邻苯二甲酸酯对男性(雄性)生殖毒性的研究进展

邻苯二甲酸酯是普遍存在的低毒性环境污染物,邻苯二甲酸酯类化合物通过干扰下丘脑-垂体-性腺轴这一重要内分泌途径产生生殖毒性,对男性(雄性)生殖系统发育、生殖和激素分泌产生不利影响。邻苯二甲酸酯的暴露会导致胎儿生殖器官发育异常,干扰男性(雄性)生殖系统发育,影响精子成熟和活力,对男性(雄性)生殖系统产生损伤,影响生育力。

超高效液相色谱法测定男性精浆中生物胺含量的研究

目的:建立一种超高效液相色谱测定人精浆中腐胺、亚精胺、精胺3种生物胺含量的方法。方法:精浆样品用5%三氯乙酸提取,丹磺酰氯柱前衍生化,采用C18(2.1×50 mm,1.7μm)色谱柱,以水-乙腈为流动相梯度洗脱,流速为0.3 ml/min,检测波长为245 nm,柱温:35℃;进样量3.0μl。测定了捐精志愿者52例(正常组)和无精子症患者23例(无精子症组)精浆中3种生物胺的含量,与精液常规参数进行相关性分析。结果:在上述色谱条件下,3种生物胺在呈良好的线性关系(r≥0.999),最低检出限为0.03~0.08μg/ml;仪器精密度较好RSD≤0.72%,平均回收率为89.74%~108.87%。正常组精浆中生物胺含量[腐胺(8.19±7.85) mg/ml,亚精胺(77.30±32.58) mg/ml,精胺(246.44±83.99) mg/ml]显著高于无精子症组[腐胺(2.43±1.38) mg/ml,亚精胺(31.99±16.21) mg/ml,精胺(166.15±79.28) mg/ml]。正常组和无精子症组中精胺与亚精胺、亚精胺与腐胺的含量均存在显著相关性(P﹤0.05)。正常组精浆3种生物胺含量与精液参数没有相关性。结论:建立的方法灵敏度高、重现性好、出峰时间短,可以快速准确检测男性精浆中生物胺含量。

精液中生殖相关酶的研究进展

在精子的生成、成熟和受精中,精液中的多种酶起着关键性作用。如果由于疾病或某些因素影响精液中酶的活性必将影响精子功能,对男性生殖产生不利影响。对精液中酶的检测可以帮助评估精液质量,并反映附属性腺功能状况,本文对精液中酶的研究进展进行综述。

捐精志愿者精浆生化指标与精液常规参数的相关性分析

目的:探讨捐精志愿者精浆生化指标与精液常规参数的关系,以及精浆生化指标之间的关系。方法:84例河北省人类精子库的捐精志愿者为研究对象,采用全自动生化分析仪方法检测精浆中性α-葡糖苷酶(NAG)、果糖(Fru)、柠檬酸(CA)、酸性磷酸酶(ACP)、锌(Zn)、尿酸(UA)、乳酸脱氢酶(LDH)和α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)含量,并分析它们之间以及与常规精液参数之间的相关性。结果:精子浓度和总数与精浆NAG、ACP、Zn、CA、LDH和α-HBDH呈正相关(P<0.05),与Fru呈负相关(P<0.05);前向运动精子百分率与精浆Zn呈正相关(P<0.05);CA与NAG、Zn、LDH、α-HBDH、ACP呈正相关(P<0.01),与Fru呈负相关(P<0.01);NAG与Zn、LDH、α-HBDH、ACP呈正相关(P<0.05);Fru与ACP呈负相关(P<0.01);Zn与LDH、α-HBDH、ACP呈正相关(P<0.01);LDH与α-HBDH、ACP呈正相关(P<0.01);UA与ACP呈负相关(P<0.05)。结论:健康人群精浆中的生化指标不仅相互之间密切相关,与部分精液常规参数也具有一定的相关性。

