载基因纳泡组21 d时的结果进行对照。结果所制备的阳离子纳泡形态规则,稳定性好,平均表面电位为12.7 mV;与基因结合量高达3.8mg/108个纳泡;基因结合率高达39.5%;MTT显示对细胞无明显毒性。Western-blot半定量结果显示,空白对照组和载基因纳泡组bFGF及NGF蛋白水平低;bFGF蛋白及NGF蛋白在载基因纳泡组48 h时转染效率及表达水平最高。超声破坏载基因纳泡48 h组bFGF水平在治疗第7天表达及转染率达到峰值,NGF水平在治疗第4天表达及转染率最高。结论载pcDNA3-bFGF-NGF基因纳泡能显著增强超声显影;经超声基因转染仪破坏后可定位释放基因,且基因转染效率明显提高,对糖尿病大鼠烫伤创面有较好的治疗效果。

清创术术前准备的改良方法研究

目的探索一种简单有效的清创术术前准备方法以应用于临床。方法选择732例进行清创术的外伤患者,随机分为改良组367例和传统组365例,比较用双氧水擦洗皮肤及伤口的改良方法与用肥皂水擦洗皮肤及伤口的传统方法用于清创术术前准备的清洁程度、细菌清除率、伤口感染率、愈合时间。结果改良组在清洁程度、细菌清除率、伤口感染率、愈合时间方面均优于传统组。结论改良的外伤清创术前皮肤准备方法简单有效,值得临床推广。

以急诊医学为依托的全科医学培养模式探讨

全科医生是一类重要的复合型医学人才。但目前在我国,合格的全科医生十分匮乏,其中一个重要的原因是我国尚未建立起科学有效的全科医师培养模式。因此,探索适合我国国情且行之有效的全科医生培养模式迫在眉睫。由于全科医学与急诊医学学科特点上有诸多相似性,以急诊医学为依托进行全科医生培养是全科医学发展初始阶段的有益探索,以实现由急诊医生培养全科医生逐步过渡到全科医生培养全科医生。以急诊医学为依托的全科医学培养模式符合全科医学的内在要求,为探索符合我国现阶段实际的全科医学模式提供了新的思路。

四肢开放性损伤伤口污染和感染的调查及护理干预研究

目的:了解四肢开放性损伤伤口污染和感染的常见细菌种类,探讨在伤口处理及愈合环节中,进行护理干预对伤口感染的影响。方法:对160例四肢开放性损伤伤口于就诊时、初步处理后、清创后、术后感染伤口用棉拭子取样进行细菌培养,记录伤口处理及愈合环节中控制伤口污染和感染的护理措施。结果:就诊时、初步处理后、清创后及术后感染伤口的细菌检出率分别为73.1%(117/160)、61.2%(98/160)、14.4%(23/160)、5.0%(8/160),每个环节均无新增菌生长。结论:四肢开放性损伤伤口污染重、菌种分布广,在伤口处理及愈合环节中进行护理干预能有效降低术后伤口的感染率。

症状鉴别诊断学在培养实习生临床急诊思维中的作用

急诊医学由于其涵盖疾病种类的不确定性给临床实习带来了较大困难,急诊医学的临床特点需要培养特定的急诊临床思维;除急诊医学外,各临床专科也会碰到自身专业的急诊问题。如何让医学实习生建立起科学的急诊思维是临床教学的重要内容。以症状鉴别诊断为切入点,重视生命体征检查,结合必要的辅助检查,可有效减少急诊医学实习过程中的漏诊、误诊,从而树立良好的急诊临床思维。

