lncRNA MEG3靶向调节miR-27a-3p抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的实验研究

目的:探究lncRNA MEG3对胃癌(GC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:qRT-PCR检测人正常胃上皮细胞GES-1和GC细胞(BGC823、MGC803、SGC7901、AGS、MKN28、MKN451)中MEG3及miR-27a-3p表达差异;将AGS细胞分为对照组、GV144组、GV144-MEG3组、GV144-MEG3+miR-27a-3p NC组、GV144-MEG3+miR-27a-3p mimics组;比较各组AGS细胞中MEG3及miR-27a-3p表达情况;检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,Western blot检测ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证MEG3与miR-27a-3p的靶向关系。结果:与GES-1细胞相比,GC细胞中MEG3水平降低,miR-27a-3p水平升高(P<0.05);与对照组相比,GV144-MEG3组MEG3水平升高,miR-27a-3p、ki-67、MMP-2、MMP-9水平及增殖、迁移和侵袭能力降低(P<0.05);上调miR-27a-3p表达可减弱MEG3过表达对AGS细胞恶性行为的抑制作用。miR-27a-3p是MEG3的靶基因。结论:过表达MEG3可能通过靶向下调miRNA-27a-3p表达抑制AGS细胞增殖、迁移及侵袭。

长链非编码RNA C5orf66-AS1通过靶向miR-637对胃癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA C5orf66-AS1通过靶向miR-637对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡的影响,为GC临床治疗提供依据。方法:收集32例GC病人的癌组织及其癌旁组织并体外培养人胃腺癌细胞系MKN28、MKN451、BGC823、MGC803、AGS及正常胃上皮细胞系GES-1,qRT-PCR实验检测其C5orf66-AS1和miR-637表达。将对数生长期的AGS细胞利用脂质体转染试剂进行转染并分为对照组、GV144组、GV144-C5orf66-AS1组、miR-NC组、miR-637 mimics组、GV144-C5orf66-AS1+miR-NC组、GV144-C5orf66-AS1+miR-637 mimics组。CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术分析细胞凋亡情况;Western blotting实验测定细胞周期蛋白CyclinD1、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及其同源蛋白Bax相对表达水平;RNA免疫共沉淀实验验证C5orf66-AS1和miR-637的作用关系。结果:与癌旁组织或正常胃上皮细胞系GES-1相比,C5orf66-AS1和miR-637在GC组织和细胞系MKN28、MKN451、BGC823、MGC803、AGS中的表达水平均降低(P<0.05),选择C5orf66-AS1表达水平最低的AGS细胞进行转染实验。转染GV144-C5orf66-AS1后,AGS细胞中C5orf66-AS1、miR-637表达水平、凋亡率及Bax蛋白表达升高,细胞活性(48、72、96 h)及CyclinD1、Bcl-2蛋白降低(P<0.05)。C5orf66-AS1和miR-637存在相互作用关系。miR-637过表达可使C5orf66-AS1过表达对AGS细胞增殖的抑制作用和凋亡的促进作用更明显(P<0.05)。结论:C5orf66-AS1和miR-637在GC组织和细胞中低表达,过表达C5orf66-AS1和上调miR-637,可协同抑制GC细胞的增殖,促进凋亡。

lncRNA C5orf66-AS1通过调节CYC1表达对胃癌细胞增殖和转移的影响

目的:探讨长链非编码RNA C5orf66反义链1(lncRNA C5orf66-AS1)对胃癌细胞增殖和转移的影响。方法:以2019年6月—2021年6月收集的63例胃癌患者的癌组织与癌旁组织、人胃黏膜细胞GES-1及胃癌细胞BGC823、SGC7901、AGS、MKN28为研究对象,分别检测组织和细胞中C5orf66-AS1和细胞色素c1(CYC1z)蛋白表达情况。将AGS细胞分为7组,分别检测各组细胞增殖、迁移、侵袭以及细胞中C5orf66-AS1表达水平和CYC1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达情况。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中C5orf66-AS1表达降低,CYC1蛋白表达升高(P<0.05)。与人胃黏膜细胞GES-1比较,胃癌细胞BGC823、SGC7901、AGS、MKN28中C5orf66-AS1表达降低,CYC1蛋白表达升高(P<0.05),且AGS细胞中C5orf66-AS1表达最低,CYC1蛋白表达水平最高。沉默C5orf66-AS1促进AGS细胞增殖、迁移、侵袭及CYC1、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达;过表达C5orf66-AS1抑制AGS细胞增殖、迁移、侵袭及CYC1、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达;过表达CYC1可逆转C5orf66-AS1对AGS细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论:过表达C5orf66-AS1可能通过下调CYC1抑制AGS细胞增殖、迁移和侵袭。

