微媒体结合翻转课堂在医学机能学实验教学中的应用研究

目的探究微媒体结合翻转课堂在医学机能学实验教学中的实施效果。方法选择2021年9月—2021年12月内蒙古医科大学2019级临床医学1班学生作为研究对象,共40名。本研究机能学综合实验“急性右心功能不全及抢救”和“急性肝性脑病及抢救”采用微媒体结合翻转课堂,实现线上线下教学的有机结合。“急性呼吸功能不全及抢救”和“急性肾功能不全及抢救”采用传统教学模式。通过问卷软件进行调查,完成学生对传统教学模式和新的教学模式课程满意度的调查,并对比两种教学模式下学生实验报告成绩。结果72.5%(29/40)的学生认为医学机能学综合实验课程非常重要,92.5%(37/40)的学生认为这门实验课对于学生整合相关理论知识,将知识系统化很有帮助;45%(18/40)的学生对传统教学方法非常满意,50%(20/40)的学生比较满意。5%(2/40)的学生认为传统教学方法教学效果一般。对于新的教学模式的实施,有95%的学生持支持态度。92.5%的学生认为翻转课堂的实施提高了其自身查阅资料、整合知识点的能力。87.5%(35/40)的学生认为新的教学模式有利于掌握理论和实验的知识重点。翻转课堂的报告优秀率为68%(27/40),优于传统教学[43%(17/40)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论微媒体结合翻转课堂在医学机能学实验教学中的应用,提升了教学效果,激发了学生的学习兴趣与主动性,提高了教学满意度、实践能力和解决问题的能力。

肾透明细胞癌相关肿瘤分子标志物的研究进展

肾癌(renal cell carcinoma,RCC)是极常见的恶性肿瘤之一,其中较常见的类型是肾透明细胞癌(renal clear cell carcinoma,ccRCC),约占成年肾癌患者的90%~95%^([1])。肾癌患者早期无明显症状,大部分在确诊时就已经出现远处转移而延误诊断,导致治疗和预后效果较差。目前靶向药物对于肾癌有一定的疗效,但是不同的个体药物治疗的效果差异较大。通过研究分子标志物与肾癌之间的联系,探索新型有效的分子标志物以阐明肾癌的发病机制,对肾癌的诊断、治疗及预后都十分重要。本文将对多种来源的分子标志物与肾癌发生发展的关系作一综述,以期为肾癌的诊断和治疗提供参考。

蒙药孟根乌苏中微纳米结构的发现及新药开发成果分析

蒙药是指在内蒙古自治区及周边地区广泛使用的传统医药,它是传统医学的重要组成部分,是蒙医药的精华,是内蒙古地区蒙古族人民防病治病、养生保健的有效手段。孟根乌苏在我国古代主要作为蒙药使用,用于治疗风湿痹痛、骨节疼痛、腰痛、痢疾等病症,疗效确切。随着对孟根乌苏药理作用研究的深入,其传统功效逐渐被现代药理学研究所证实,因此具有很大的开发利用价值。本文从蒙医临床应用出发,对孟根乌苏中微纳米结构进行了研究,并对其药理作用及在新药开发方面进行了总结和分析。

MYD88过表达对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制

目的探讨MYD88基因过表达对人弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法采用质粒转染法将过表达MYD88 L265P基因的pEGFP-C2-MYD88转染DLBCL细胞;实验分为空白对照组、阴性对照组和MYD88 L265P过表达组。倒置荧光显微镜下观察MYD88 L265P过表达后荧光表达;运用RT-PCR、Western blot法检测MYD88 L265P过表达前后DLBCL细胞的MYD88 L265P、IRAK4、NF-κB和BCL2的mRNA及蛋白表达水平;应用CCK-8法检测DLBCL细胞增殖;采用Hoechst染色法检测DLBCL细胞凋亡情况。结果MYD88 L265P过表达后,与空白对照组(0.6704±0.0175)和阴性对照组(0.7153±0.0196)相比,MYD88 L265P过表达组(1.1572±0.0102)的增殖率显著增高,均有统计学意义(P均<0.05)。MYD88 L265P过表达后,与空白对照组(0.69±0.04)和阴性对照组(0.81±0.07)相比,MYD88 L265P过表达组(0.48±0.05)的凋亡率明显降低,均有统计学意义(P均<0.05)。MYD88 L265P过表达后,与空白对照组(mRNA:1.0158±0.0115、0.9873±0.0102、1.0076±0.0153;蛋白:0.1834±0.0589、0.0968±0.0157、0.1475±0.0418)和阴性对照组(mRNA:0.9132±0.0098、1.0032±0.0156、0.9327±0.0112;蛋白:0.1879±0.0423、0.0889±0.0513、0.1348±0.0501)相比,MYD88 L265P过表达组IRAK4、NF-κB和抗凋亡蛋白BCL2的mRNA(3.2432±0.0136、2.9766±0.0213、1.5859±0.0198)及蛋白表达(0.4527±0.0524、0.2189±0.0475、0.3014±0.0598)明显增高,均有统计意义(P均<0.05)。结论MYD88 L265P过表达后,DLBCL细胞的凋亡率下降,细胞增殖率上升,其机制可能与MYD88 L265P基因突变激活和放大了NF-κB通路,促进抗凋亡蛋白BCL2的过表达有关。

