家族性反常性痤疮猪模型的创制及其致病机理的研究

反常性痤疮(Acne inversa, AI)是一种发病率约1%的常染色体显性遗传的皮肤炎症疾病,发病机制尚不明确,临床上尚缺乏有效的治疗方案. NCSTN编码nicastrin蛋白,是构成γ外泌酶的重要组分,杂合点突变(c.349C>T, p.R117X)是造成AI的主要原因之一.本研究比较了不同策略的CRISPR/Cas9介导的同源末端连接技术,成功地将NCSTN+/R117X点突变引入到体细胞中,进一步结合体细胞核移植技术,构建了携带家族性AI点突变(NCSTN+/R117X)的猪模型.六月龄NCSTN+/R117X猪背部皮肤表现出明显的痤疮临床症状,包括表皮层增厚和皮肤炎症;同时发现皮肤中胆固醇含量显著下降、胆固醇合成代谢通路下调和皮肤屏障功能受损.机制解析发现γ外泌酶直接调控的Notch信号通路可以抑制AMPK磷酸化,而AMPK磷酸化可以引起胆固醇合成酶HMGCR的表达下调,进而影响胆固醇的合成.综上,本研究构建的NCSTN+/R117X猪模型很好地模拟了家族性AI的遗传模式、临床病理特征和炎症反应,并发现Notch-p AMPK-HMGCR通路异常引起的皮肤屏障损伤可能是AI发病的新机制,为AI疾病治疗方案的开发提供了新的动物模型和理论依据.