SV40启动子在烟草体内的驱动特性研究

根据SV40启动子序列设计引物,PCR扩增该启动子后,成功构建了具有SV40启动子和GUS报告基因的植物表达载体pLpPSG,并将重组质粒转化到烟草叶片中.通过SV40启动子驱动的GUS基因在烟草叶片内的瞬时性表达,研究了该启动子在植物基因表达中的驱动特性.结果表明:SV40启动子可启动GUS基因在烟草体内的表达,其提高基因表达水平达到2×35S启动子的(88.5±19.2)%.

基于bchY的内蒙古2个盐碱湖中不产氧光合细菌多样性的分析

为进一步了解和认识APB及其在盐碱湖中的生态功能及其作用机制,通过构建和分析不产氧光合细菌bchY基因克隆文库,揭示其中不产氧光合细菌的多样性、群落结构及其与生存环境的关系。样品采自内蒙古浑善达克沙地盐碱度较高的扎格斯台和达格淖2个湖的水样,提取了样品总DNA。以bchY作为检测APB的通用标记,用PCR扩增方法构建了其bchY文库,并对扩增产物进行了测序与系统发育分析。结果表明,达格淖湖和扎各斯台湖均为富营养化盐碱湖,且两湖盐度相差很大。利用bchY文库中核酸序列对应的氨基酸序列进行分析,两文库覆盖度均达93.0%以上,代表性较强,共得到108条bchY编码的氨基酸序列,以cutoff=0.03和0.12分别在种和属水平进行同源性和系统发育分析,在cutoff=0.03分为17个OTUs。两湖的多样性指数(Shannon-Weaver和Simpson)和均匀度指数(Evenness)较接近,其种群多样性程度和均匀程度比较相似,但二者的Chao1都不太高,说明两湖APB的多样性较低,种群不丰富。达格淖湖的Margalef指数较高,说明前者物种数目比后者多。两湖的不产氧光合细菌均属Alphaproteobacteria纲,最优势菌群均为Roseibacterium elongatum。同源性及系统发育性分析表明,达格淖湖和扎各斯台湖中不产氧光合细菌的主要类型为AAPB-like类群、多样性低。

31份苜蓿种质材料的遗传多样性及亲缘关系分析

运用RAPD分子标记技术,对31份苜蓿材料的遗传多样性及亲缘关系进行检测。样品采用单株取样法(每个样本取11个单株),31份苜蓿材料共计341个单株,选用8个RAPD引物,共扩增出条带123条,其中多态性条带为121,占总位点的98.37%。Shannon信息指数为0.4572,Nei’s基因多样性指数为0.2967,种群间遗传分化系数为0.2697,说明苜蓿的遗传变异主要发生在种群内。供试31份种质材料根据遗传距离聚类可分为5类,其中种群25与种群42亲缘关系最近;种群2和种群17亲缘关系最远。种群27为1份特异的紫花苜蓿材料;种群2为1份特异的黄花苜蓿材料。

不同作物中维生素E含量的测定和比较

该研究利用HPLC法测定了玉米、大豆和油菜不同品种籽粒中维生素E的含量,并对3种作物及每种作物不同品种之间的维生素E含量进行了比较分析。结果表明:3种作物的VE总量为油菜>大豆>玉米;活性最高的α-生育酚含量为油菜>玉米>大豆。每种作物不同品种间VE总量与α-生育酚含量比较发现,玉米不同品种间的变化最大,其VE总量与α-生育酚含量的变化范围分别在12.05～128.63mg/100g之间和0.93～52.01mg/100g之间。这些数据为将来的基因工程育种、食用油选购等提供依据。

芦荟蒽醌类物质的提取及其抑菌性研究

本试验利用超声波提取库拉索芦荟中蒽醌类物质,测定其含量,并对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌进行抑菌性研究。用滤纸片法、固体稀释法及最小抑菌浓度法(MIC)分别检测芦荟蒽醌类物质对各种菌的抑菌性,并比较分析3种方法的抑菌效果。由固体稀释法测定芦荟蒽醌提取液的抑菌效果可知,蒽醌类物质百分浓度越高,菌落数越少,显示出越高的抑菌性。最小抑菌浓度法(MIC)测出,芦荟蒽醌提取液对大肠杆菌、金色葡萄球菌的MIC为90%,对枯草芽孢杆菌的MIC为80%,显示出MIC都较高,说明低浓度的芦荟蒽醌类抑菌能力有限,需要较高的浓度才能抑制菌生长。

