DHA的微囊化制备、应用与吸收利用研究

二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)作为一种多不饱和脂肪酸,由于其低溶解度、低稳定性,导致其在食品、保健品的应用和人体的吸收利用受到限制。本研究采用喷雾干燥技术制备DHA微囊粉,评价其在软糖中的应用,对比在加速稳定性实验中挥发性物质的含量变化。利用Caco-2细胞单层模型,考察各产品释放终产物的表观渗透系数(Apparent permeability coefficient,Papp),对比不同剂型之间的体外生物利用度。DHA微囊粉的包埋率为99.98%,DHA含量为11.2%。与DHA藻油相比,具有较好的腥味掩盖能力,能够较好应用到明胶软糖中,Papp系数提高2.23倍。通过微囊化技术制备的DHA微囊粉具有包埋率高、粒径小、水溶性高等特点,能够显著降低DHA在应用过程中的腥味物质以及提高其体外生物利用度。

不同制剂对虾青素体外生物利用度的影响

虾青素作为一种脂溶性色素,因其低溶解度、低稳定性等原因,生物利用度较低。该研究旨在探究不同制剂类型的虾青素在体外消化吸收模拟中的影响情况。该实验采用体外胃肠道消化模型,考察虾青素油、微囊粉、微粒、乳液剂型的释放度,并将体外消化得到的各制剂终产物给予Caco-2细胞单层模型,考察各制剂消化终产物的表观渗透系数(apparent permeability values,P_(app)),对比不同剂型虾青素的体外生物利用度。在虾青素各制剂体外消化中,除油剂型外,其他剂型在模拟消化液中可以形成稳定的分散体系,油、微囊粉、微粒、乳液释放度分别为14.73%、93.71%、89.07%、67.11%,在Caco-2细胞单层模型中的Papp分别为0.058×10^(-6)、0.483×10^(-6)、0.461×10^(-6)、0.656×10^(-6)cm/s。虾青素的微囊粉、微粒、乳液制剂使虾青素的释放度及透过率均显著提升,有效提高了虾青素的生物利用度。

吐纳麝香(6-乙酰基-1,1,2,4,4,7-六甲基四氢萘)对人永生化角质形成细胞HaCaT间隙连接通讯的影响

吐纳麝香(tonalide,AHTN)广泛存在于各种生物和环境介质,易生物富集,具有内分泌干扰效应,皮肤接触是其进入人体的主要途径。细胞间隙连接通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)是普遍存在于相邻细胞间的直接通讯通道,其功能的抑制与癌症的发生发展密切相关。目前AHTN对人体皮肤细胞GJIC的影响尚未见报道。本研究选用人永生化角质形成细胞HaCaT为体外(in vitro)暴露实验的材料,MTT法检测环境相关浓度AHTN对HaCaT细胞活性的影响,细胞划痕标记染料示踪技术(scrape-loading and dye transfer,SLDT)检测AHTN对GJIC功能的影响,通过对GJIC生物标志物及MAPK/ERK和PI3K/AKT信号通路的定量分析,探究AHTN调控HaCaT细胞GJIC功能的分子机制。细胞活性检测发现,10^(-8) mol·L^(-1)的AHTN暴露24 h和10^(-9) mol·L^(-1)的AHTN暴露48 h均可显著促进HaCaT细胞增殖(P≤0.01);10^(-6) mol·L^(-1)的AHTN暴露48 h可显著抑制HaCaT细胞增殖(P≤0.01)。SLDT检测发现,10^(-8) mol·L^(-1)的AHTN暴露24 h,GJIC功能增强;10^(-8) mol·L^(-1)和10^(-9) mol·L^(-1)的AHTN暴露48 h,GJIC功能减弱。对不同暴露浓度和时间下雌激素受体α(estrogen receptor,ERα)的定量分析及抑制实验证明,AHTN可通过上调ERα的表达,促进或抑制下游Cx26和Cx43的表达,进而影响HaCaT细胞的GJIC功能。对信号通路的定量分析发现,10^(-8) mol·L^(-1)和10^(-9) mol·L^(-1)的AHTN暴露可上调级联分子MEK、ERK、PI3K和AKT的磷酸化水平,激活MAPK/ERK和PI3K/AKT信号通路,进而上调Cx43磷酸化水平,抑制GJIC功能。本研究首次通过体外实验证明了环境相关浓度AHTN对人体皮肤细胞GJIC的影响及可能的分子机制,为客观评价AHTN的生物毒性和致癌风险提供了科学依据。