绿原酸对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

为分析绿原酸(CHA)对小鼠脾脏淋巴细胞增殖、分泌功能的影响。无菌操作分离小鼠脾脏,制备脾脏淋巴细胞并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入诱导剂刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)以及0、40、80、160μg/mL不同浓度的CHA,经过不同时间培养后,采用MTT法检测T和B淋巴细胞的增殖,ELISA和Griess法分别检测淋巴细胞分泌TNF-α和NO的水平。结果表明:低浓度和中浓度CHA提高ConA/LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖和存活,而高浓度CHA明显抑制其细胞增殖转化;CHA促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞分泌NO;CHA对T淋巴细胞分泌TNF-α影响不大,中浓度CHA可显著促进脾脏B淋巴细胞分泌TNF-α,高浓度反而抑制其分泌;CHA促进环磷酰胺处理的小鼠脾脏T和B淋巴细胞体外增殖,但对其NO分泌量影响不明显。结果提示:CHA可能通过影响淋巴细胞增殖和细胞因子分泌而表现免疫调节作用。

四种苏丹红染料对小鼠体内血液的影响

目的探讨苏丹红对小白鼠血液和组织器官的影响。方法取小鼠连续12 d腹腔注射不同剂量苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(0、40、80、160 mg/kg),末次给药24 h后采集血样,用血细胞分析仪检测血常规指标,毛细血管法测定凝血时间,剖腹取主要器官称重,计算脏器系数。结果苏丹红Ⅰ和Ⅱ组血液红细胞数明显减少,而苏丹红Ⅲ和Ⅳ组不明显,苏丹红不同剂量之间比较,低剂量苏丹红Ⅰ和高剂量苏丹红Ⅱ组比苏丹红Ⅲ和Ⅳ组血液红细胞数变化明显;苏丹红Ⅰ和Ⅱ组血液血红蛋白含量明显降低,而苏丹红Ⅲ和Ⅳ组血红蛋白含量变化不明显。四种不同剂量苏丹红组小鼠血液中血小板数量减少,随着剂量增加小鼠血液凝固时间延长。随着苏丹红剂量增加,苏丹红I和II组小鼠血液白细胞数比对照组明显增加,苏丹红Ⅲ和Ⅳ组白细胞数有增加趋势但差异不显著。与对照组比较,苏丹红组小鼠血液白细胞数明显增加、而淋巴细胞和单核细胞显著减少。随着苏丹红注射剂量增加,肾脏和脾脏脏器系数较对照组明显增大,肝脏脏器系数变化不明显。结论苏丹红对小鼠血液细胞、血红蛋白、血小板和凝血时间以及组织器官都有不同程度影响。

连翘酯苷对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖与分泌功能的影响

目的分析连翘酯苷(FS)对小鼠脾脏T和B淋巴细胞增殖、分泌NO和TNF-α的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。方法无菌操作分离小鼠脾脏,制备脾脏细胞并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刺激剂刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)以及不同浓度40、80、160μg/mL的FS共培养不同时间,采用MTT法检测T和B淋巴细胞的吸光度变化,ELISA和Griess法分别检测细胞分泌TNF-α和NO的水平。结果低浓度和中浓度FS对ConA诱导T淋巴细胞24 h和48 h后细胞增殖和存活率明显提高,诱导时间延长至72 h后FS明显抑制细胞转化;低浓度FS对LPS诱导脾脏B淋巴细胞24 h后细胞增殖和生存率显著提高;FS促进小鼠脾脏T和B淋巴细胞分泌NO;FS促进B淋巴细胞分泌TNF-α,中浓度FS促进T淋巴细胞分泌TNF-α而高浓度反而抑制其分泌。此外,FS对环磷酰胺(CY)处理小鼠的脾脏淋巴细胞体外增殖有明显影响,对细胞NO分泌影响不显著。结论结果提示FS可能通过影响小淋巴细胞增殖和细胞因子分泌而调节免疫细胞功能。

绿原酸对小鼠不同组织巨噬细胞增殖、分泌及吞噬功能的影响

为观察绿原酸(CHA)对小鼠不同组织巨噬细胞功能的影响,采用无菌操作制备小鼠腹腔、骨髓和脾脏巨噬细胞,体外培养在含有脂多糖(LPS)和绿原酸的RPMI1640培养液中,用MTT法检测细胞增殖,ELISA和Griess法分别分析细胞分泌TNF-α和NO的水平,瑞氏-吉姆萨染色法测定巨噬细胞吞噬能力。结果与对照组和LPS组相比,腹腔、脾脏和骨髓3种不同组织巨噬细胞CHA组和LPS联合CHA组A值均有所降低,即3种巨噬细胞增殖转化率均有所下降,3种不同组织巨噬细胞CHA组和CHA+LPS组NO分泌量明显增加,且具有剂量依赖性。较之LPS组,不同组织巨噬细胞CHA组TNF-α分泌量降低,而脾脏和骨髓巨噬细胞LPS联合CHA组分泌TNF-α量显著提高,腹腔巨噬细胞组不显著。CHA显著提高LPS刺激的腹腔巨噬细胞吞噬能力。此外,CHA可显著提高环磷酰胺处理小鼠脾脏和骨髓巨噬细胞存活率,但使脾脏和腹腔巨噬细胞分泌NO量显著减少。结果提示绿原酸对小鼠不同组织巨噬细胞增殖、TNF-α和NO分泌以及吞噬能力均有不同程度影响。

