脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒性的研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),又名呕吐毒素(vomitoxin,VT),是由某些镰刀菌产生的一种真菌毒素,广泛存在于玉米、大麦、小麦等农产品及饲料中。DON对人类以及各种动物有着广泛的毒性效应,可引起多种细胞的凋亡,从而对机体多个系统产生毒害作用,如神经毒性、生殖毒性、免疫毒性以及"三致"作用等。从DON的理化性质、污染状况、毒性作用以及展望进行阐述,为真菌毒素毒性的进一步研究提供理论基础。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对雏鸡脂质过氧化反应及脑部形态结构的影响

[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对雏鸡脑组织形态结构、血清及脑组织中氧化与抗氧化指标的影响,探讨DON的神经毒理作用。[方法]选取120只健康的1日龄海兰蛋雏公鸡,预饲1周后,按单因素试验设计,随机分成4组,每组30只。对照组和试验组饲喂相同的全价饲料,试验组中的低剂量组、中剂量组和高剂量组按采食量分别添加0.27、1.68和12.21 mg·kg-1剂量的DON灌胃染毒,对照组灌服等量的生理盐水,试验从第8天开始,每隔7 d染毒1次,共染毒5次。试验期为36 d。试验结束时,所有雏鸡经翅下静脉采血,分离血清,用于测定过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量等指标;同时每组随机剖杀20只鸡,迅速取脑组织,一部分用于观察脑组织的病理变化及神经细胞的超微结构,另一部分用于测定氧化与抗氧化指标。[结果]与对照组相比,试验组雏鸡血清CAT、SOD和脑组织SOD、GSH-Px活性及NO含量显著降低(P<0.05),各试验组雏鸡血清MDA和高剂量组脑组织MDA含量显著升高(P<0.05),中剂量组和高剂量组血清T-AOC、GSH-Px和脑组织CAT活性及NO含量显著降低(P<0.05),高剂量组脑组织T-AOC活性显著降低(P<0.05);DON可引起试验组雏鸡脑组织产生不同程度的噬神经现象,并伴随部分神经纤维断裂;大脑皮质超微结构显示,随着染毒剂量的增加,试验组鸡脑组织神经元胞体出现不同程度的变性,且与剂量呈正相关。[结论]DON可引起雏鸡血清及脑组织脂质过氧化反应,造成脑组织不同程度损伤,即DON可对雏鸡产生一定的神经毒性。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对PC12细胞凋亡的影响

[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)诱导PC12细胞凋亡及对相关基因Bcl-2、Bax、Bid mRNA和蛋白cleaved-Caspase 3、cleaved-Caspase 9表达水平的影响。[方法]用不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng·m L^(-1))对PC12细胞染毒24 h,采用透射电镜观察、流式细胞术、荧光定量PCR、Western-blot等方法,研究DON对PC12细胞的超微结构、凋亡率、凋亡相关基因及蛋白表达的影响。[结果]不同浓度的DON均可诱导细胞凋亡,各试验组细胞凋亡率均极显著高于对照组(P<0.01),并随着染毒剂量的增加而升高,在1 000 ng·m L^(-1)时达到峰值;与对照组相比,各试验组Bax mRNA表达水平和Bax/Bcl-2值均极显著增加(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达水平在DON浓度超过500 ng·m L^(-1)时极显著下降(P<0.01),而Bid mRNA表达水平在DON浓度超过250 ng·m L^(-1)时极显著下降(P<0.01);Western-blot检测结果显示,各试验组cleaved-Caspase 9蛋白表达量均极显著高于对照组(P<0.01),而cleaved-Caspase 3蛋白表达量在DON浓度超过500 ng·m L^(-1)时极显著增加。[结论]DON能够诱导PC12细胞发生凋亡,凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Bid及蛋白Caspase3、Caspase9等参与了DON诱导PC12细胞凋亡的调控。

职业危害的防护探讨

医院的医护人员通过职业接触感染,这些一直是威胁医护人员自身健康的严重问题。探讨医护人员职业危害发生的危险因素及防护措施,为临床医护人员正确执行防护措施提供依据,以减少职业危害。