不同的预处理方式对甜高粱秸秆纤维素酶降解效率的影响

对甜高粱秸秆进行了各种预处理,包括机械处理、高温处理、超声波处理、无机溶剂处理、有机溶剂处理等,比较了不同的预处理方式对甜高粱秸秆纤维素酶降解效率的影响,得出其影响程度顺序是:高温>超声波>有机溶剂>粉碎度>稀酸/碱。温度影响中干燥高温效果最佳,每0.1g秸秆粉末可产生还原糖8.3116mg。超声波处理在无溶剂(无水)条件下,在相同的时间产生还原糖的量是有溶剂(有水)时的5倍。有机溶剂方面,丙酮的作用最为显著,在30min内每0.1g秸秆粉末可以产生还原糖4.3736mg。在机械处理中还原糖的量随着粉碎目数的增大而增加。此结果对工业生产提供了有价值的建议。

肃北牦牛乳—牧草—土壤系统研究分析

为了解甘肃肃北牦牛乳—牧草—土壤之间的生态联系,收集核心放牧区土壤、牧草及肃北牦牛初乳和常乳,检测土壤矿物质元素、牧草营养成分含量及牛乳理化性质,并将检测结果与现有相关文献进行比较分析。结果显示,与甘南牦牛产地(玛曲和碌曲)相比,肃北土壤中含有大量的镁、铝和钙等常量元素,以及较多的镍、钴和硒等微量元素。肃北牧草中粗纤维和中性洗涤纤维含量明显高于玛曲和碌曲两地,但粗脂肪含量和总磷含量较低。基于其他数据分析显示,肃北牧草整体质量低于甘南两地。初乳分析结果表明,与环湖牦牛和甘南牦牛相比,肃北牦牛乳的乳密度和蛋白质含量明显更高,冰点更低。肃北牦牛常乳也表现出较高的乳糖含量和较低的冰点,说明肃北牦牛乳具有较高的乳品质和营养价值。

肃北牦牛屠宰性能及肉品质分析

为研究肃北牦牛的屠宰性能和肉品营养特征,阐述肃北牦牛潜在的种质资源特性,选取10头肃北牦牛进行屠宰测定,并与文献报道的甘南牦牛、环湖牦牛、麦洼牦牛、肃南牦牛、金川牦牛、类乌齐牦牛、高山牦牛、雪多牦牛和亚丁牦牛数据进行比较分析。屠宰性能分析结果显示,肃北牦牛的心脏和肺脏重量均高于环湖牦牛和麦洼牦牛,宰前重、胴体重、眼肌面积、屠宰率、净肉率、肉骨比均明显高于麦洼牦牛、肃南牦牛和环湖牦牛;肉品质分析结果显示,肃北牦牛肉与其他品种牦牛肉相比,L*值偏低、a*值偏高、嫩度中等;营养成分检测结果显示,肃北牦牛肉中的钙含量高于环湖牦牛和亚丁牦牛,磷含量高于亚丁牦牛和甘南牦牛。综上,肃北牦牛具有良好的屠宰性能及优良的肉品质和营养价值。

肃北牦牛肉质特性分析

为揭示肃北牦牛肉中氨基酸和脂肪酸含量的品种特性,选择自然放牧且体重相近的肃北成年牦牛10头(公、母各半),屠宰后采集背最长肌,测定氨基酸和脂肪酸含量。并与已报道的成年金川牦牛肉、甘南牦牛肉、高山牦牛肉、西门塔尔牛肉、甘肃天祝黄牛肉以及宁夏盐池黄牛肉中相应指标进行对比分析。结果表明,肃北牦牛肉中的必需氨基酸占总氨基酸的40%,氨基酸评分112.64,与金川牦牛肉、甘南牦牛肉和高山牦牛肉结果相近,且高于WHO推荐值。肃北牦牛肉中的异亮氨酸、赖氨酸、谷氨酸以及鲜味氨基酸含量分别比西门塔尔牛肉高43.8%、18.5%、18.3%和17.0%,而肃北牦牛肉中的苯丙氨酸、赖氨酸、谷氨酸以及鲜味氨基酸含量分别比甘肃天祝黄牛肉高33.8%、24.4%、21.8%和16.4%。肃北牦牛肉中的单不饱和脂肪酸含量46.95%,相较于西门塔尔牛肉和宁夏盐池黄牛肉分别高46.5%和30.2%;肃北牦牛肉中的多不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸比值为0.40,DHA含量0.06%。综上,肃北牦牛肉具有丰富的氨基酸和脂肪酸,以及较高的营养保健价值和更浓郁的风味。