罗氟司特对大鼠创伤性脑损伤的作用及其机制研究

目的探讨罗氟司特(RF)对大鼠创伤性脑损伤(TBI)的作用及其可能的机制。方法按随机数字表法将36只大鼠分为3组:假手术(Sham)组、TBI组、TBI+RF组,每组12只。采用改良Feeney自由落体法建立大鼠TBI模型,TBI+RF组于建模后即刻、1 d、2 d时腹腔注射RF,Sham组和TBI组则予以等量溶剂。建模后1、2、3、7、14 d时对各组大鼠进行改良神经功能缺损严重程度评分(mNSS)。建模后3 d时,HE染色后观察病灶周围皮层神经元病理变化并分析死亡神经元数量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠损伤侧皮层白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,免疫组化检测大鼠病灶周围皮层NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)含量。结果与TBI组比较,TBI+RF组的mNSS在建模后3 d内差异无统计学意义,但7 d、14 d时降低(P<0.05)。与Sham组比较,TBI组病灶周围脑组织结构疏松,细胞间质水肿明显,见较多死亡神经元(P<0.05);TBI+RF组病灶周围仍可见细胞间质水肿,但死亡神经元百分比较TBI组减少(P<0.05)。与Sham组比较,TBI组的IL-1β、IL-6、TNF-α和NLRP3含量均升高(P<0.05);而经罗氟司特治疗后,大鼠的IL-1β、IL-6、TNF-α和NLRP3含量均降低(P<0.05)。结论罗氟司特可能通过降低创伤性脑损伤早期的炎症介质水平,减轻大鼠创伤性脑损伤,从而起到神经保护作用。

磷酸二酯酶4及其抑制剂在创伤性脑损伤中的研究进展

创伤性脑损伤(TBI)患者的数量日益剧增,造成了严重的经济负担,寻找其新型、有效的治疗方式一直是研究的热点。近年来,由于可以有效减轻实验动物脑外伤后的炎症反应,并改善神经元之间的突触功能障碍,逆转其学习及记忆缺陷,选择性磷酸二酯酶4抑制剂(PDE4I)得到越来越多的关注。本文回顾了磷酸二酯酶4(PDE4)的生物学特性,TBI后cAMP和PDE4的变化及联系,以及靶向PDE4治疗TBI的研究进展,为TBI的治疗提供新思路。

慢性创面细菌生物膜形成与治疗研究进展

细菌感染已成为慢性创面难以愈合的重要因素,随之形成的细菌生物膜会进一步增加治疗难度,因此急需寻找新的、有效的治疗手段。生物膜的有效清除是临床治疗慢性创面的关键,细菌“劫持”理论为了解创面生物膜提供了新的视角,部分新兴材料也展现了良好的应用前景。该文综述了慢性创面细菌生物膜形成机制的新进展及基于部分新兴材料的新抗生物膜疗法,旨在为规范治疗慢性创面感染提供新思路。

脂肪来源干细胞促进糖尿病足溃疡愈合的研究进展

糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer, DFU)是糖尿病严重并发症之一,其发病率呈逐年增长的趋势。DFU创面的形成及愈合机制极为复杂,致残率较高,临床治疗颇为棘手,是目前医学界的一大难题。脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)是一类具有自我复制及多向分化潜能的成体干细胞,其对创面上皮化、血管化及调节创面炎症反应等的积极作用已被大量体外实验及基础实验证实,表明ADSCs有望成为创面治疗的一种新的可行方法应用于临床。现就ADSCs在DFU创面治疗中的研究进展作一综述。

三氧化二砷对乳腺癌细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的研究低氧条件下人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S血管内皮生长因子(VEGF)的表达及三氧化二砷(As2O3)对其表达的影响。方法建立MD-MBA-435S细胞体外低氧培养模型。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学染色和Westerblot分别检测0.5、2.0、5.0μmol/LAs2O3对缺氧12h后乳腺癌细胞VEGF基因及蛋白的表达变化;噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度As2O3对乳腺癌细胞生存的影响。结果高浓度As2O3可以抑制乳腺癌细胞的生存,而低浓度则对此影响较小。缺氧12h后VEGFmRNA和蛋白皆明显增加;3种浓度As2O3对常氧下乳腺癌细胞VEGFmRNA和蛋白无明显影响,而对缺氧12h后细胞VEGFmRNA和蛋白的表达明显抑制,且呈剂量递增效应。结论缺氧可以显著增加乳腺癌细胞VEGF的表达;常氧下As2O3对乳腺癌细胞VEGF的表达无明显抑制,而在低氧下可以明显抑制,其机制可能是通过调控VEGF的上游基因实现的。