改良Altemeier术治疗直肠脱垂后肛门功能恢复观察

目的研究改良经会阴直肠乙状结肠部分切除术(Altemeier)治疗直肠脱垂对肛门功能的影响。方法选取我院2014年4月至2017年4月收治的94例直肠脱垂患者纳入研究对象,以随机数表法分为观察组与对照组,每组47例。对照组行Altemeier手术治疗,观察组行改良Altemeier手术治疗。对比两组各项临床指标:手术时间、切除标本长度、出血量、术后排便时间、住院时间,术后并发症发生情况及术后1年复发情况,另外对比两组手术前后肛管静息压(ARP)、肛管最大收缩压(AMCP)水平及便秘、肛门失禁评分变化。结果观察组手术时间、出血量、住院时间显著少于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组手术后ARP、AMCP水平显著高于手术前及对照组手术后,差异有统计学意义(P <0. 05),观察组手术后便秘、肛门失禁评分显著低于手术前及对照组手术后,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组术后并发症总发生率2. 13%显著低于对照组14. 89%,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组复发率4. 44%显著低于对照组20. 45%,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论改良Altemeier术治疗直肠脱垂能够促进患者肛门功能恢复,且术后并发症少,复发率低,具有较高的临床应用价值,值得推广。

腹腔镜根治术与传统开腹手术治疗结肠癌效果及安全性对比研究

目的对比研究腹腔镜根治术及传统开腹手术治疗结肠癌的效果和安全性。方法选取2012年5月至2013年8月于本院行结肠癌手术的190例患者为研究对象,随机分为对照组和试验组,对照组患者行传统开腹手术,试验组患者行腹腔镜根治术。记录两组患者的手术时间、术中出血量、淋巴结清扫数、住院天数、胃肠功能恢复时间以及近、远期术后并发症发生率。结果与对照组比较,试验组患者术中出血量少、住院天数短、胃肠道功能恢复快、肠梗阻发生率低(P<0.05)。两组患者手术时间、淋巴结清扫数以及切口感染、局部复发、远处转移的发生率比较均无显著差异(P>0.05)。结论与传统开腹手术对比,腹腔镜根治术具有术中出血量少、胃肠功能恢复快及住院时间短等优点,是一种安全有效的手术方式,值得临床推广应用。

腹腔镜微创手术对胃穿孔患者的疗效及胃肠动力的影响探讨

目的:探讨腹腔镜微创手术对胃穿孔患者的疗效及胃肠动力的影响。方法:2017 年11 月-2018 年11 月收治胃穿孔患者78 例,通过电脑随机法分为两组,各39 例。常规组行常规开放手术治疗,研究组行腹腔镜微创手术治疗。比较两组各项指标。结果:研究组手术时间、术中失血量、术后肛门排气时间、术后肠鸣音恢复时间以及住院时间均短于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组术后血清胃泌素水平显著高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组并发症明显少于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃穿孔患者行腹腔镜微创手术治疗具有确切的效果,值得在临床中应用推广。

T1期乳腺癌行改良性保乳保腋窝手术与传统保乳手术的对比研究

【目的】比较T1期乳腺癌行改良性保乳保腋窝手术与传统保乳手术的治疗效果。【方法】回顾性分析2009年1月至2014年3月本院收治的行保乳手术的T1期乳腺癌患者102例，在知情同意的原则下，由患者自主选择治疗方案，按手术方式分为改良性保乳保腋窝手术组（A组，66例）和传统保乳手术组（B组，36例），术后均根据具体情况采用个体化的综合治疗。术后随访14-64个月。对两组患者的手术指标、手术并发症、术后局部复发率及乳房美学效果等相关指标进行对比分析。【结果】A组在手术时间、术中出血量、手术并发症发生率以及乳房美学效果上均优于B组，差异有显著性（P〈0．05）。A组与B组的局部复发率相近，差异无统计学意义（P〉0．05）。【结论】T1期乳腺癌行改良性保乳保腋窝手术治疗效果好，创伤小，值得临床推广应用。