鸡胚致病性大肠埃希氏菌及沙门氏菌的分离及鉴定

某鸡场孵化过程中陆续出现死胚,死胚率达27.6%,没有明显的死亡高峰期,剖检不同日龄死胚15只,主要病变为浆液纤维素性心包炎,肝周炎,尿囊膜水肿、坏死和出血,脾肿大,蛋黄浓稠混浊呈绿色。从死胚卵黄囊、肝、脾、心血中分离出致病性大肠埃希氏菌8株[E94—1—8],血清鉴定型为 O78,汤卜逊沙门氏菌3株[S94—1—3],抗原式为6,7:K:1,5。

国内细菌纤维素酶基因的克隆进展

随着能源问题日益突出,各国逐渐把对纤维素的降解研究作为一项重要的研究课题。而纤维素的酶降解是利用纤维素的一个有效途径。目前主要对真菌纤维素酶的研究日趋成熟,且真菌纤维素酶的活性比较高,像里氏木霉、绿色木霉、康氏木霉等。对细菌纤维素酶基因克隆方面的研究也有很多报道,但普遍认为细菌纤维素酶活性比真菌纤维素酶的活性低。而细菌作为世界分布最广的生物具有非常大的开发价值空间。文章主要介绍目前对细菌纤维素酶基因的克隆领域的研究现状,并作了一个简要的概括和分析。

鸡胚病原菌的分离与鉴定

鸡胚病原菌的分离与鉴定图布丹扎布，宝力德，禹旺盛，郭景芳（内蒙古农牧学院动物医学系，呼和浩特０１００１８）１９９４年３～４月，呼和浩特市某鸡场自产种蛋孵化过程中陆续出现死胚，共死５９０６只，死亡率达２７．６％。剖检不同日龄死胚１５只，呈现浆液性纤维素...

柠条锦鸡儿CkLEA4-1基因的克隆及表达分析

为研究胚胎发育晚期蛋白(LEA)在柠条中的生物学功能,从已构建的柠条锦鸡儿干旱胁迫抑制削减杂交文库中筛选到一条LEA蛋白编码基因,并采用RT-PCR法进行克隆。所得LEA基因的开放阅读框(ORF)长1 119 bp,编码373个氨基酸的蛋白质,命名为CkLEA4-1。结合序列比对与系统进化分析结果,推断CkLEA4-1属于5族LEA蛋白。利用实时荧光定量PCR技术对CkLEA4-1在干旱、高盐等逆境胁迫条件下的表达情况进行初步研究,结果表明,CkLEA4-1受到不同程度的诱导,推测该基因可能与柠条锦鸡儿响应逆境胁迫有关。研究还成功构建了CkLEA4-1的过表达载体p Can G-CkLEA4-1,得到转基因纯合体株系,为进一步研究柠条锦鸡儿CkLEA4-1基因的功能提供了材料。

内蒙古额吉淖尔盐碱湖嗜盐古菌的抗生素抗性及分泌的嗜盐菌素的抑菌性

从内蒙古额吉淖尔湖盐碱土样分离得到一株属于Natrinema属的嗜盐古菌。对其进行了抗生素抗性实验以及对其产生的嗜盐菌素进行了抑菌性研究。结果表明诺氟沙星对该菌具有较强的抑菌作用,头孢氨苄对该菌具有微弱的抑菌作用。通过测定抑菌圈的大小表明该菌株对抗生素具有一定的抗性。该菌株所生产的嗜盐菌素对蛋白酶K较敏感,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有抑菌作用。

内蒙古额吉淖尔盐碱湖一株产视紫红质的极端嗜盐古菌的分离及其bop基因核心序列及最适生长条件的分析

从内蒙古额吉淖尔湖分离得到一株产视紫红质的极端嗜盐古菌,初步鉴定为属于Natrinema属,并扩增出了其bop基因,该bop基因序列已在Genbank中注册,编号为KF863690,分析了其核心序列。结果表明bop基因开放阅读框为303 bp,编码101个氨基酸。blastp结果表明该蛋白属于Bac-rhodopsin蛋白家族,具有典型的细菌视紫红质蛋白结构域。利用BLAST进行相似性分析发现bop编码蛋白氨基酸序列与Genbank中编号AAS87571.1、WP-007110705和AFB77278.1的视紫红质蛋白相似性达到98%以上。此结果表明视紫红质蛋白在细菌及古菌中结构上具有很高的保守性,与其质子泵功能紧密相关。。最后分析了该菌株的最适生长条件。该菌株在分离培养基中适宜生长的NaCl浓度范围为1.0～3.0 mol/L,适宜生长pH为6.5～8.5,适宜生长镁离子浓度为0.4～0.8 mol/L。通过分析比较得出该嗜盐古生菌株生长最适NaCl盐浓度为1.5 mol/L,最适pH为7.5,最适镁离子浓度为0.4 mol/L。该实验结果为今后进一步研究产视紫红质的极端嗜盐古生菌株的生理生化特征及遗传学特征奠定了基础。

