鼠疱疹病毒68复制转录激活蛋白结合元件的鉴定

复制转录激活蛋白(replication and transcription activator,RTA)是γ疱疹病毒的一个具序列保守性的蛋白质分子,由即时早期基因ORF50所编码.RTA可通过激活裂解期基因转录而使病毒进入裂解感染.鼠疱疹病毒68(MHV-68)亦属γ疱疹病毒,该病毒能体外感染多种细胞,并且能感染实验小鼠,是研究γ疱疹病毒的良好模型.在MHV-68中,目前只有两个受RTA调控的基因被报道,但调控机制未明.之前的研究鉴定出一个新的RTA的DNA结合序列(RTA response element,RRE),以此为基础,首先通过基因比对在病毒基因组上找到具有较高同源性的核酸序列片段(ORF9p-RRE),该序列在病毒基因组上位于ORF9启动子区,通过双重荧光素酶报告基因系统证实了RTA可作用于该启动子区进而激活下游基因转录,并且该转录激活是ORF9p-RRE依赖的.凝胶阻滞电泳实验(EMSA)和染色质免疫沉淀实验(ChIP)分别证实了RTA可在体外、体内与ORF9p-RRE直接结合.研究结果初步揭示了RTA与ORF9p-RRE相互作用的机制,为深入了解RTA激活病毒基因转录的机理提供了更多依据.

食品微生物风险分级研究进展

通过开展食品中微生物危害的风险分级研究,筛选高危食品和微生物危害进行重点监管是国际上控制食品微生物危害的通行策略,但是目前尚无国际通用的食品微生物风险分级模型。本研究对国际上已经开展的食品微生物风险分级研究进行回顾,指出了存在的问题,并提出了基于风险监测的定量风险分级模型的构想。