依托咪酯对PI3K/AKT通路及非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响

目的:探讨依托咪酯对磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路及非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响.方法:设A549细胞组、5-氟尿嘧啶组、依托咪酯低剂量组、高剂量组;5-氟尿嘧啶组、依托咪酯低剂量组、高剂量组分别加入5-氟尿嘧啶组、不同浓度的依托咪酯,使其最终浓度为100.0μg/mL、100.0μg/mL、200.0μg/mL,培养72h.细胞计数试剂盒-8评估细胞增殖水平,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,Transwell室测定细胞侵袭性,RT-PCR法及WEST-BLOT法测定细胞磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化AKT(p-AKT)mRNA和蛋白水平.结果:与A549细胞组比较,5-氟尿嘧啶组、依托咪酯低、高剂量组OD值、存活率水平、穿膜数、p-PI3K、p-AKT mRNA和蛋白降低(P<0.05),凋亡率水平升高(P<0.05);且随着依托咪酯剂量的增加,依托咪酯各剂量组OD值、存活率、穿膜数、p-PI3K、p-AKT mRNA和蛋白逐渐降低(P<0.05),凋亡率水平逐渐升高(P<0.05).与5-氟尿嘧啶组比较,依托咪酯低剂量组OD值、存活率水平、穿膜数、p-PI3K、p-AKT mRNA和蛋白升高(P<0.05),凋亡率水平降低(P<0.05);依托咪酯高剂量组OD值、存活率水平、穿膜数、p-PI3K、p-AKT mRNA和蛋白降低(P<0.05),凋亡率水平升高(P<0.05).结论:依托咪酯能抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭,促进肺癌A549细胞凋亡;其机制与依托咪酯通过减弱p-PI3K、p-AKT mRNA和蛋白磷酸化水平,进而抑制PI3K/AKT通路的激活传导有关.

右美托咪定对缺血性卒中小鼠小胶质细胞极化的影响

目的探究右美托咪定(Dex)对缺血性卒中小鼠缺血侧小胶质细胞极化的影响.方法小鼠为C57BL/6(C57)小鼠和C57BL/6背景敲除Nrf2基因(Nrf2^(-/-))小鼠,将两种小鼠分为假手术组(C57-Sham组和Nrf2^(-/-)-Sham组)、脑缺血组(C57-MCAO组和Nrf2^(-/-)-MCAO组)、Dex组(C57-Dex组和Nrf2^(-/-)-Dex组).小鼠体内构建缺血性脑卒中模型,假手术组小鼠仅分离颈动脉,不插入线栓.缺血性卒中模型构建期间,Dex组小鼠腹腔注射Dex溶液(50 mg/kg)治疗.24 h后评估各组小鼠神经功能.将小鼠处死,取外周血用于炎性细胞因子检测,取全脑组织用于TTC染色,取缺血侧脑组织用于荧光定量PCR与West-ern blot检测.结果C57小鼠中,与C57-Sham组相比,C57-MCAO组神经功能评分增加,出现梗死区域,外周血中炎性细胞因子含量增加,M1型小胶质细胞极化标记基因表达明显提高,Nrf2蛋白表达减少但HO-1蛋白表达增加,且NLRP3与p-NF-κB蛋白表达增加.与C57-MCAO组相比,C57-Dex组神经功能评分减少,梗死区域面积占比降低,外周血中炎性细胞因子含量减少,M1型小胶质细胞极化标记基因表达明显降低,M2型小胶质细胞极化标记基因表达明显升高,N rf2蛋白表达增加且H O-1蛋白表达进一步增加,但NLRP3与p-NF-κB蛋白表达减少.Nrf2^(-/-)小鼠脑组织中不表达Nrf2蛋白,HO-1蛋白表达极低,与Nrf2^(-/-)-Sham组相比,Nrf2^(-/-)-MCAO组与Nrf2^(-/-)-Dex组小鼠神经功能评分明显增加,出现明显梗死区域,外周血中炎性细胞因子含量增加,M1型小胶质细胞极化标记基因明显提高,且NLRP3与p-NF-κB蛋白表达增加.结论Dex通过激活Nrf2/HO-1信号通路,提高M2型小胶质细胞极化,抑制M1型小胶质细胞极化,达到抑制神经炎症,逆转神经功能损伤,减少脑梗死面积占比的作用.