人趋化素样因子1对人动脉血管平滑肌细胞的趋化作用

目的:观察人趋化素样因子1(chemokine-like factor1,CKLF1)对人外周动脉血管平滑肌细胞(arterial smooth muscle cells,ASMCs)的趋化作用。方法:收集用CKLF1真核细胞表达载体(pEGFP-N1-CKLF1)瞬时转染293T细胞72h后的上清培养液,采用细胞迁移实验检测CKLF1对ASMCs的趋化作用。结果:未稀释和10倍稀释的上清培养液孵育后的实验组迁移细胞数与对照组(pEGFP-N1)迁移细胞数相比,差异有统计学意义(114±4vs41±4,P<0.05;74±4vs34±3,P<0.01)。而100倍和1000倍稀释的上清培养液孵育后实验组迁移细胞数和对照组的迁移细胞数相比,差异无统计学意义(28±4vs25±5,P>0.05;26±5vs23±5,P>0.05)。ASMCs分别被不同浓度百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)处理后,PTX浓度为0和2μg/L时,10倍稀释的上清培养液实验组迁移细胞数与对照组迁移细胞数相比,差异有统计学意义(74±4vs34±3,P<0.01;45±3vs34±3,P<0.01)。PTX浓度为10μg/L,10倍稀释的上清培养液实验组迁移细胞数与对照组迁移细胞数相比,差异无统计学意义(37±4vs34±3,P>0.05)。结论:CKLF1对人动脉平滑肌细胞具有明显趋化作用,且该趋化作用可被PTX所阻断。

趋化素样因子1对人动脉平滑肌细胞的增殖促进作用

目的观察人趋化素样因子1(CKLF1)对人外周动脉血管平滑肌细胞(ASMCs)的作用。方法用CKLF1真核细胞表达载体瞬时转染293T细胞,72 h后收集上清培养液,采用ELISA方法检测培养上清中CKLF1;用该上清培养人ASMCs细胞后,MTT法检测该上清对细胞增殖的影响。结果 MTT结果显示,10倍稀释的转染上清刺激ASMCs 72 h后,实验组OD490=0.480±0.024,与对照组OD490=0.424±0.011相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CKLF1对人ASMCs具有促增殖作用。CKLF1可能参与动脉粥样硬化血管内膜增厚的过程。

C19、C27多肽对人主动脉平滑肌细胞的趋化活性

趋化因子超家族（CKLFSF）在人类有九个成员,即：趋化素样因子（CKLF）和CKLFSF1-8。该基因家族的基因编码的产物特点为其结构介于经典的趋化因子和四次跨膜蛋白之间。CKLF1具有CC家族趋化因子的结构特征和基本功能,即连续两个半胱氨酸的特征性结构和趋化功能。本研究选择CKLF1 C端的两段多肽——C19、C27多肽,体外观察二者对人主动脉平滑肌细胞的趋化活性。

细胞因子与动脉粥样硬化关系研究进展

近年来的研究认为,动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病。细胞因子不但参与了脂质条纹的形成过程:包括内皮细胞的受损、活化,各种趋化因子和黏附分子的分泌,单核巨噬细胞、淋巴细胞的聚集并向内膜下迁移,还参与了促使斑块破裂、血栓形成的整个过程。现就细胞因子在动脉粥样硬化发生、发展以及并发症中的作用的研究现状做一综述。

