5-HTT基因3个SNP位点遗传多态性与偏执型精神分裂症的相关性

目的探讨5-羟色胺转运体(5-hydroxytryptamine transporter,5-HTT)基因3个SNP位点(rs25533、rs34388196、rs1042173)的群体遗传学信息及其与偏执型精神分裂症的相关性。方法采用PCR-RFLP技术对中国北方汉族群体132例偏执型精神分裂症患者和150例健康无关个体5-HTT基因3个SNP位点遗传多态性进行检测,使用χ2检验进行Hardy-Weinberg平衡检验,对单倍型频率、群体遗传学参数进行统计学分析。结果 5-HTT基因3个SNP位点组成4种单倍型,其频率在精神分裂症组与对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05),3个SNP位点的DP值分别为0.276、0.502、0.502,PIC值分别为0.151、0.281、0.281,PE值分别为0.014、0.072、0.072。结论 5-HTT基因3个SNP位点及其组成的4种单倍型与偏执型精神分裂症无相关性,而其多态性具有较高的法医学应用价值。

高等医学院校非法医学专业的法医学教学模式改革

法医学是应用医学、生物学及其他自然科学的理论与技术．研究并解决司法实践中有关医学问题的一门医学科学。在国际上，许多国家将法医学课程列为高等医学教育必修课。在我国，多数高等医学院校在临床医学及相关专业中也开设了法医学课程。多为选修课，为学生在毕业后从事临床医学及相关专业工作中能较妥善地处理与法律相关的医学问题打下基础。

GABRB3基因启动子区rs4906902和rs8179184位点遗传多态性与精神分裂症的相关性

目的探讨γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)A受体β3亚基(GABRB3)基因启动子区两个单核苷酸多态性位点rs4906902和rs8179184遗传多态性与精神分裂症的相关性。方法采用PCR和DNA测序方法对中国北方汉族210例健康个体(对照组)及206例精神分裂症患者(患者组)的rs4906902和rs8179184位点多态性进行检测。采用χ2检验对照组人群中基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律,并比较两组人群中基因型和单倍型频率分布的差异。结果对照组基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,rs4906902和rs8179184位点紧密连锁,表现为两种单倍型:T-G和C-A。患者组与对照组基因型和单倍型分布频率差异有统计学意义(P<0.05)。患者组单倍型C-A的频率明显高于对照组,母系家族史与父系家族史基因型和单倍型分布的频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GABRB3基因启动子区rs4906902和rs8179184位点单倍型C-A可能与精神分裂症存在相关性,并有母系遗传倾向,可为精神分裂症司法鉴定提供参考。

循环次数与体系对DNA检测灵敏度的影响

目的探讨通过增加PCR循环次数和缩小扩增体系改善DNA检测灵敏度的可行性。方法将10例无血缘关系健康志愿者精液DNA样本分别定量为50、40、30、25、20、15、10 pg/μL,分别用10、5、3μL的体系和28、30、32、34、36次循环进行扩增,用3130遗传分析仪检测15个常染色体STR基因座。结果 28次循环下,3μL体系可对40pg/μL及以上样本正确分型。20pg/μL及以上样本在10、5、3μL体系中,34次循环均可正确分型,增加到36次循环,出现非特异性谱带,无法正确分型。结论增加循环次数和缩小扩增体系在一定程度上可以提高DNA检测的灵敏度。

偏执型精神分裂症患者GRIN1基因-855G/C与-1140G/A位点的遗传多态性

目的探讨GRIN1基因启动子区两个单核苷酸多态性位点-855 G/C、-1140 G/A遗传多态性与偏执型精神分裂症的相关性及法医学意义。方法采用PCR限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)结合PAGE法对中国北方汉族183例健康无关个体和172例偏执型精神分裂症患者GRIN1基因5′端的-855 G/C和-1140 G/A位点多态性进行检测,采用χ2检验人群中基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律,并比较两组人群中基因型和等位基因频率分布的差异。结果两组群体基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。-855 G/C位点基因型分布在对照组女性和实验组女性间的差异具有统计学意义(P<0.05),-1140 G/A位点基因型和等位基因频率分布在对照组和实验组间及两组女性间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 GRIN1基因启动子区-1140 G/A位点单核苷酸多态性可能与精神分裂症存在相关性;精神分裂症发生的遗传学因素可能存在性别倾向,可为精神分裂症的司法鉴定提供参考。

