和厚朴酚对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究和厚朴酚(Honokiol,HON)对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤(I/R)的影响并初步探讨其可能机制。方法 SD大鼠分为3组。对照组假手术+腹腔注射HON 10^(-7)g/kg,I/R组缺血30 min再灌注120min,HON组I/R+腹腔注射HON 10^(-7)g/kg。观测各组大鼠左心室血流动力学、心电图(ECG)和血浆肌酸激酶(CK)的变化,分离成年大鼠心肌细胞,Ion Optix光谱荧光检测系统记录HON对钙瞬变的影响。结果 (1)与对照组比较,I/R组大鼠左心室收缩末压(LVSP)、左心室最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室最大下降速率(-dp/dtmax)明显降低(P<0.05),左心室舒张末压(LVEDP)明显升高(P<0.05);心律失常的发生率和血浆肌酸激酶(CK)明显升高(P<0.05)。(2)与I/R组比较,HON组LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax明显升高(P<0.05),LVEDP明显降低(P<0.05);同时,再灌注时出现心律失常时间明显延迟(P<0.05),再灌注后的前3 min内发生心律失常的时间总和和频率明显下降(P<0.05),室颤的发生率明显减少(P<0.05);血浆CK的活性显著降低(P<0.05)。(3)3μmol/L HON明显降低成年大鼠心肌细胞钙瞬变幅度。结论 HON能改善心肌I/R时心功能降低,并拮抗再灌早期出现的心律失常,机制可能与减少细胞内游离钙、减轻I/R时钙超载有关。

Cl^-通道及Ca^(2+)通道阻断剂对ATP触发的牛脑血管平滑肌细胞Ca^(2+)内流作用的影响

采用Fura 2荧光测定胞浆游离Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i)变化技术 ,在培养的牛脑中动脉平滑肌细胞上 ,观察电压依赖Ca2 + 通道 (VDCC)抑制药尼莫地平 ,非电压依赖Ca2 + 通道 (NVDCC)SK&F96365以及Cl-通道抑制药呋塞米 ,印防己毒素对ATP引起的[Ca2 + ]i 反应的影响 .实验表明ATP可使 [Ca2 + ]i 呈现双相升高反应 ,即快速峰相及随后持续稳定的平台相 .尼莫地平 ,SK&F96365及印防己毒素对ATP触发的Ca2 + 内流无明显影响 ,而呋塞米能呈浓度依赖性地抑制ATP触发的Ca2 + 内流 .提示ATP触发的牛脑中动脉平滑肌细胞Ca2 + 内流是经SK&F96365不敏感的NVDCC ,与呋塞米敏感的Cl- 通道开放有关 .

氯丙嗪对谷氨酸诱导大鼠脑皮质受损神经细胞的保护作用

目的 :观察氯丙嗪 (CPZ)对谷氨酸 (Glu)诱导的大鼠大脑皮质神经细胞兴奋毒性的影响。方法 :用倒置显微镜观察神经细胞形态的变化 ,用Trypanblue染色法观察细胞生存率 ,测定乳酸脱氢酶 (LDH)以定量反映细胞损伤程度。结果 :5 0 μmol·L 1 Glu使神经细胞死亡率升高 ,LDH释放增加 35 1% ;1,10 μmol·L 1 CPZ能改善神经细胞生长 ,降低细胞死亡率 ,减少LDH的释放。结论

谷氨酸对牛大脑中动脉平滑肌细胞胞浆静息Ca^(2+)和ATP触发的Ca^(2+)内流的影响

目的 观察谷氨酸对牛大脑中动脉平滑肌细胞有无直接的激动作用以及对ATP触发的Ca2 + 内流有无影响 ?方法 采用Fura 2荧光法测定胞浆内Ca2 + 变化技术 ,在培养的乳牛大脑中动脉平滑肌细胞上观察药物的作用。结果 谷氨酸 (10～ 2 0 0 μmol·L-1)不能增加或减少细胞胞浆静息游离Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]i)和ATP触发的Ca2 + 内流 (谷氨酸 :10～ 40 0 μmol·L-1)。结论 谷氨酸对大脑中动脉平滑肌细胞信息Ca2 + 水平和Ca2 + 内流均无直接的影响。