趋化素样因子1对肾癌细胞ACHN生物活性的影响及其相关机制

多项研究发现,趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)是人类多种肿瘤发生和进展的重要调节因子。然而,关于CKLF1对肾癌细胞生物活性的影响知之甚少。通过质粒转染实现CKLF1在肾癌细胞ACHN中过表达,探究CKLF1对肾癌细胞ACHN细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。将实验组pEGFP-N1-CKLF1和对照组pEGFP-N1真核细胞表达质粒分别转染肾癌ACHN细胞,实现趋化素样因子1在ACHN细胞中的过表达。利用荧光显微镜,镜下观察质粒转染效率。利用细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8,CCK8)观察肾癌细胞ACHN转染24、48、72 h后增殖情况;利用流式细胞术检测ACHN细胞转染24、48、72 h后细胞周期的变化情况;利用Hoechst33258染色法观察转染48 h后,ACHN细胞形态变化,利用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用Western blot法检测CKLF1过表达后,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Bcl-2样蛋白1(Bcl-2 like 1,Bcl-xL)、信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)、磷酸化信号传导及转录激活因子3(phosphorylation signal transducers and activators of transcription 3,P-STAT3)表达情况。研究结果显示:荧光显微镜下90%以上的细胞有绿色荧光蛋白表达,证明转染效率良好。CCK8检测结果显示:转染48、72 h后,实验组肾癌细胞ACHN的增殖情况均明显高于对照组,差异有显著性意义48 h(P<0.05),72 h(P<0.05);流式细胞术检测结果显示:实验组增值指数PI明显高于对照组,差异有显著性意义24 h(P<0.01),48 h(P<0.01),72 h(P<0.01)。荧光显微镜下Hoechst染色结果显示:与对照组相比较,实验组凋亡小体数量较少。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比较,转染后48 h后实验组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。Western blot结果:与对照组相比较,周期相关蛋白Cyclin D1表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);实验组凋亡相关蛋白Bcl-xL表达量明显高于对照组(P<0.05);实验组JAK激酶(Janus kinase,JAK/STAT3,JAK-STAT3)信号通路蛋白P-STAT3明显高于对照组(P<0.05)。趋化素样因子1过表达可促进肾癌细胞ACHN的增殖、抑制其凋亡,其发生机制可能与JAK-STAT3信号通路有关。CKLF1可能是肾透明细胞癌的新的治疗靶点。

病理生理学实验教学中PBL教学模式的应用与分析

通过分析病理生理学实验教学内容的特点及其对教学的要求,总结教学经验,将PBL教学模式引入病理生理学实验教学中,以达到培养学生的创新能力,科研设计能力,提高教育素质的目的。PBL教学模式将生动的病案引入实验教学中,打破了沉闷的传统教学,更易于激发学生的学习理论知识和动手操作的兴趣。

加强应用能力培养的医学实验动物学理论教学改革

针对不同的授课对象、授课专业,采取课前问卷调查的方式掌握授课对象的主要研究领域以及感兴趣的研究方向,进而优化医学实验动物学的理论讲授内容。同时将具体知识点融入到科研实例当中,并加以总结,更好的地提高学生对知识点的的理解能力和实际应用能力。

金诃子低温提取物对神经胶质瘤C6细胞的抑制作用

目的探讨金诃子低温提取物对神经胶质瘤C6细胞增殖的影响及机制。方法低温提取金诃子5个不同部位（分别称1、2、3、4、5号部位）。将C6细胞分为6组,取1-5组分别加入1μg/m L的1-5号部位0.1 m L,对照组加入等量培养液,分别于培养12、24 h时采用DAPI染色荧光显微镜观察细胞形态变化,Tunnel法检测细胞凋亡情况。结果干预后作用24 h时DAPI染色可见细胞核浓缩,染色质凝聚,致密强荧光,出现凋亡小体;TUNEL检测发现1μg/m L的1-5号部位作用于细胞后分别在12 h出现部分细胞凋亡,24 h时细胞全部凋亡,各部位之间差异无统计学意义。结论不同部位金诃子低温提取物均能促进C6细胞的凋亡,其有望成为新型抗神经胶质瘤药物。