精浆硫醇物测定方法的建立及其在高尿酸血症患者精浆中的应用探讨

目的:建立一种反相超高效液相色谱-荧光检测法(UPLC-FL)同时测定精浆同型半胱氨酸(Hcy)、半胱氨酸(Cys)、半胱氨酰甘氨酸(CysGly)、谷胱甘肽(GSH)的方法,分析高尿酸血症(HUA)患者精浆中4种硫醇物的含量。方法:将精浆样品通过用三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)还原,用三氯乙酸(TCA)溶液进行蛋白沉淀,再用7-氟苯呋咱-4-硫酸铵盐(SBD-F)进行衍生化反应,选用C18色谱柱分离,流动相A为0.025 mol/L磷酸二氢钾KH2PO4(pH 3.0),B为纯甲醇,等度洗脱,在激发波长380 nm、发射波长510 nm的条件下进样。结果:各硫醇物相关系数R2都达到0.999以上,平均回收率在94.23~107.87%间。高尿酸血症组四种硫醇物质含量与正常组相比均有显著性差异(P﹤0.05),其中Cys[(108.01±48.03)μmol/L vs(250.10±55.87)μmol/L]、Hcy[(113.97±6.32)μmol/L vs(48.35±15.07)μmol/L]、GSH[(3.15±1.48)μmol/L vs(4.63±1.17)μmol/L]浓度升高,CysGly[(12.79±3.18)μmol/L vs(5.94±0.99)μmol/L]浓度降低。结论:本研究建立的反相超高效液相色谱-荧光检测法首次实现了精浆Hcy、Cys、CysGly、 GSH的同时检测,适合于实验室研究和临床常规检测。高尿酸血症患者生殖系统产生明显的氧化损伤。

肥胖与精液质量及精浆肿瘤标志物的相关性研究

目的探讨肥胖对精液质量及精浆肿瘤标志物表达的影响。方法选取2019年1月至6月在河北省人类精子库捐精的44例体重指数(BMI)<24kg/m^(2)的志愿者作为对照组,另选取河北省生殖医学中心就诊的39例BMI≥28kg/m^(2)的男性不育患者作为观察组。采用计算机辅助精液分析(CASA)系统检测精液参数,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测精浆糖类抗原125(CA125)、糖类抗原199(CA199)、糖类抗原153(CA153)、转化生长因子β1(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、酸性成纤维细胞生长因子-1(aFGF-1)、癌胚抗原(CEA)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、可溶型人白细胞抗原-G(sHLA-G)水平。结果与对照组比较,观察组体重、BMI明显升高(P<0.01),精子浓度、精子总数明显降低(P<0.05),精浆VEGF表达水平明显降低(P<0.01),sHLA-G表达水平明显升高(P<0.01);除VEGF、sHLA-G两个因子外,CA125、CA199、CA153、TGF-β1、CEA、NSE、CYFRA21、EGF、aFGF-1、IGF-1相互间均显著相关(P<0.01),sHLA-G仅与IGF-1因子具有相关性(P<0.05),VEGF与其他因子均无相关性(P>0.05)。结论肥胖导致精液质量下降,精浆VEGF与sHLA-G水平可能是肥胖人群精液质量下降的重要原因之一。

大鼠睾丸发育过程中锌、含锌酶含量与锌转运体(ZnT)表达的变化

目的检测大鼠睾丸不同发育阶段中锌含量和锌转运体(ZnT)的表达,探讨锌稳态在睾丸发育过程中的作用及机制。方法将雄性SD大鼠随机分为4周龄组(n=10)、8周龄组(n=10)、12周龄组(n=10)和32周龄组(n=10),分别饲养至相应周龄。取新鲜大鼠附睾尾部精子检测精子总数、活力,睾丸组织HE染色观察病理学变化,化学发光法测定血清睾酮水平,电感耦合等离子体质谱法测定睾丸组织锌含量,Zinquin探针测定大鼠睾丸锌离子水平,酶联免疫吸附法测定含锌酶(ALP、ADH、LDH)活性,实时荧光定量PCR和Western blot检测睾丸组织中锌转运体ZnT1⁃9 mRNA和蛋白表达。结果8周龄组大鼠+睾丸内开始出现精子,精子总数随大鼠周龄而增加,8、12周龄组大鼠精子活力和睾酮水平显著高于4、32周龄组大鼠(P<0.05),8、12、32周龄组大鼠睾丸游离锌离子水平显著高于4周龄组大鼠,12周和32周龄大鼠睾丸ALP活性明显低于4周和8周组(P<0.05),8、12、32周龄组大鼠睾丸ZnT3 mRNA和蛋白水平显著高于4周组(P<0.05),8、12、32周龄组大鼠睾丸ZnT4 mRNA水平显著高于4周组(P<0.05),12、32周龄组大鼠睾丸ZnT8 mRNA和蛋白水平显著高于4周和8周组(P<0.05)。结论在大鼠睾丸发育过程中,锌+含锌酶和锌转运体(ZnT)发生动态变化,为进一步研究锌稳态对雄性生殖系统发育的影响提供依据。