帕瑞昔布钠对宫颈癌细胞COX-2/PGE2通路及细胞学行为的影响

目的:探究帕瑞昔布钠对宫颈癌HeLa细胞环氧化合酶-2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)通路及其上皮间质转化(EMT)、迁移和侵袭的影响。方法:磺酰罗丹明B(SRB)法检测帕瑞昔布钠在不同浓度和时间点对HeLa细胞存活率的影响,筛选出合适的浓度和时间点。将Hela细胞分为帕瑞昔布钠0μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L组,处理24 h后,Transwell小室法检测各组细胞迁移和侵袭能力,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组细胞中通路蛋白COX-2、PGE2及其下游转录激活子3(STAT3)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、磷酸化AKT(p-AKT)、上皮间质转化相关E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)以及迁移侵袭相关基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)蛋白表达水平。结果:帕瑞昔布钠作用24、48、72 h均可降低HeLa细胞存活率;与帕瑞昔布钠0μmol/L组相比,帕瑞昔布钠25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L组HeLa细胞迁移和侵袭能力、COX-2、PGE2、vimentin蛋白表达水平、STAT3、AKT磷酸化水平和MMP2/TIMP2蛋白比值依次降低,E-cadherin蛋白表达水平依次升高,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。结论:帕瑞昔布钠可降低HeLa细胞EMT及迁移侵袭能力,可能与抑制COX-2/PGE2通路有关。

右美托咪定调控Nrf2/HO-1通路对H2 O2诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:探讨右美托咪定通过调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)通路对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞氧化应激损伤发挥保护作用。方法:体外培养H9c2心肌细胞,选择对数生长期细胞进行实验,分为对照组、模型组、右美托咪定低、中、高剂量组。对照组不进行处理;模型组加入终浓度为200μmol·L^-1的H2O2;右美托咪定低、中、高剂量组分别加入终浓度为5,10,20μmol·L^-1的右美托咪定,同时给予终浓度为200μmol·L^-1的H2O2,继续培养24 h后,检测各组细胞存活率、凋亡率、细胞中抗氧化指标、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、HO-1和Nrf2蛋白变化情况。结果:与对照组相比,模型组和右美托咪定各剂量组H9c2细胞存活率、谷胱甘肽(GSH)、NO、HO-1和Nrf2蛋白水平降低(P<0.05),凋亡率、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、TNF-α和IL-6升高(P<0.05);与模型组相比,右美托咪定各剂量组H9c2细胞存活率、GSH、NO、HO-1和Nrf2蛋白水平升高(P<0.05),凋亡率、LDH、MDA、ROS、TNF-α和IL-6降低(P<0.05),且右美托咪定各剂量组之间上述指标呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:右美托咪定可能通过激活Nrf2/HO-1通路,减轻心肌细胞的氧化损伤,促进细胞增殖和抑制细胞凋亡,从而发挥心肌保护作用。

右美托咪定注射液用于下肢骨科手术患者的临床研究

目的观察右美托咪定注射液用于下肢骨科手术患者的临床疗效及安全性。方法将80例择期进行下肢骨科手术患者随机分为对照组和试验组,每组40例。2组患者均用腰-硬联合麻醉方式进行麻醉。对照组给予0.5~2.5 mg·kg^(-1)1%丙泊酚,静脉注射,之后以1~4 mg·kg^(-1)·h^(-1)持续泵注给药至手术结束;试验组先给予4μg·mL^(-1)右美托咪定溶液,静脉注射,然后以0.4μg·kg^(-1)静脉泵注10 min,最后以0.2~0.7μg·kg^(-1)·h^(-1)速率持续泵注给药至手术结束。比较2组患者的血流动力学指标,白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,以及药物不良反应的发生情况。结果试验过程中共脱落6例。手术开始后30 min时,试验组和对照组的心率(HR)分别为(82.82±6.27)和(96.51±12.64)beat·min^(-1),手术开始后60 min的HR分别为(94.10±5.33)和(109.12±16.37)beat·min-1,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后即刻,试验组和对照组的IL-6分别为(87.45±14.46)和(104.36±15.67)pg·mL^(-1),TNF-α分别为(17.83±2.20)和(26.34±3.31)pg·mL^(-1),差异均有统计学意义(P<0.05);术后3 d,试验组和对照组的IL-6分别为(78.92±12.37)和(89.02±13.35)pg·mL^(-1),TNF-α分别为(6.69±6.35)和(9.82±6.37)pg·mL^(-1),差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组发生的药物不良反应有恶心呕吐、呼吸困难和躁动;对照组发生的药物不良反应有恶心呕吐、躁动、呼吸困难和舌根后坠。试验组和对照组的总药物不良反应发生率分别为10.53%和16.67%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论右美托咪定注射液用于下肢骨科手术患者的临床疗效确切,其能维持术中血流动力学稳定,降低术后炎症因子水平,且不增加药物不良反应的发生率。

阳朔有个家庭股份企业

在阳朔有个股份合作企业,该企业由一家人组成,共24口人,劳动力10个,他们的企业是果园,产品是柑橙。户主叫倪忠春,去年年终固定资产达28万多元,纯收入达11万元,每工日值达18.4元,年劳动力平均工资为4000元,每股年终分红利8000元。 实行联产承包责任制。