金诃子低温提取物的免疫活性

目的探讨改进炮制工艺低温提取金诃子不同部位成分的免疫活性。方法采用低温提取金诃子,将上清液用不同的分离方法及透析膜分离等技术处理,最后将不同部位的提取液冷冻干燥(具体提取工艺正在专利申请中)。采用红外光谱检测提取物的成分和含量。随机将小鼠分为阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(灵芝多糖)、金诃子提取物高、中、低剂量组,连续灌胃14 d。通过小鼠尾部末梢血制片检测淋巴细胞转化率,通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测巨噬细胞的吞噬活性。结果金诃子不同部位提取物的物理性状不同、成分相似,与阴性对照组及阳性对照组比较,提取物高、中、低剂量组小鼠淋巴细胞转化率均提高(P均<0.01),且不同剂量组巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率均提高(P均<0.01)。结论金诃子不同部位的成分均有免疫活性。

螺旋藻藻蓝蛋白亚基的提取和免疫活性研究

目的:探讨螺旋藻藻蓝蛋白亚基的提取和免疫活性。方法:低温破壁,离心获取上清,经粗纤维膜过滤后,采用Sephadex G-50凝胶过滤提取藻蓝蛋白亚基,SDS-PAGE检测蛋白纯度和分子量,经红外光谱技术和紫外/可见光分光光度计扫描图谱,检测其在波长620 nm和280 nm处的吸光度,进一步观察提取物对小鼠脾脏淋巴细胞的作用。结果:低温水提和凝胶过滤层析提取1号和2号提取物,分别为墨绿色和蓝色水溶性室温储存性状稳定的干粉。1号和2号提取物SDS-PAGE检测均见一条分子量约17 k Da的蛋白条带。红外光谱技术扫描图谱可见在1600~1800 cm^(-1)的波长范围,螺旋藻原粉在1656 cm^(-1)处可见1个吸收峰,1号提取物在1655 cm^(-1)、1633 cm^(-1)、1594 cm^(-1)处可见3个吸收峰,2号提取物在1631 cm^(-1)和1602 cm^(-1)处可见2个吸收峰,残渣在1658 cm^(-1)处可见1个吸收峰。紫外/可见光分光光度计检测1号提取物在232.0 nm和617.0 nm波长处有吸收峰,2号提取物在263.5 nm和619.5 nm波长处有吸收峰,1号提取物纯度A620/A280为0.78,得率15%,2号提取物纯度A620/A280为0.85,得率20%。提取物能够促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖。结论:低温提取藻蓝蛋白亚基且具有增强免疫活性。

蒙药金诃子低温提取物鞣质成分和含量的测定

目的建立测定蒙药金诃子低温提取鞣质成分和含量的测定方法。方法采用红外光谱技术和磷钼钨酸-干酪素比色法测定五个不同部位提取物中鞣质的成分和含量。红外光谱技术检测部分由清华大学分析中心分析;磷钼钨酸-干酪素比色法以没食子酸为对照品,选取波长和检测时间点,并制备标准曲线进行检测。结果红外光谱技术测得五个部位提取物在单宁酸的特征吸收谱带中均有不同程度的吸收峰,而单宁酸是鞣质的主要成分,但是不同部位之间鞣质含量差异无显著性;磷钼钨酸-干酪素比色法测定波长选定为760 nm;在30 min和45 min时间点结果均较稳定,所以选择在此时间段内测定鞣质含量;标准曲线线性回归方程为Y=0.136 2X-0.086 3,R=0.996 1;检测五个不同部位提取物含量分别为68.81±2.78%、25.16±0.89%、56.83±0.90%、20.47±1.21%、32.82±1.54%,鞣质含量最少的4号部位与1号和3号部位比较差异有统计学意义,P<0.05。结论蒙药金诃子低温提取的五个不同部位,成分分析优选红外光谱技术,而鞣质含量检测优选磷钼钨酸-干酪素比色法。

国际班病理生理学双语教学体会及展望

在我校各专业国际班的病理生理学教学中进行了双语教学，目的在于使学生掌握一定量的专业英语词汇，提高外语表达能力，适应激烈的人才竞争需求。结合教学实践浅析双语教学在病理生理教学中的应用体会，并对教学过程中存在的问题进了思考。

