白蛋白对肾小管上皮细胞血管紧张素转换酶2表达的抑制作用

目的观察白蛋白对人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA和蛋白表达的影响,探讨蛋白尿激活肾脏局部RAS的机制。方法采用不同浓度的牛血清白蛋白(BSA)作用HK-2细胞不同时间。以实时RT-PCR和Western印迹检测ACE2 mRNA和蛋白的表达。采用放射免疫法检测细胞上清液中血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)含量。采用激光共聚焦显微镜观察ACE2蛋白的表达。结果与对照组(相对表达量为0)相比,BSA使ACE2 mRNA表达显著减少(2.5mg/ml:—1.05±0.12;5mg/ml:—1.30±0.11;10mg/ml:—2.54±0.44;P均<0.05)。同时,BSA使ACE2蛋白表达显著降低(对照组:0.90±0.10;2.5mg/ml:0.66±0.09;5mg/ml:0.50±0.07;10mg/ml:0.35±0.05;P均<0.05)。其中BSA(10mg/m1)使ACE2 mRNA及蛋白表达减少呈时间依赖性(P均<0.05)。与对照组相比,不同浓度BSA组的细胞上清液中的ATⅡ均显著升高(P均<0.05)。激光共聚焦显微镜可见ACE2主要分布于细胞膜。结论BSA可显著抑制HK-2细胞ACE2 mRNA和蛋白的表达,此作用所导致的近曲小管间质液ATⅡ浓度升高可能与间质纤维化相关。