Coronin 2A shRNA慢病毒感染对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

目的:探讨Coronin 2A在骨肉瘤细胞生长中的调控作用。方法:采用免疫组化法检测正常骨和骨肉瘤组织中Coronin 2A蛋白的表达。采用qRT-PCR检测人骨肉瘤细胞U2OS、HOS和Saos-2中Coronin 2A mRNA的表达水平。取U2OS细胞分为2组,分别感染含Coronin 2A shRNA的慢病毒和含非特异shRNA的慢病毒(阴性对照),采用Western blot和qRT-PCR验证shRNA的干扰效率,采用MTT法和Brdu细胞增殖实验评估2组细胞生长和增殖能力,克隆形成实验评估细胞克隆形成能力,采用流式细胞术和Annexin V-APC染色法检测细胞周期和细胞凋亡。结果:骨肉瘤组织中Coronin 2A蛋白的高表达率高于正常骨组织(P=0.003)。骨肉瘤细胞系中,U2OS细胞Coronin 2A mRNA的表达水平最高。与阴性对照组比较,Coronin 2A shRNA慢病毒感染后U2OS细胞中Coronin 2A蛋白和mRNA的表达水平下调,细胞生长、增殖能力和克隆形成能力受抑,S期细胞减少,G1期、G2/M期细胞增多,凋亡率升高(P<0.05)。结论:Coronin 2A在骨肉瘤细胞生长过程中发挥重要的调控作用。

肉瘤样肝癌24例临床分析

目的:通过分析各分期肉瘤样肝癌(sarcomatoid hepatocellular carcinoma,SHC)的临床资料、治疗方法及预后,提高临床医生对肉瘤样肝癌的认识.方法:回顾性分析郑州大学第一附属医院2015年1月至2019年12月病理确诊为SHC 24例患者临床资料并随访,男性16例,女性8例.中位发病年龄55岁.结果:临床表现以腹痛、发热为主,肝炎病毒感染者占66.7%,肝硬化者占79.2%.Ⅲ~Ⅳ期占87.5%.平均肿瘤长径6.27 cm.1例行肝移植,8例行手术为主治疗,3例仅进行局部治疗,余进行对症支持、化疗、靶向或联合免疫治疗.入院CT或MRI均有异常表现,活检或术后病理均符合SHC.随访1~39.7个月,中位随访时间4.8个月,术后患者中位总生存期(overall survival,OS)为4.7个月,中位无病生存期(disease-free survival,DFS)为2.3个月.Ⅲ~Ⅳ期患者中位OS为4.8个月.结论:对于Ⅰ期肉瘤样肝癌患者,治疗以外科切除为主,术后给予辅助治疗可使患者受益.对于Ⅲ~Ⅳ期肉瘤样肝癌患者,手术获益局限,可行全身化疗、口服靶向药、局部治疗等减轻肿瘤负荷.但无论分期及治疗措施如何,SHC患者普遍预后差.化疗加靶向药物联合免疫治疗可能成为晚期SHC的治疗新方向.

公文写作中如何体现领导意图

公文是领导意图的书面体现,不仅有质量要求,也有时间限制.对机关文秘人员而言,除少数早已列入机关工作计划的重要公文可以从容准备、反复推敲外,大多数都是随工作进程的需要而提出来的,具有突发性和突击性.要想在有限的时间内保质保量地完成公文撰写任务,使之成为领导意图的真实表达,就必须掌握一定的方法和技巧.