胆囊收缩素基因-45C/T多态性与精神分裂症的关联

目的探讨精神分裂症人群胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)基因-45C/T位点遗传多态性及其法医学意义。方法采用双向等位基因特异性PCR方法对中国北方汉族群体207例精神分裂症患者(患者组)和202例健康个体(对照组)CCK基因-45C/T位点多态性进行检测。采用χ2检验对照组人群中基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡并比较两组人群中基因型和等位基因频率分布的差异。结果对照组人群中基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡,患者组与对照组基因型与等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。性别分层分析显示,女性患者组等位基因T的频率显著高于女性对照组(P=0.044)。结论 CCK基因-45C/T位点T等位基因可能与女性精神分裂症存在阳性关联,可能有助于精神分裂症的鉴定。

FUT2/01基因座在中国北方汉族人群中的多态性

目的调查STR基因座FUT2/01在中国人群中的基因结构特征及其在中国人群中的多态性分布特点,并对其法医学应用前景进行探讨。方法应用PCR方法扩增FUT2/01基因,DNA测序确定所有等位基因的序列;常规聚丙烯酰胺凝胶电泳调查中国人群中FUT2/01基因座的多态性分布,同时应用荧光标记引物进行自动化检测分析和基因型鉴定。结果DNA测序结果仅显示核心序列的重复数目变化所导致的长度差异;在所调查的中国汉族人群162例个体中共发现9种等位基因和28种基因型,系统的个体识别率为0.9639,父权排除率为0.6266。此外,荧光标记引物经自动化检测可对该基因座进行良好的分型。结论FUT2/01基因座在中国汉族人群中表现出高度的杂合性和个体特异性,在法医学鉴定中具有较高的应用价值。

ABO血型A201等位基因表达A抗原活性的分析

目的了解ABO血型系统中A201等位基因表达的A抗原活性。方法采用血型血清学方法检测1个家系2代3人血液和唾液各1份标本的ABO血型表型;应用Identifiler法医基因分析试剂盒作亲缘关系鉴定;PCR扩增ABO基因所有外显子区后作DNA测序分析,PCR-RFLP法同步检测A201等位基因中的序列变异。结果亲缘关系鉴定显示在Identifiler的15个遗传标记系统中,父母均能够提供全部相应的等位基因给孩子,确定存在亲缘关系;然而采用不同来源的3份抗体作ABO血型检验时,出现其中之一的正定型试验否定母子关系、反定型不能排除母子关系的矛盾现象。3个标本ABO基因的测序:父、母、子的基因型分别为O01/O01、A201/B101和A201/O01,支持反定型结果,提示A201等位基因在AB和A表型中所表达的A抗原活性存在明显的差异。PCR-RFLP法成功地同步鉴定出A201等位基因中的2个主要变异点467C/T和1059-1061delC。结论 ABO血型A201基因在AB和A表型中表达A抗原活性可能因检测抗体不同表现出一定的差异;基因测序与PCR-RFLP法同步分析可简便快速地鉴定A201等位基因中的467C/T和1059-1061delC。

荧光标记LDR-PCR复合扩增方法对高度降解DNA检材的SNPs分型研究

目的构建一套基于连接酶检测反应(LDR)的荧光标记PCR复合扩增体系,为解决高度降解DNA法医学分析提供新的策略。方法选择8个单核苷酸多态性(SNPs)位点(rs10802248、rs10516197、rs10488372、rs2278945、rs4757318、rs4887255、rs4889002和rs9304473),设计合成各SNPs位点的LDR探针和连接产物PCR引物,通过LDR将连接产物进行PCR扩增,并将扩增产物进行毛细管凝胶电泳,构建复合扩增SNPs分型体系。结果使用荧光标记LDR-PCR复合扩增方法,对不同个体的8个SNPs位点进行分型,分型结果与测序结果完全一致;对于甲醛固定石蜡包埋组织(FFPET)检材高度降解的DNA样品,荧光标记LDR-PCR复合扩增体系能够实现8个SNPs位点的准确分型。结论荧光标记LDR-PCR复合扩增方法能够对8个SNPs位点进行一次性分型,结果准确、可靠,是一种简单、高效并且较为实用的SNPs分型新方法,适用于高度降解检材的检测。

中国北方汉族群体TPH2基因5′和3′端SNP位点遗传多态性

目的调查中国北方汉族群体TPH2基因5′和3′端SNP位点遗传多态性并探讨其法医学应用价值。方法测序分析244例中国北方健康无关个体TPH2基因5′端905 bp和3′端1 104 bp两个靶片段的序列特征和6个SNP位点(rs4570625、rs11178997、rs11178998、rs41317118、rs17110747和rs41317114)的遗传多态性,应用Haploview v4.2软件进行统计分析。结果 244例中国北方汉族个体6个SNP位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律,在92922位点检测到1例C/T变异,TPH2基因5′端3个SNP位点(rs4570625、rs11178997和rs11178998)和3′端3个SNP位点(rs41317118、rs17110747和rs41317114)分别显示出高度连锁不平衡,获得了TPH2基因6个SNP位点的群体遗传学参数。结论中国北方汉族群体TPH2基因5′和3′端序列呈现出高度遗传多态性,可作为相关疾病关联分析的遗传学指标,同时可用于个体识别和亲权鉴定。