DON暴露对雏鸡免疫功能的影响

本试验旨在通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)暴露雏鸡体内毒理试验,根据免疫器官指数与病理剖检、血清抗体效价和免疫球蛋白水平的变化,研究DON对雏鸡免疫功能的影响。选取临床检查健康的120只1日龄海兰蛋公鸡,按单因素试验设计,随机分成4组,每组30只。试验雏鸡饲喂相同的全价日粮,从8日龄开始,低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按采食量含DON 0.27,1.68,12.21mg/kg的剂量灌胃染毒,对照组灌服等量的生理盐水,每隔7d染毒1次,共染毒5次。试验期为36d。每次染毒前1d,每组随机抽取10只鸡,翅下静脉采血,分离血清,用于检测免疫球蛋白水平和抗体效价。试验结束时,每组随机屠宰20只,取胸腺、法氏囊和脾脏,计算免疫器官指数,并观察病理变化。结果显示:与对照组相比,低、中剂量组血清免疫球蛋白水平呈现降低的趋势,但差异不显著(P>0.05),高剂量组显著降低(P<0.05);各试验组血清抗体效均价差异不显著(P>0.05);低、中剂量组脾脏指数显著升高(P<0.05),中剂量组胸腺指数显著降低(P<0.05),高剂量组脾脏和胸腺指数均显著降低(P<0.05)。病理切片观察发现,各试验组脾脏和法氏囊均出现不同程度的水肿,胸腺出现不同程度充血、淤血,高剂量组伴有大量浆液渗出。结果表明:DON暴露能影响免疫器官指数和免疫球蛋白水平,并损害免疫器官,从而降低雏鸡的免疫功能。

复合吸附剂对AFB_1和DON联合毒性的脱毒效果

本试验旨在通过动物体内试验,研究复合吸附剂(CA)对黄曲霉毒素B1(AFB1)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)联合毒性的脱毒效果。选取21日龄昆明系雄性小鼠60只,随机分为5组,每组3个重复,每个重复4只。各试验组小鼠饲喂相同的饲料,第Ⅰ组为对照组,每天灌服生理盐水;第Ⅱ组灌服0.5%CA;第Ⅲ组灌服200μg/kg AFB_1+500μg/kg DON;第Ⅳ组灌服200μg/kg AFB_1+500μg/kg DON+0.1%CA;第Ⅴ组灌服200μg/kg AFB_1+500μg/kg DON+0.5%CA。试验期为30d。分别于试验的第15和第30天,每个重复随机选择2只小鼠经眼球采血,测定血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰基转移酶(rGT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量;并取肝脏和脾脏,计算脏器相对指数。结果显示,与对照组相比,在试验15d时,第Ⅲ组小鼠肝脏、脾脏指数,血清AST活性显著升高(P<0.05),ALB含量显著降低(P<0.05),Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组差异不显著(P>0.05);在30d时,第Ⅲ组小鼠肝脏、脾脏指数、血清AST,ALT,ALP,r-GT活性显著升高(P<0.05),第Ⅳ组小鼠脾脏指数、血清r-GT活性显著升高(P<0.05),小鼠增重量、TP、ALB含量显著降低(P<0.05),SOD活性极显著降低(P<0.01),MDA含量极显著升高(P<0.01),Ⅱ、Ⅴ组差异不显著(P>0.05)。试验表明,CA对机体无副作用,0.5%CA能有效缓解AFB1和DON对小鼠的联合毒性。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇提取、纯化及含量检测

本试验通过提取和纯化方法的优化,旨在获得高纯度的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)。首先将禾谷镰刀菌孢子液接种于玉米培养基,于27℃30%湿度的条件下培养25d,收集产毒培养基,制成毒素粗提液。经过层析柱2次洗脱,分段收集洗脱液,用薄层色谱法(TLC)确定含DON的洗脱液,合并洗脱液,运用多重结晶法进行纯化,获得DON的纯品,高效液相色谱法(HPLC)进行分析确认。采用该培养方法,每千克玉米培养基可产生DON 56.65 mg,纯化后可得到DON 29.5mg,纯度达到98.1%;HPLC检测条件为:Waters C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水(16∶84),流速0.8mL/min,紫外波长218nm,色谱柱柱温30℃;本方法加标回收率为86.9%~100.6%,日内相对标准偏差≤9.42%,日间相对标准偏差≤5.79%。本试验建立的DON提取与纯化方法简单,不需要任何特殊的试剂与设备,且该检测方法回收率高,准确度和精密度均能满足试验要求,为DON纯品的定量提供了技术支撑。

幼儿洗胃半坐卧位与左侧卧位的比较

幼儿误食毒物，在急诊科偶有发生。幼儿年纪小，表达能力有限，一旦发现应及时洗胃。目的是清除胃内毒物，避免毒物的吸收，提高抢救成功率。幼儿在解剖、心理、生理等方面不同于成人，所以幼儿洗胃在急诊抢救中是一项重要的护理操作，传统的洗胃下胃管是取左侧卧位，用压舌板撑开口腔，从口腔插入胃管的方法。改良后幼儿下胃管洗胃采用半坐卧位，固定胃管采用口含嘴固定的方法，并与传统方法进行对比研究，现报告如下。