橙皮苷对小鼠抗氧化作用及抗氧化酶基因表达的影响

目的探讨橙皮苷(HDN)对机体抗氧化作用的影响。方法采用分光光度法、邻苯三酚自氧化法和Fe2+-邻二氮菲法检测HDN体外清除自由基、抑制线粒体肿胀和红细胞氧化溶血;实验小鼠灌服不同浓度HDN(0、80、160、320 mg/kg)连续12 d,ELISA和分光光度法检测小鼠组织中MDA含量,抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-PX)活力,RT-PCR技术分析抗氧化物酶mRNA表达水平。结果与对照组比较,HDN组自由基(·OH、O2-·、DPPH·)清除率明显提高,小鼠红细胞体外氧化溶血和线粒体肿胀显著降低;小鼠组织及血清中MDA含量降低,抗氧化酶SOD、CAT、GSH-PX活力明显高于对照组,组织中抗氧化酶mRNA(SOD、CAT、GSH-PX)表达上调。结论 HDN能够清除自由基,降低自由基引起的细胞氧化损伤,抑制过氧化物生成,上调抗氧化酶基因表达及提高酶活力,呈现良好的抗氧化作用。

连翘酯苷对内毒素作用下RAW264.7细胞功能的影响

为探讨连翘酯苷(FS)对内毒素(LPS)作用下RAW264.7细胞增殖、分泌NO和TNF-α、吞噬功能的影响。收集处于对数生长期细胞,用含10%胎牛血清的RPMI1640培养细胞,在培养液中分别加入脂多糖(LPS)以及不同浓度40、80、160μg/mL的FS共培养。采用MTT法检测细胞增殖,Griess和ELISA法分别检测RAW264.7细胞分泌NO和TNF-α量,染色法检测细胞吞噬能力。结果表明:低、中剂量FS可显著促进细胞增殖,而中和高剂量FS可缓解LPS对细胞的刺激作用;与LPS组比较,FS对LPS刺激的RAW264.7细胞分泌NO影响不明显,但中、高剂量FS明显促进RAW264.7细胞分泌;LPS与FS均能提高巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力。FS对RAW264.7细胞增殖、分泌NO和TNF-α以及吞噬功能都有影响,结果提示这可能是连翘酯苷调节细胞免疫功能的机制之一。

紫衫醇对小鼠不同组织巨噬细胞功能的影响

为了探讨紫杉醇(Paclitaxel,PA)对小鼠不同组织巨噬细胞增殖和功能的影响。无菌操作制备小鼠腹腔、骨髓和脾脏巨噬细胞,在体外细胞培养体系中分别加入不同浓度40、80、160 ng/mL的PA和脂多糖(LPS)共培养,采用MTT法检测细胞增殖,ELISA和Griess法分别检测细胞分泌TNF-α和NO量,瑞氏-吉姆萨染色法测定腹腔巨噬细胞吞噬能力。结果表明:PA促进腹腔巨噬细胞和LPS诱导的腹腔和骨髓巨噬细胞增殖,但抑制脾脏和骨髓巨噬细胞以及LPS诱导的脾脏巨噬细胞增殖;PA抑制不同组织巨噬细胞分泌TNF-α,但促进腹腔和脾脏巨噬细胞分泌NO;PA提高了腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。PA对小鼠不同组织巨噬细胞的免疫功能均有影响,这为进一步阐明PA的免疫调节机理提供了新的理论依据。

地鳖提取物制备和体外抗氧化活性的研究

为研究地鳖不同提取物的体外抗氧化活性。分别通过蛋白酶水解、水提法制备地鳖多肽、多糖和水提物,采用邻苯三酚自氧化、Fe2+-邻二氮菲法和分光光度法分别检测地鳖不同提取物对超氧阴离子自由基(O2-·)、羟自由基(OH·)和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除,分光光度法分别检测红细胞氧化溶血和肝脏线粒体肿胀吸光度值,硫代巴比妥酸(TBA)法测定小鼠不同组织丙二醛(MDA)含量。地鳖多肽、地鳖多糖,地鳖水提物组对O2-·、OH·和DPPH·3种自由基的清除率显著低于阳性对照组,随着提取物浓度的升高对自由基清除率增加;随着地鳖3种提取物浓度提高红细胞溶血吸收值比溶血组显著降低,地鳖水提物组红细胞溶血率明显低于地鳖多肽和多糖组。地鳖多肽组肝脏MDA生成抑制率最高,地鳖多糖组肾脏MDA抑制率高于地鳖多肽和水提物组,随着地鳖提取物浓度提高各组织中MDA生成抑制率升高;随着反应时间延长地鳖提取物组肝脏线粒体吸光度值高于肿胀对照组。地鳖多肽、多糖和水提物有效的清除3种自由基,抑制红细胞溶血和肝脏线粒体肿胀,保护肝肾组织氧化损伤,具有一定程度体外抗氧化活性。

苏丹红致小鼠氧化损伤的研究

目的探讨苏丹红(SD)对小鼠肝脏和肾脏功能的影响。方法小鼠连续腹腔注射不同剂量SDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(0、40、80和160 mg/kg)12 d,然后采用TBA和ELISA法分别检测小鼠肝脏和肾脏组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果低剂量SDⅡ和SDⅢ组肝脏MDA含量明显高于对照组和SDⅠ及SDⅣ组,高和中剂量4种SD组MDA值也明显高于对照组,但中剂量SD组之间差异无统计学意义;低剂量SDⅠ和高剂量4种SD组肾脏MDA值比对照组显著提高,其中高剂量SDⅡ组与其他3组比较差异有统计学意义,中剂量除SDⅡ组其他3种SD组MDA值也明显增加。与对照组比较,低剂量4种SD组和中剂量SDⅠ组肝脏SOD明显增加,但高剂量4种SD组与对照组差异无统计学意义;3种剂量SDⅡ和SDⅢ组肾脏SOD明显提高,而SDⅣ组肾脏SOD活性显著降低。结论结果表明SDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ致小鼠肝脏和肾组织不同程度的损伤。