氯通道阻断剂对大鼠主动脉环收缩和舒张反应的影响

目的 观察氯通道阻断剂DIDS和呋塞米(furosemide)对苯肾上腺素 (phenylephrine,PHE)引起的收缩反应和ATP引起的内皮依赖性舒张效应的影响。方法 采用内皮完整和去内皮的大鼠离体主动脉环 ,进行等长张力实验。结果 DIDS(1～ 30 0 μmol·L-1)和furosemide(10～ 32 0μmol·L-1)均浓度依赖性抑制PHE引起的收缩反应 ,但对内皮完整的血管环抑制率和去内皮的血管环抑制率不同 ,DIDS的IC50 分别为 (12 0± 8 0 ) μmol·L-1和 (2 8 3± 7 3)μmol·L-1;furosemide的IC50 分别为 (17 9± 6 6 ) μmol·L-1和 (41 0± 15 6 ) μmol·L-1。DIDS(10 0 μmol·L-1)对 10μmol·L-1和 10 0 μmol·L-1的ATP舒张无影响 ,但可增加 1mmol·L-1ATP引起的舒张效应 (P <0 0 5 ) ;furosemide(2 0 0μmol·L-1)对 10 μmol·L-1的ATP舒张无影响 ,但可使 10 0μmol·L-1ATP和 1mmol·L-1ATP引起的舒张效应增强 (P<0 0 5 )。结论 DIDS和furosemide可抑制PHE引起的收缩 ,且对带内皮血管环的抑制率均大于去内皮血管环的抑制率 ,并可增加ATP引起的内皮依赖性舒张。

医学课程改革的立体化探索与实践——以药理学教学为例

为贯彻国家教育部和卫生部要求医学院校应积极开展纵向或(和)横向综合的课程改革,必须积极开展以"学生为中心"和"自主学习"为主要内容的教育方式和教学方法改革,广州医学院药理学教学团队以PBL教学模式为主线,将医学基础课各学科的内容与临床课程内容不断整合,逐步建立起以问题和案例为基础、W-PBL课程为互动、高端智能模拟人为补充的立体式现代医学教学形式和手段,实践结果显示教学效果显著。

赛庚啶对谷氨酸诱导的神经元损伤的影响及可能机制

目的 :观察赛庚啶 (Cyproheptadine,CPH)对谷氨酸 (Glutamate ,Glu)诱导的大鼠大脑皮质神经细胞兴奋毒性的影响及其可能机制。方法 :实验分 5组 ,①对照组 ;②Glu组 ;③Glu +1μmol·L-1CPH组 ;④Glu +10 μmol·L-1CPH组 ;⑤Glu +10 0 μmol·L-1CPH组 ,用倒置显微镜观察神经细胞形态的变化 ,用Trypanblue染色法观察细胞死亡率 ,测定乳酸脱氢酶 (LDH)和总过氧化物歧化酶 (T SOD)的变化。结果 :5 0 μmol·L-1Glu使细胞死亡率升高 ,LDH释放显著增加 ,T SOD降低。 10 ;10 0 μmol·L-1CPH能减少LDH的释放 ,降低细胞死亡率 ,1;10 ;10 0 μmol·L-1CPH还能升高T SOD。结论 :CPH对Glu介导的神经元损伤有保护作用 ,其机制可能与提高T SOD的活性 ,使神经细胞抵抗自由基攻击的能力和抗脂质过氧化作用增强有关。

复元口服液增强肠功能的药效学研究

目的 :观察复元口服液 (FYOL)对肠管运动的调节作用。方法 :测定FYOL对正常及肠运动功能低下的小鼠小肠推进功能的影响、对正常大鼠在体肠管运动的影响、对大鼠微循环的影响以及对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响。结果 :FYOL能增强正常及阿托品所致的肠运动功能低下的小鼠小肠推进功能 ,能增强大鼠在体肠蠕动强度 ,但对蠕动频率无明显影响。FYOL能改善血瘀模型大鼠肠系膜微循环和抑制醋酸所致小鼠腹腔炎性渗出。结论 :FYOL具有促进肠蠕动、改善微循环、抗炎的作用。

