Acinetobacter tandoii SC36 ppk基因的克隆与表达

磷含量过多是引起水体富营养化的关键因子之一,利用聚磷微生物能有效减少水体中的磷含量,而多聚磷酸盐激酶(PPK)在微生物聚磷中起着重要作用。本研究以聚磷菌Acinetobacter tandoii SC36的ppk1-44基因为材料,利用生物信息学方法预测该基因的生物学性质,将该基因克隆至大肠杆菌中,通过不同培养条件优化该基因的表达,并对基因的功能进行初步分析。生物信息学预测结果表明:由ppk1-44所编码的PPK1-44蛋白具有1个保守的PPK C端结构域、1个ATP结合位点及2个镁离子结合位点,属于亲水性蛋白。聚磷活性实验结果显示:与对照组的吸磷量相比,工程菌BL44的吸磷量并无明显提高,但在28℃时,工程菌BL44的生长状况明显优于对照组,表明在一定条件下过量表达ppk44基因可提高大肠杆菌的低温耐受能力。