内蒙古盐碱湖一株编码细菌视紫红质的嗜盐古菌bop基因全序列克隆及表达

细菌视紫红质(Bacteriorhodopsin,BR)是由bop基因编码的唯一膜蛋白,具有光推动质子泵的作用,为生命活动提供所需要的能量。为了研究高表达且具有生物活性的BR蛋白,应用PCR扩增技术,从内蒙古额吉淖尔盐碱湖分离得到的一株嗜盐古菌中扩增得到bop基因全序列;并构建了具有His6标签的原核表达载体p ET28a-IM-1,转化到大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达BR;并对表达产物进行SDS-PAGE鉴定分析。结果显示获得的bop基因全序列开放阅读框为672 bp,编码223个氨基酸,含有重组质粒p ET28a-IM-1的阳性菌株在IPTG诱导下高效表达了分子量约为25 k Da的BR蛋白。同源性分析表明该BR蛋白结构在古菌与细菌中具有相对较高的保守性,这与其质子泵功能密切相关。该BR蛋白为新发现的细菌视紫红质,其基因序列已递交Gen Bank,其登录号为KT873301。

采油污水对斑马鱼SOD活性的影响

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是生物防御系统中重要的一种酶。通过研究采油污水对生物体内SOD活性的影响,可以判断采油污水对生物体产生的毒害以及对环境产生的污染。本实验采用斑马鱼为实验材料,通过比色法和酶液提取技术,以不同浓度的采油污水胁迫培养斑马鱼,然后测定斑马鱼的头部、肌肉和内脏中SOD活性。实验结果显示,在采油污水胁迫培养的斑马鱼体内的SOD活性的变化与污水的浓度也就是污染物胁迫强度有着一定的关系。其中以斑马鱼头部的SOD活性变化最为显著,在无采油污水胁迫的对照组中斑马鱼头部的SOD活性为16.73U/mg,而在采油污水稀释浓度为0.03的全致死组中培养的斑马鱼头部的SOD活性为239.09U/mg。说明在没有采油污水污染的情况下斑马鱼的SOD基础活性比较低,在全致死浓度时其活性在斑马鱼头部中上升了14倍左右,变化非常明显。因此可以通过检测斑马鱼头部的SOD活性的变化去判断斑马鱼是否受到水中污染物的毒害,进而判断环境污染的程度,为环境检测提供实验依据,为采油污水的综合化处理和环境污染的治理提供简便的检测手段。另外本研究发现在大庆地区采油污水中斑马鱼全致死浓度为该污水的33倍稀释浓度,反映出目前大庆地区的水源被采油污水污染较严重。采油污水的排放质量不达标,急需加强对采油污水的排放进行治理,改善大庆地区水源环境质量。

甘肃盐池湾国家级自然保护区黑颈鹤繁殖习性的观察

2007年4月—2009年10月,在甘肃盐池湾国家级自然保护区对黑颈鹤繁殖习性进行了观察。结果表明,黑颈鹤每年4月迁徙至甘肃盐池湾国家级自然保护区进行繁殖,常活动于沼泽、湖泊、湿地一带,每年迁徙至保护区的黑颈鹤约30～40只,至10月中旬离去。通常一雄一雌制,迁徙时集中后成群离去。在甘肃盐池湾国家级自然保护区居留期约为180d左右。

山羊痘病的防制

2007年8月初，甘肃省肃北县党城湾镇浩布拉村的牧民报告山羊暴发疾病，经笔者临床诊断确诊为山羊痘病。该病是由羊痘病毒引起，主要存在于病羊的痘疮、浆液及水泡皮内。其感染主要通过呼吸道，也可通过污染的饲料、饮水、用具、垫草等，经损伤的皮肤黏膜及消化道感染。不同年龄的羊均可感染。

牧区运输检疫工作中存在的问题

随着人们生活水平的不断提高，对畜产品的需求越来越多，对动物及产品质量的要求也越来越高。动物和动物产品在各地区之间流通日益频繁，这对动物疫病的传人和传出，以及畜牧业的健康发展带来了威胁。《中华人民共和国动物防疫法》实施10年了，但由于有关细则还没出台，各省所实施的细则有所不同，收费标准不统一，给动物检疫工作带来了一些不可忽视的问题，直接影响着动物检疫工作的进一步开展。