GRIN1基因-855G/C和-1140G/A位点遗传多态性

谷氨酸（glutamate．Glu）是哺乳动物脑内重要的兴奋性神经递质．Glu通过作用其受体发挥着重要的生物学功能。Glu受体基因存在单核苷酸多态性（single nueleotide polymorphism．SNP），为探讨其在法医学中的应用价值．本研究调查了Glu受体基因之一GRIN1启动子区域-855G／C与-1140G／A2个SNP位点在中国北方汉族群体中的频率分布。

TPH基因-G1066A位点遗传多态性与抑郁症相关性的研究

目的调查色氨酸羟化酶基因-G1066A位点的遗传多态性在中国北方抑郁症群体中的分布。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法,检测140名对照个体和73名抑郁症患者的TPH基因-G1066A位点。结果TPH基因-G1066A位点在对照组中其等位基因A的频率为0.186,G为0.814;抑郁症患者中等位基因A频率为0.205,G为0.795。结论TPH基因-G1066A位点等位基因A在中国北方抑郁症群体中有较高频率的分布,提示等位基因A可能是抑郁症的易感基因。

中国北方汉族群体多巴胺受体D5基因4个SNP遗传多态性

目的调查多巴胺受体D5(dopamine receptor D5,DRD5)基因rs77434921、rs2076907、rs6283、rs1800762 4个SNP位点在中国北方汉族群体中的遗传多态性分布。方法采用PCR测序方法对中国北方汉族206例个体的4个SNP位点进行检测,应用Haploview v4.1软件进行统计分析。结果在中国北方汉族群体中rs77434921、rs2076907、rs6283、rs1800762位点的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡。个体识别能力(DP)分别为0.145、0.532、0.602、0.159,非父排除率(PE)分别为0.004、0.079、0.196、0.007。4个SNP处于连锁不平衡状态,可以组成5种单倍型。结论中国北方汉族人群DRD5基因rs2076907与rs6283位点多态性分布较好,在法医学个体识别与亲子鉴定中具有一定的应用价值。

中国北方汉族群体TPH基因座-T457C位点遗传多态性

目的研究色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase,TPH)基因座-T457C位点在中国北方汉族群体中的遗传多态性及其法医学应用价值。方法应用PCR-RFLP、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术,检测180例北方汉族无关个体TPH基因座-T457C位点的遗传多态性。结果TPH基因座-T457C位点在中国北方汉族群体中,其个体识别能力(DP)为0.624,非父排除率(PE)为0.187,与法国人群基因频率比较差异显著(P<0.05)。结论TPH基因座-T457C位点在法医学中有重要应用价值,其遗传多态性可能存在民族或地域差异。

多巴胺受体D5基因5’端单核苷酸多态性与偏执型精神分裂症的关联及对基因表达的影响

目的进一步探讨多巴胺受体D5(DRD5)基因在偏执型精神分裂症发病机制中的作用,分析rs77434921和rs2076907位点以及5’端序列对基因表达的影响。方法将不同单倍型分别转染HEK293细胞和SK-N-SH细胞,进行荧光素酶报告分析,并提取总细胞RNA,进行实时定量PCR分析。结果在HEK293和SK-N-SH细胞中,与其他3种单倍型相比,G-G单倍型的相对荧光素酶活性均无显著变化。然而在后续研究中发现,-1599^-934这段序列在维持转录水平中发挥作用,而+82^+564这段序列发挥下调转录水平的作用。结论未能证实位于DRD5基因上的rs2076907和rs77434921这2个单核苷酸多态性位点调控基因的表达,证实了其5’端的一部分区域对基因表达有显著影响。

辽宁汉族27个Y-STR基因座的遗传多态性

在法医学亲子鉴定和个体识别中,Y染色体STR基因座（Y-STR）具有独特的优势,主要是由于其男性伴性遗传的特点[1-2]。在一些强奸案件的鉴定中,YSTR分型可以提供男性嫌疑人的遗传信息,并且基因分型结果不受女性成分的影响[3]。此外,Y-STR基因座缺乏重组,具有独特的单倍型特征,在了解人类群体特征和进化等方面具有重要的作用[4]。