肿瘤预切除术在拒绝穿刺活检的T1期乳腺癌患者保乳手术中的应用

目的探讨肿瘤预切除术在拒绝穿刺活检的T1期乳腺癌患者保乳手术中的应用价值。方法将100例有保乳意愿并拒绝穿刺活检的T1期乳腺癌患者随机分为两组各50例,观察组肿瘤活检方式采用肿瘤预切除术,对照组采用常规肿物切除术,对两组患者的手术指标、乳房美学效果等进行对比分析。结果观察组在手术时间、术中出血量、一次性手术成功率以及手术并发症发生率上均优于对照组(P<0.05)。观察组与治疗组的局部复发率及乳房美学效果相近(P>0.05)。采用1.0cm切缘宽度,总体切缘阳性率为5%;采用2.0cm切缘宽度,总体切缘阳性率为0%,两组比较差异无显著性(P>0.05)。结论对拒绝穿刺活检的T1期乳腺癌患者实施保乳手术时,应用切缘宽度为1.0cm的肿瘤预切除术是一种创伤小、简便实用、效果满意的方法。

lncRNA MEG3对胃癌细胞侵袭、转移及miR-373-5p/BTG3轴的影响

目的探讨lncRNA母系表达基因3(MEG3)靶向miR-373-5p/BTG3轴抑制胃癌细胞侵袭及转移的作用机制。方法SGC-7901细胞分为空白组(无转染)、空载组(转染pcDNA)、MEG3组(转染pcDNA-MEG3)。采用qRT-PCR检测SGC-7901细胞中MEG3、miR-373-5p、BTG3 mRNA水平,采用Transwell小室检测各组细胞侵袭数目,划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,免疫荧光检测BTG3蛋白水平,Pearson分析胃癌细胞中MEG3、miR-373-5p、BTG3表达相关性,荧光素酶证实lncRNA MEG3对miR-373-5p、BTG3水平调控作用。结果空白组和空载组MEG3 mRNA、侵袭数目、划痕愈合率、BTG3蛋白水平、miR-373-5p、BTG3 mRNA水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);与空载组相比,MEG3组MEG3 mRNA、BTG3蛋白及mRNA水平升高,侵袭数目、划痕愈合率及miR-373-5p mRNA表达降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。MEG3与miR-373-5p呈现负相关性(r=-0.336,P<0.001),MEG3与BTG3呈现正相关性(r=0.413,P<0.001),miR-373-5p与BTG3呈现负相关性(r=-0.400,P<0.001)。荧光素酶报告结果显示:与空载体组相比,MEG3组miR-373-5p-3′-UTR-WT水平降低,BTG3-3′-UTR-WT升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调lncRNA MEG3可能靶向抑制miR-373-5p、激活BTG3水平从而抑制SGC-7901细胞侵袭及转移。

腹腔镜手术与开腹直肠前切除术治疗直肠癌的临床效果比较研究

目的比较腹腔镜手术与开腹直肠前切除术治疗直肠癌的临床效果。方法选取沧州市人民医院2012年12月—2016年6月收治的直肠癌患者90例,随机分为对照组和观察组,各45例。对照组患者采用开腹直肠前切除术治疗,观察组患者采用腹腔镜手术治疗。比较两组患者的临床疗效、术中出血量及术后肛门排气时间,并观察两组患者术后并发症发生情况。结果观察组患者治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。观察组患者术中出血量少于对照组,术后肛门排气时间短于对照组(P<0.05)。观察组患者并发症发生率低于对照组(P<0.05)。结论采用腹腔镜手术治疗直肠癌临床疗效优于开腹直肠前切除术,其可减少术中出血量及术后并发症,促进疾病快速恢复。

DKK1调节PI3K/AKT通路影响胃癌细胞的EMT进程

[目的]探究DKK1与PI3K/AKT信号通路在胃癌细胞的EMT进程中的作用。[方法]免疫组化实验分析胃癌组织以及癌旁正常组织中DKK1的表达水平;将胃癌细胞系MGC-803细胞分为3组:si DKK1组、si NC组和LY294002组。MTT实验分析MGC-803细胞的增殖能力;Transwell实验分析细胞的侵袭能力;细胞划痕实验分析细胞的迁移能力;蛋白免疫印迹实验分析PI3K/AKT信号通路蛋白表达的情况。[结果]与胃癌的癌旁正常组织比较,胃癌组织DKK1的表达水平升高。与si NC组比较,si DKK1和LY294002组的MGC-803细胞生长速度显著下降(2.89±0.02 vs 1.59±0.05 vs 1.37±0.03,P<0.05);si DKK1和LY294002组的MGC-803细胞侵袭数量显著降低(132.23±10.02 vs 71.39±7.05 vs 68.57±8.03,P<0.05);si DKK1和LY294002组的MGC-803细胞迁移比例显著降低(0.83±0.03 vs 0.39±0.01 vs 0.41±0.03,P<0.05);si DKK1和LY294002组的MGC-803细胞PI3K/AKT蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。[结论]DKK1在胃癌组织中高表达,下调DKK1表达后,胃癌MGC-803细胞的增殖、侵袭和迁移能力受到显著抑制,这一过程与下调DKK1抑制PI3K/AKT信号通路激活密切相关。

