马氏珠母贝精子质量形态评定中不同染色法染色效果的比较

为筛选出适宜于马氏珠母贝Pinctada martensii精子形态分析的染色方法,采用曙红Y和结晶紫染液对不同方法制作的马氏珠母贝精液抹片进行染色,并通过显微镜观察比较染色效果。结果表明:1)采用将精液先抹片后染色(0.8 mg/mL曙红Y染液)的方法时,精子头部着色不完全,染色效果不随染色时间的延长而改善,精子形态特征不明显,故该方法不适于精子形态检测;2)将精液与20 mg/mL的曙红Y染液等体积混合后抹片,精子头部着深红色,尾部着浅红色,精子各部分结构清晰,形态特征明显,背景干净,对比明显;3)用5 mg/mL的结晶紫染液对精液进行渗透染色时,精子形态染色特征明显,头部着深紫色,尾部着浅紫色,背景干净,可较准确地判断精子的形态特征;4)依精子形态对马氏珠母贝精子进行分类,并确定了主要的畸形类型及其特点,马氏珠母贝精子畸形主要集中在精子的颈部和尾部,头部畸形情况较少;5)采用两种染色方法判定的正常精子率之间无显著差异(P<0.05),数据稳定,因此,这两种染色方法均可用于马氏珠母贝精子形态的评价中。

马氏珠母贝育珠细胞小片和珠核处理技术研究Ⅱ:不同处理液在广东徐闻的育珠效果

通过海区插核育珠试验,对不同处理液匹配组进行进一步优化、筛选,找出适于广东育珠海区的育贝小片处理液及与之匹配的珠核处理液。结果表明：1）匹配适宜的处理液有降低吐核率的作用,8个试验小组中W0、Y3组的吐核率仅31%~32%,明显低于对照组的46.2%（P〈0.01）,说明匹配液有明显增加组织亲和力、降低吐核率的效果;2）育珠贝的死亡主要发生在育珠前期,与贝的吐核行为有关;3）小片处理液中,C类药物成分对吐核率的高低有影响,0.6%C2不适宜添加到处理液中,而1%C3添加到处理液中有降低吐核率的效果;4）筛选出W0、W1、Y3三组适宜的匹配方案,即W0、W1、Y3三种小片处理液与核处理液C3匹配适宜,其中W0匹配组育珠效果最佳,即成活率为57.8%,百贝收珠数为101.2粒、优珠率为67.5%,比传统处理组（对照组）有明显提高;5）对W0、W1、Y3三组的不同育珠时限（8、10、13个月）的育珠情况进行了比较,当育珠期延长至1年时,Y3组育珠效果良好;6）利用评价指数（即优质珍珠数占手术贝总数的比例）可评判育珠效果,与分析、综合评估结论一致,前者可量化评判数值,使评判更加直观,简易。

马氏珠母贝育珠细胞小片和珠核处理技术研究Ⅳ:不同处理液在广西营盘育珠效果

通过广西营盘海区插核育珠试验,比较6组不同的细胞小片处理液及珠核处理液的育珠效果。结果表明:1)处理组手术贝休养期的平均死亡率仅3.9%,显著低于对照组(10.9%)(P<0.01),表明处理液具有促进伤口愈合、抗感染、提高成活率的作用;2)处理组休养期吐核率与对照组差异不显著(P>0.05),说明处理液对增加组织亲和力的效果不明显;3)除Y2处理组外,其余处理组育珠4个月的成活率平均为77.0%,比对照组高出7.0%～14.5%,且W组的单位收珠数量及珍珠品质等均优于对照组,表明W组处理液在促进珍珠质分泌、提高成活率、成珠率方面的作用优于对照组。比较分析处理组在海南陵水、广东徐闻及广西营盘3海区的育珠效果,优化筛选出2个优良匹配方案即小片处理液W0、Y3与核处理液C3匹配。W0、Y3两试验组在广西营盘海区进行中试,结果发现,休养期死亡率(8.0%、7.3%)显著低于对照组(11.7%)(P<0.05),育珠4个月的死亡率(19.7%、18.3%)显著低于对照组(31.7%)(P<0.05);育珠8个月的W0组的成活率为73.6%,成珠率为54%、优珠率为61.1%,分别比对照组提高约12%,表明筛选出的W0、Y3两优良匹配组同样适用于营盘海区的插核育珠处理,可提高育珠效果。

贝类精子质量检测与评价方法研究Ⅰ:染色法检测马氏珠母贝精子的存活率的研究

用曙红Y、台盼蓝染料对马氏珠母贝(Pinctada martensii)精子进行染色,通过对不同制片方法、不同的染色时间和不同染料浓度的染色效果进行比较,筛选出可通过染色特征来检测精子死活及活精率的适宜方法,结果显示:(1)经染色后,死、活精子呈现出明显不同的特征:活精子均不着色,头部呈梨形、无色透明状;死精子着红色(曙红Y染色)或蓝色(台盼蓝染色),体积变大,头部近圆形。(2)曙红Y、台盼蓝最适染色浓度分别为0.04%和0.2%;最佳染色时间均为15min。(3)检测到的精子死亡率即实测精子死亡率,与"理论死亡率"之间有明显的相关性,相关系数为R=0.99(P<0.01),并且两种染色法的观察结果一致,表明这些检测结果客观可信;(4)染料对活精子毒性的检测显示,染色45min内,精子死亡率无显著性增加(P>0.05),说明在该时间范围内,染液对精子的毒性较小,精子存活率的检测结果稳定可靠。这些研究表明,曙红Y、台盼蓝两种染色法准确灵敏,均适宜用于马氏珠母贝精子质量的检测与评价。

掉膘、肝胆综合症、死鱼,鱼类越冬困难重重,备好这种“越冬粮”轻松渡劫效益翻番

严格来讲,鱼类的越冬期间一般是指池塘开始结冰到冰面融化。养殖生产上把鱼类停止摄食的阶段作为越冬期。我国地理幅员辽阔,冬季气温从北到南相差较大,鱼类越冬期的持续时间长短不一、越冬面临的温度对鱼类的影响程度也不一样,相应的应对措施也不一样。

加州鲈烂身病检测及精准用药处理方案浅探

近年来,加州鲈作为一种具有重要经济价值的淡水鱼类,以其自身的优势,深受广大渔民热捧,其养殖规模也逐年扩大。然而,伴随集约化养殖而来的就是疾病的频发,尤其是烂身病尤为严重。每年4、5月开始,该病逐渐爆发,尤其是隔年鲈鱼发病率相对较高。本文对加州鲈烂身病收集病样并进行了病原分离,基于药敏实验结果,对烂身病的治疗方案提出了一些建议,以期对该病的精准治疗提供可行性解决方案。