基因枪介导法转化苎麻获得转基因植株的研究

以苎麻品种中苎1号子叶愈伤组织为受体材料,利用基因枪法将外源双价抗虫基因(Cry-IA+CpTI)导入苎麻,以期建立基因枪转化苎麻的技术体系。结果表明,基因枪转化苎麻的最佳条件为轰击压力1300psi、金粉+DNA用量500μg+1.0μg/枪、轰击距离9cm、轰击次数2次,共获得4株阳性转基因植株。苎麻子叶愈伤组织的基因枪转化法是苎麻遗传转化的新方法,为建立苎麻基因枪转化体系奠定了基础。

麝香百合热激转录因子基因LlHsfA1的克隆与表达分析

利用RACE的方法从麝香百合‘白天堂’叶片中克隆出热激转录因子(Heat shock transcription factor,Hsf)A1家族中一个成员的cDNA全长序列。该基因编码序列长为1 587 bp,编码528个氨基酸,蛋白质分子量为59.056 kD。序列和进化树分析表明,该基因具有A1类Hsf的5个关键功能域和调控基序,与水稻的OsHsfA1a氨基酸序列同源性最高,说明该基因为HsfA1家族的新成员,将其命名为LlHsfA1。利用荧光定量PCR的方法分析LlHsfA1表达模式,结果表明常温下其可在根、鳞茎和叶片中表达,说明该基因为组成型表达;42℃热激处理1~12 h,该基因的表达量在叶片中呈现"上升—下降"交替变化的趋势。亚细胞定位表明,LlHsfA1定位在细胞核和细胞质中。

百合类体细胞胚和体细胞胚的形态学与组织学研究

以东方百合‘Siberia’的无菌苗叶柄为试材,诱导产生初始分生结节组织。其后对分生结节组织进行分化再生采用体式显微镜观察和石蜡切片分析的方法对诱导得到的类体细胞胚和体细胞胚再生结构进行形态学和组织学观察。百合类体细胞胚结构呈球形至心形结构或芽状,组织内部主要由薄壁细胞组成,与母体组织存在着明显的维管组织联系,具有多个维管组织中心,其外形与体细胞胚极为相似。百合体细胞胚发源于分生结节表面新生的胚性愈伤组织,经历球形、椭圆形和子叶形胚阶段发育形成完整的植株,在整个发育过程中与母体愈伤组织在整个发育过程中无维管组织联系,且它的根芽两极同时发生,相互联系。研究结果表明,两种再生结构虽然具有极相似的外观形态,但是在发育方式和内部组织结构上截然不同。