金诃子低温提取物对6种标准菌株的抑制作用观察

目的观察金诃子低温提取物对6种标准菌株的抑制作用。方法选择大肠杆菌、痢疾杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌共6种标准菌株。体外抑菌实验:采用平皿钢杯密集划线法,将6种标准菌株接种于固体培养基中,对称放置4个无菌钢杯,将5种金诃子低温提取物配制成不同浓度,每孔加入200μL,培养24 h后观察抑菌圈直径。体内抑菌实验:小鼠腹腔注射含有5%胃膜素和致死剂量的6种标准菌株,对照组给予0.45%盐水,1号部位、2号部位、3号部位、4号部位、5号部位组分别以40 mg金诃子不同部位低温提取物灌胃,观察小鼠24 h存活率。结果体外实验显示,金诃子5种低温提取物在体外对6种标准菌株均有生长抑制作用(P均<0.05);体内实验显示,与对照组比较,1号部位、2号部位、3号部位、4号部位、5号部位组小鼠的存活率高(P均<0.01)。结论金诃子低温提取物在体外及体内实验中对6种标准菌株均有抑制作用,5种部位提取物均具有广谱的抗菌效果。

蒙古国留学生病理生理学教学模式与考核评估体系建设

以"听、说、读、写"全方位的语言教学方式进行病理生理学教学,进行多环节综合考核评估,激励蒙古留学生,探索适合留学生的病理生理学教学模式和考核评估体系。

两种方法对蒙药金诃子低温提取物多糖成分和含量测定结果比较

目的：评价两种方法对蒙药金诃子低温提取物多糖成分和含量的检测效果。方法采用红外光谱技术和硫酸-蒽酮比色法测定蒙药金诃子5个不同部位提取物中多糖的成分和含量，红外光谱技术检测部分由清华大学分析中心完成。评价硫酸-蒽酮比色法的精密度、稳定性、重复性和加样回收率等性能指标。结果红外光谱技术测得蒙药金诃子5个部位提取物中均有多糖成分，但各部位的含量比较差异无统计学意义。硫酸-蒽酮比色法线性范围为40～200μg/mL；精密度良好（ RSD＝0．460％），重复性良好（ RSD＝1．616％），平均加标回收率为（110．130±0．010）％（ RSD＝0．946％）；试剂在室温自然光下2 h内稳定性良好；标准曲线线性回归方程为Y＝0．2051X-0．0034，R＝0．9991；蒙药金诃子5个部位提取物中多糖含量为14．15％～22．15％。结论蒙药金诃子不同部位提取物的成分分析优选红外光谱技术，而硫酸-蒽酮比色法用于检测多糖含量。

LASS2/TMSG1过表达抑制人肺癌A549细胞增殖和促进A549细胞凋亡:基于上调神经酰胺和p38 MAPK进而启动级联信号传导通路

目的探究人源性长寿保障基因2/肿瘤转移抑制相关基因1(LASS2/TMSG1)过表达对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响并探讨相关机制。方法对课题组先前构建好的人肺癌A549细胞阴性对照组和LASS2/TMSG1基因过表达组进行如下实验:Western blot检测LASS2/TMSG1蛋白表达水平,平板克隆形成实验、CCK-8法、Hoechst/PI双染、流式细胞术检测A549细胞体外增殖能力及凋亡情况。将14只裸鼠随机分为阴性对照组和LASS2/TMSG1基因过表达组,7只/组,分别向对应组别的裸鼠颈背部皮下注射A549细胞阴性对照组和LASS2/TMSG1过表达组细胞悬液,构建裸鼠移植瘤模型,检测LASS2/TMSG1基因过表达对A549细胞体内增殖能力的影响。Western blot检测A549细胞及裸鼠移植瘤中p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达水平。ELISA法分析A549细胞上清液及裸鼠移植瘤组织匀浆中神经酰胺和p38 MAPK蛋白含量。结果与阴性对照组相比,LASS2/TMSG1基因过表达组A549细胞LASS2/TMSG1蛋白表达量显著升高(P<0.05),体外增殖能力下降(P<0.05),早期凋亡率上升(P<0.05),移植瘤细胞体内增殖受到抑制(P<0.05),A549细胞及裸鼠移植瘤中p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达量均显著升高(P<0.05),A549细胞上清液及裸鼠移植瘤组织匀浆中神经酰胺和p38 MAPK含量显著增加(P<0.05)。结论LASS2/TMSG1基因过表达能显著抑制人肺癌A549细胞的体内、外增殖能力,促进肿瘤细胞早期凋亡,这可能与LASS2/TMSG1基因过表达后上调了神经酰胺及其下游的效应分子p38 MAPK蛋白进而启动级联信号传导通路有关。