盐酸普罗帕酮注射液细菌内毒素的鲎试验研究

目的 探讨盐酸普罗帕酮注射液进行细菌内毒素检查的可行性。方法 采用凝胶法和动态浊度法鲎试验对样品中的细菌内毒素进行定性和定量检测。结果 3批盐酸普罗帕酮注射液稀释至 35 0mg·L-1和 175mg·L-1时对细菌内毒素检查有明显的干扰作用 ,而稀释至 87 5mg·L-1或更低浓度时则没有干扰作用 ;所测样品 (3 5 g·L-1)的细菌内毒素含量均小于 5 0 0 0EU·L-1,凝胶法和动态浊度法鲎试验均证实了这一点。结论 可建立盐酸普罗帕酮注射液的细菌内毒素检查法 ,日常细菌内毒素检查时可将样品稀释至 87 5mg·L-1以排除其干扰作用。

紫背天葵提取物对电离辐射损伤的保护作用

目的:研究紫背天葵提取物对电离辐射损伤的预防保护作用。方法:将雌性SD大鼠随机分为紫背天葵提取物低浓度给药组(100 mg/kg)和高浓度给药组(500 mg/kg)、辐射模型组(4 Gy)和正常组,大鼠连续灌胃给药,第13天用4 Gy的X线全身照射1次,照射后继续给药,至第17天实验结束,比较各组大鼠的外周血白细胞计数、骨髓有核细胞数、血清丙二醇(MDA)含量的变化。结果:与辐射模型组比较,低浓度给药组(100 mg/kg)的外周血白细胞数明显升高(P<0.01),血清MDA含量明显降低(P<0.01);高浓度给药组(500 mg/kg)的骨髓有核细胞数明显升高(P<0.01)。结论:紫背天葵提取物对电离辐射损伤具有一定的预防保护作用。

注射用苦参素细菌内毒素检查法的研究

目的探讨注射用苦参素进行细菌内毒素检查的可行性。方法采用凝胶法和动态浊度法鲎试验对样品中的细菌内毒素进行定性和定量检测。结果3批注射用苦参素稀释至500mg/L和250mg/L后对细菌内毒素检查均没有干扰作用;所测样品的细菌内毒素均小于1000EU/g,凝胶法和动态浊度法鲎试验均证实了这一点。结论可建立注射用苦参素的细菌内毒素检查法,日常细菌内毒素检查时可将样品稀释至500mg/L以下以排除其干扰作用。

黄芪多糖对压力超负荷诱导的大鼠心肌肥大的影响

目的:探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)对压力超负荷所致大鼠心肌肥大的抑制作用。方法:SD大鼠随机分为5组:假手术手组、模型组、APS低剂量组(AP1)、APS高剂量组(AP2)和卡托普利组。给药8周后,分别进行心脏超声和HE染色检测心脏肥大指数及形态学改变。结果:超声检测发现,与假手术组相比,模型组左右心室质量比明显增加,舒张期左心室容量、左心室射血分数和左心室短轴缩短速率均明显降低;AP2组与模型组相比,以上指标均有显著性改善,而AP1组和模型组比较无明显差异。HE染色显示,模型组肌细胞排列疏松、肥大,AP1组和AP2组细胞排列整齐,有少量肥大细胞夹杂。结论:高剂量APS对压力超负荷大鼠的心肌肥大有明显保护作用。

厚朴酚对大鼠主动脉收缩的影响

目的:观察厚朴酚对大鼠主动脉收缩的影响.方法:用去内皮大鼠胸主动脉观察厚朴酚对血管环的直接作用及对高钾、苯肾上腺素引起的收缩的对抗作用;观察厚朴酚预孵育后血管环对高钾及苯肾的反应性.结果:直接给药厚朴酚(0～300μM)对胸主动脉基础张力无作用,对高钾、PHE已引起的收缩作用无影响;厚朴酚预孵育5min能剂量依赖性的抑制高钾及PHE引起的收缩作用.结论:厚朴酚预孵育可抑制血管对高钾及PHE的反应性,其机制可能与细胞膜上的电压依赖性钙通道及细胞内钙的释放有关系.