碘伏冲洗在封闭负压疗法用于糖尿病足溃疡治疗中的护理研究

目的探讨封闭负压疗法治疗糖尿病足溃疡时,护理干预措施中加用碘伏冲洗,并观察疗效。方法收集糖尿病足溃疡Ⅱ级、年龄50～80岁的糖尿病患者82例分为实验组66例和对照组16例,常规进行手术清创后,对照组仅行封闭负压吸引,实验组行封闭负压吸引联合0.05%碘伏冲洗,持续吸引、间断冲洗。比较两组创面细菌清除率、创面清洁时间、堵管率、更换引流管次数。结果 81例患者溃疡创面均全部愈合,1例患者因其他疾病死亡;创面面积<8cm2时,实验组与对照组的创面细菌清除率分别为93.1%和80.2%;清洁时间分别为13.5d和21.1d,堵管率分别为0%和80%;更换引流管次数分别为2.1次和5.6次;创面面积>8cm2时,实验组与对照组的创面细菌清除率分别为92.6%和76.5%,清洁时间分别为22.4d和30.7d,堵管率分别为5%和83.3%,更换引流管次数分别为3.4次和9.3次。实验组的创面细菌清除率、创面清洁时间、堵管发生率、更换引流管次数明显优于对照组。结论在治疗糖尿病足溃疡时,护理干预措施碘伏冲洗联合封闭负压疗法优于单纯的封闭负压疗法,够能提高细菌的清除率,防止引流管堵塞,减少引流管更换次数,缩短创面清洁时间,为创面进一步治疗节省时间,减少患者费用,值得进一步推广应用于临床。

低频超声作用下微泡联合庆大霉素治疗糖尿病足溃疡的效果观察

目的探讨低频超声下微泡联合庆大霉素对细菌生物膜的清除作用及对糖尿病足溃疡愈合的影响。方法前瞻性选取2021年7月至2022年6月重庆医科大学附属第二医院创伤中心收治的27例慢性糖尿病足溃疡伴感染患者,按随机数字表法将患者分为低频超声+微泡+庆大霉素软膏组、低频超声+微泡组、庆大霉素软膏组,每组9例。三组患者由同一手术医生行简单清创术,低频超声+微泡+庆大霉素软膏组先以低强度聚焦超声仪辐照4%浓度微泡混悬液覆盖的创面5 min,随后均匀涂抹庆大霉素软膏治疗;低频超声+微泡组予以低强度聚焦超声仪辐照4%浓度微泡混悬液覆盖的创面5 min治疗;庆大霉素软膏组予以均匀涂抹庆大霉素软膏治疗。持续2周,并于术中、治疗2周后分别取分泌物与组织标本。比较三组间治疗后创面一般情况指标(包括溃疡深度评分、分泌物渗出量评分、新鲜肉芽组织生长程度评分、指标总分)、溃疡面积、溃疡愈合率、分泌物培养阴性率的差异。比较三组治疗后在扫描电镜下细菌生物膜结构变化和激光共聚焦扫描显微镜下菌落计数的差异。结果三组间一般资料比较差异无统计学意义(均P>0.05)。治疗2周后,三组间一般情况指标总体比较差异有统计学意义(均P<0.05),低频超声+微泡+庆大霉素软膏组各项指标评分低于低频超声+微泡组和庆大霉素软膏组(均P<0.05);三组间溃疡面积总体比较差异无统计学意义(P>0.05);三组间溃疡愈合率总体比较差异有统计学意义(P<0.05),低频超声+微泡+庆大霉素软膏组愈合率高于低频超声+微泡组和庆大霉素软膏组(均P<0.05);三组间分泌物培养阴性率总体比较差异有统计学意义(P<0.05),低频超声+微泡+庆大霉素软膏组阴性率高于低频超声+微泡组和庆大霉素软膏组(均P<0.05)。扫描电镜显示,治疗前三组均存在细菌生物膜感染,治疗2周后,低频超声+超声微泡+庆大霉素软膏组生物膜生成明显减少,低频超声+微泡组、庆大霉素软膏组较治疗前变化不大。共聚焦显微镜下三组间菌落数量总体比较差异有统计学意义(P<0.05),低频超声+微泡+庆大霉素软膏组菌落计数低于低频超声+微泡组和庆大霉素软膏组(均P<0.05)。结论低频超声下微泡联合庆大霉素对细菌生物膜具有清除作用,并促进糖尿病足溃疡愈合。