高位虚挂线引流与减压引流法在高位肛周脓肿切除术中的应用效果比较

目的比较高位虚挂线引流与减压引流法在高位肛周脓肿切除术中的应用效果。方法纳入2016年1月至2018年1月沧州市人民医院胃肠微创外科收治的76例高位肛周脓肿患者为研究对象,按入院先后顺序将患者分为高位虚挂线引流组和减压引流组,每组各纳入38例,患者均接受肛周脓肿切除术。比较两组手术相关指标、术后第2 d及第7 d的疼痛程度、术后6个月内的肛肠直肠功能、脓肿复发率以及肛瘘形成率。结果两组手术时间比较,差异无统计学意义(P> 0.05),减压引流组术后住院时间、伤口愈合时间短于高位虚挂线引流组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。减压引流组术后第2 d疼痛情况轻于高位虚挂线引流组,差异有统计学意义(P <0.05);两组术后第7 d疼痛情况比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。两组术后6个月肛门功能均正常,未见出现漏液、漏气等情况。两组肛周脓肿复发率及肛瘘形成率比较,差异均无统计学意义(均P> 0.05)。结论与高位虚挂线引流比较,高位肛周脓肿切除术后减压引流更有助于促进患者术后早期恢复、减轻术后早期疼痛。

lncRNA Dleu2通过调控miR-150-5p对胃癌细胞恶性行为、USF2表达的影响

目的探究长链非编码(lnc)RNA淋巴细胞白血病缺失基因(Dleu2)通过调控miR-150-5p对胃癌细胞恶性行为、上游刺激因子(USF)2表达的影响。方法取MKN1细胞将其分为胃癌细胞(SC)组,胃癌细胞+lncRNA Dleu2-NC(LN)组,胃癌细胞+lncRNA Dleu2抑制剂(LI)组、胃癌细胞+lncRNA Dleu2激动剂(LM)组、胃癌细胞+miR-150-5p-NC(MN)组、胃癌细胞+miR-150-5p抑制剂(MI)组、胃癌细胞+miR-150-5p激动剂(MM)组、胃癌细胞+lncRNA Dleu2抑制剂+miR-150-5p激动剂(DP)组。实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测正常胃上皮细胞及4种胃癌细胞系中lncRNA Dleu2、miR-150-5p表达水平,将阴性对照、lncRNA Dleu2、miR-150-5p类似物转染至胃癌细胞中,小室法检测细胞恶性行为,Western印迹检测USF2蛋白表达,双荧光素酶报告实验证实lncRNA Dleu2和miR-150-5p的相互作用。结果与正常胃癌上皮细胞系GES-1相比,胃癌细胞系中的lncRNA Dleu2 mRNA表达量显著升高,miR-150-5p mRNA表达量显著降低(P<0.05),其中,MKN1的lncRNA Dleu2、miR-150-5p mRNA变化最大(P<0.05),因此选取其作为实验细胞;SC组与LN组细胞侵袭、迁移数量及USF2蛋白表达无明显差异(P>0.05);与LN组相比,LM组细胞侵袭、迁移数量及USF2蛋白表达明显升高(P<0.05);与LM组相比,LI组细胞侵袭、迁移数量及USF2蛋白表达明显降低(P<0.05);SC组与MN组细胞侵袭、迁移数量及USF2蛋白表达基本无明显差异(P>0.05);与MN组相比,MI组细胞侵袭、迁移数量及USF2蛋白表达明显升高(P<0.05);与MI组相比,MM组细胞侵袭、迁移数量及USF2蛋白表达明显降低(P<0.05);LI组与MM组细胞侵袭、迁移数量及USF2蛋白表达基本无显著差异(P>0.05);与MM组相比,DP组细胞侵袭、迁移数量及USF2蛋白表达明显降低(P<0.05);双荧光素酶报告结果显示,转染lncRNA Dleu2后可显著抑制miR-150-5p-3′-UTR-WT的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变基因无显著影响(P>0.05),且miR-150-5p与lncRNA Dleu2呈明显负相关(P<0.05)。结论抑制lncRNA Dleu2可有效改善胃癌细胞恶性行为,抑制USF2表达,其作用机制可能与靶向促进miR-150-5p有关。