PBL教学法在药理学教学中的实践和应用体会

PBL教学法是一种基于问题,以学生为主体的先进教学模式。近年来广州医学院药理教研室将PBL教学模式引入药理学理论教学中,实践证明PBL教学法能激发学生对药理学的学习兴趣,有助于自主学习、创新能力的培养和综合素质的提高,为深化医学教育改革、探索优秀医学教育模式奠定基础。

豚鼠听力衰退模型的AFLP分子标记筛选

目的获取扩增片段长度多态性(AFLP)标记,揭示老年性耳聋的发病机制。方法腹腔注射D-半乳糖致衰老豚鼠模型,另加噪音刺激建立豚鼠听力衰退模型,并列模型组和生理盐水对照组中的听力值极端表型个体进行AFLP标记的筛选,并在空白对照组中验证。结果14对选择性扩增引物仅扩增到1个能将两类极端表型绝然区别开来的多态性条带,其预测表型的准确度在83%以上。结论AFLP筛选技术具有较高的功效,所得的标记较以往线粒体标记的有效性高。

ox-LDL对巨噬细胞内皮脂肪酶表达的影响

目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对鼠源RAW264.7巨噬细胞内皮脂肪酶(EL)表达的影响。方法:用ox-LDL(0～100 mg/L)孵育RAW264.7细胞24 h使其活化,或者用PDTC(NF-κB抑制剂)预孵育RAW264.7细胞30 min再与ox-LDL(50 mg/L)共同孵育24 h;应用Western blotting检测EL和NF-κB p65的表达。结果:ox-LDL孵育RAW264.7细胞明显增加EL表达(P<0.05);ox-LDL(50 mg/L)孵育RAW264.7细胞15～30 min可激活NF-κB,用NF-κB抑制剂PDTC处理后则明显抑制ox-LDL诱导的EL表达增加(P<0.05)。结论:ox-LDL可明显增加RAW264.7细胞EL的表达,可能与NF-κB活化有关。

以治疗推理为重点的临床药理学教学新理念

合理开处方是医生的一项重要技能,而临床药理学教学对培养本科生发展这项技能非常重要。文章以培养并发展医学本科生的治疗能力为目标,主要阐述临床药理学教学的重点是讲授治疗推理。而以目前的认知心理学和医学教学理论为基础,对疾病的发生和结果进行上下文联系进行临床药理学教学,则是指导学生获得成功治疗技能的一种有效方法。

一氧化氮合酶抑制物对大鼠离体乳头肌收缩力的影响及其机制

目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制物对电刺激大鼠离体左心室乳头肌收缩力的影响及其机制。方法:制备大鼠离体左心室乳头肌条,用Muscle Research System记录电刺激(频率1 Hz、波宽5 ms)诱导心肌收缩张力。结果:与正常对照组比较,用30μmol/L内源性NOS抑制物非对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)孵育乳头肌60 min后,肌条对电刺激收缩张力明显降低;用相同浓度的外源性NOS抑制物NG-硝基-L-精氨酸孵育60 min,均可产生与ADMA相似的抑制作用。用1 mmol/L一氧化氮(NO)合成前体L-精氨酸或10μmol/L NO供体硝普钠预孵育肌条15 min,再与ADMA共孵育60 min,均可逆转ADMA对心肌收缩的抑制作用。用10μmol/L蛋白激酶C抑制剂chelerythrine或抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸预处理,亦可逆转ADMA的抑制作用。结论:NOS抑制物对电刺激大鼠离体左心室乳头肌收缩具有抑制作用,可能是由于减少NO生成、活化蛋白激酶C、使氧化应激增加所致。