血清CRP/白蛋白、HCY/HDL-C与冠状动脉病变程度的相关性分析

目的探讨血清C反应蛋白/白蛋白比值(CRP/ALB,CAR)、同型半胱氨酸/高密度脂蛋白胆固醇比值(HCY/HDL-C)与冠状动脉病变程度的相关性。方法纳入2018年1月-2019年12月因胸痛症状在解放军联勤保障部队第904医院心内科行冠状动脉造影检查的患者577例,根据造影结果分为非冠心病组(n=245)与冠状动脉粥样硬化性心脏病组(冠心病组,n=332);进一步将冠心病组分为两个亚组:冠状动脉轻度病变亚组(Gensini评分<30,n=183)、冠状动脉重度病变亚组(Gensini评分≥30,n=149)。检测各组患者的血清CRP、ALB、HCY、HDL-C等指标,计算CAR、HCY/HDL-C,并采用logistic回归分析、Pearson相关性分析及受试工作者特征曲线(ROC)分析冠心病及冠状动脉重度病变的独立危险因素。结果冠心病组患者的CAR、HCY/HDL-C明显高于非冠心病组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果提示CAR、HCY/HDL-C、年龄、高血压、性别均是冠心病及冠状动脉重度病变的独立危险因素。Pearson相关性分析结果表明,CAR、HCY/HDL-C均与Gensini积分呈正相关(r=0.427,P<0.01;r=0.247,P<0.01)。ROC分析结果显示,CAR、HCY/HDL-C及两者联合均对冠状动脉重度病变有预测价值,且两因素联合预测冠状动脉重度病变的曲线下面积(AUC)高于任一单项指标,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CAR及HCY/HDL-C升高可预测冠状动脉重度病变,两者联合的诊断价值优于单项指标,可用于冠心病的诊断及病情评估。

敲低前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制人主动脉内皮细胞的内皮间质转化

目的以人主动脉内皮细胞(HAEC)为研究对象,探讨敲减前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)对β甘油磷酸、地塞米松、L-抗坏血酸诱导内皮间质转化(EndoMT)的保护作用。方法以(0、10、30、50)mmol/Lβ甘油磷酸联合100 nmol/L地塞米松和50μg/ml L-抗坏血酸诱导HAEC建立EndoMT模型。采用PCSK9的特异性小干扰RNA(si-PCSK9)转染HAEC,实时荧光定量PCR与Western blot法检测HAEC的PCSK9的mRNA和蛋白表达。将HAEC随机分为空白组、EndoMT组、转染阴性对照小干扰RNA的EndoMT组、转染si-PCSK9的EndoMT组。实时荧光定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异蛋白1(FSP1)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的mRNA水平,Western blot法检测α-SMA、VE-cadherin的蛋白水平,免疫荧光染色法检测α-SMA的表达。结果30 mmol/Lβ甘油磷酸诱导EndoMT效果最佳,发生EndoMT时,PCSK9的mRNA及蛋白表达上调。而PCSK9敲减后,α-SMA、FSP1的表达下调,VE-cadherin的表达上调。结论敲低PCSK9可抑制HAEC的EndoMT。

钙化性主动脉瓣疾病生物信息学分析和关键基因筛选

目的:探索可能引起钙化性主动脉瓣疾病(CAVD)的关键基因和信号转导通路,寻找CAVD患者瓣膜组织中浸润的关键细胞,为CAVD诊疗提供新的思路。方法:从GEO数据库中获取人类CAVD现有信息芯片,筛选出正常主动脉瓣与CAVD瓣膜之间的差异表达基因(DEGs)。对DEGs的功能和通路基于基因本体论(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)进行富集分析。应用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并筛选出关键基因。运用CIBERSORT数据包计算CAVD中22种免疫细胞浸润比例。结果:通过文本挖掘和数据分析,CAVD患者瓣膜组织有95个DEGs,其中64个基因上调,31个基因下调。这些DEGs通过GO分析富集到细胞外基质组织、细胞外结构组织、外部封装结构组织等117个生物学过程,含胶原蛋白的细胞外基质、内质网腔、胶原蛋白三聚体等13个细胞组分和细胞外基质结构成分、整合素结合、具有拉伸强度的细胞外基质结构成分等33个分子功能。KEGG分析显示主要在蛋白质消化与吸收、细胞外基质-受体相互作用、局灶性黏附等10个方面富集。通过PPI分析筛选出10个关键基因(COL4A2、COL4A1、COL3A1、THBS2、COL5A1、COL5A2、COL4A4、COL11A1、FN1和COL4A3)和两个基因模块,这些关键基因主要在细胞外基质-受体相互作用、黏着斑和蛋白质消化与吸收等方面富集。经过CIBERSORT分析表明CAVD患者M0型巨噬细胞和M1型巨噬细胞细胞水平较高(P<0.05)。结论:本研究发现FN1、MMP9、COL3A1、SPP1、COL4A2、THBS2、COL5A2、COL5A1、COL4A1和IGF1是CAVD进展中的关键基因。CAVD的发生发展与细胞外基质重塑、巨噬细胞浸润密切相关。细胞外基质调控基因可能可以作为早期CAVD的生物标志物以及CAVD防治的靶标。