动态增强磁共振联合弥散加权成像在新辅助化疗乳腺癌患者术前评估中的作用

目的评价动态增强磁共振联合弥散加权成像在新辅助化疗乳腺癌患者术前评估中的作用。方法 30位经巴德针(Bard magnum biopsy needles)穿刺活检确诊为乳腺癌的患者,临床分期ⅡA～ⅢC,均予以新辅助化疗(含紫杉醇类和/或蒽环类)2～5周期。所有患者手术前均行磁共振成像(MRI)、B超及临床检查,以术后病理检查结果为金标准,3种方法所测出肿块的最长径与最短径分别与之相对比,评价MRI在评估肿块大小范围上的准确性及在判断肿块化疗后形态改变上的作用,并且评估MRI在判断腋窝淋巴结转移方面的作用。结果 MRI检查测出的肿块最长径与病理检查测出的最长径的关联性最高(r=0.840,P<0.05),B超检查与病理检查呈中度关联(r=0.635,P<0.05),临床检查与病理检查的关联性最低(r=0.583,P<0.05);最短径得出的结果与之类似。新辅助化疗后残留肿块在MRI上呈现两种形态:20%为多发结节型及树枝型,80%为单发结节型。MRI在腋窝淋巴结是否转移的判断上,敏感度为45.5%,特异度为50.0%,准确度为46.7%。根据最后动态增强磁共振联合弥散加权成像的结果 ,有5例患者改变了原订的手术方案。结论动态增强磁共振联合弥散加权成像在乳腺癌新辅助化疗后能更好评估残留癌的范围及形态,帮助外科医师更好地进行术前评估,更好地选择手术方式和确定手术切缘,但其在判断腋窝淋巴结状态的价值有待进一步探讨。

高血氨致大鼠急性肝损伤新模型的建立与初步分析

目的依次建立大鼠急性肝衰竭模型，D-氨基半乳糖（D-gal）急性肝损伤模型和氯化铵（NH4e1）诱导急性肝损伤模型，探索肝衰竭中高血氨再次诱导肝细胞损伤机制。方法（1）大鼠急性肝衰竭动物模型建立：将雄性SD大鼠36只分为等渗盐水对照组（n=10），12h急性肝衰竭模型组（n=10），24h急性肝衰竭模型组（力=16）；D-gal400rng／kg＋脂多糖50μg／kg混合剂量给予各组大鼠腹腔注射，分别在给药后12h或24h处死各组大鼠。（2）NH4Cl所致肝脏损伤动物模型的建立：将雄性SD大鼠40只分为3组：NH4C1模型组（力=20），D-gal肝脏损伤组（力=10）和等渗盐水对照组。了=10）；NH。C1模型组每8h给予NH。Cl10ml／kg灌胃，急性D-gal肝脏损伤组则于大鼠腹腔每6d注射1次D-gal（800mg／kg），对照组为等渗盐水10ml／kg灌胃，30d后处死各组大鼠。（3）分别检测大鼠血氨，血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）；凝血酶原时间活动度比率（PT-A），甲胎蛋白（AFP），Y-谷氨酰转移酶（GGT）；肝脏HE染色后观察病理变化和细胞凋亡指数；统计学分析采用秩和检验。结果在大鼠急性肝衰竭动物模型中，12h后出现转氨酶升高【ALT和AST分别为（1202．51士282．00）U／L和（1560．14±298．98）U／L]，血氨随之升高[（165．9土23．6）μmol／L]，24h检测ALT、AST和血氨分别为（774．40土207．65）U／L、（967．60±121．94）U／L和（143．4-4-18．1）Hmol／L，与等渗盐水对照组比较，尸值均〈0．05。24h后转氨酶和血氨下降，但未发现AFP（除急性肝衰竭24h组外）、GGT变化肝脏病理检查显示各组肝细胞出现片状弥漫性出血性坏死，淤血，并有灶状出血，伴随细胞凋亡指数逐渐上升。但在NH。C1所致急性肝脏损伤中，6h后即检测到血氨升高，ALT和AST同比增加，30d后检测血氨，ALT和AST进一步升高，但AFP，GGT与对照组相比，无明显差异；HE染色未见肝细胞明显变性、坏死和淋巴细胞浸润，无肝细胞再生或纤维组织增生。另外，30dNH-el模型组和D-gal肝损伤组内肝组织均见较多的凋亡细胞，但D—gal肝损伤组可见明显炎性细胞侵润。除血氨外，其余检测指标与NH-C1组差异均无统计学意义。结论在急性肝衰竭模型中，血氨随着肝细胞坏死而升高，相同血氨浓度可以导致大鼠肝脏再次损伤，但这种损伤与D-gal诱导肝损伤明显不同：不是通过肝细胞坏死，炎症细胞侵润实现，而是可能通过细胞凋亡途径，抑制肝细胞再生，进一步导致肝细胞功能受阻。