PCR直接测序法与ARMS检测非小细胞肺癌EGFR基因突变

目的 比较PCR直接测序法与蝎形探针扩增阻滞突变系统（amplification refractory mutation system,ARMS）检测非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中EGFR基因突变的敏感性.方法 用直接测序发与ARMS法同时检测154例NSCLC中EGFR基因第18、19、20、21外显子的突变情况.结果 男性84例,女性70例,年龄33 ～ 86岁,手术切除标本71例、活检标本79例,其中鳞状细胞癌27例、腺癌121例、腺鳞癌2例;另4例为胸水.测序法32例突变（32/154,20.8％）,ARMS法52例突变（53/154,33.8％）.两种方法均检测到突变者29例,均无突变者99例,直接测序法检测到突变而ARMS法阴性者3例,反之23例,不一致率差异有显著性（P＜0.000 1）.结论 检测NSCLC中EGFR突变情况时,ARMS法较直接测序法操作步骤少,突变率高.

肾移植后原发性渗出性淋巴瘤1例并文献复习

目的:对中国首例肾移植后同时伴有胸水及腹水的原发性渗出性淋巴瘤(primary effusion lymphoma,PEL)患者的临床资料及组织学特点进行分析。方法:采用细胞形态学、免疫组化以及分子病理学方法对PEL患者进行诊断,并结合文献进行讨论。结果:PEL细胞形态学特点为细胞呈散在分布,胞体大,胞核深染,核浆比增大,核分裂相易见,可见瘤细胞的多形性;免疫组化检测结果显示,PEL细胞中人疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8)、CD30、CD45、波形蛋白(vimentin)、上皮膜抗原(epithelial membrane antigen,EMA)等抗原呈阳性表达,而T细胞或B细胞抗原呈阴性;分子病理学检查发现,PEL细胞有单克隆性IgH基因及IgK基因重排。结论:了解PEL的病理及临床特点对其鉴别、诊断及治疗有重要意义。

乳腺癌中PIK3CA基因突变与HER2表达及其基因扩增的关系

目的探讨乳腺癌中PIK3CA基因突变与HER2蛋白表达和基因扩增之间的关系。方法收集134例乳腺癌组织,采用免疫组化EnVision两步法检测HER2蛋白表达,采用FISH法检测HER2基因扩增,运用突变富集液相芯片法检测PIK3CA基因第9、20号外显子的突变状况,分析PIK3CA基因突变与HER2蛋白表达和基因扩增之间的关系。结果 134例乳腺癌组织中,49例检测有PIK3CA基因突变,突变率为36.6%,其中第9号外显子突变者16例(32.7%),20号外显子突变者33例(67.3%),50例(37.3%)检测有HER2基因扩增。在50例HER2基因扩增的病例中12例有PIK3CA基因突变(24.0%),84例无HER2基因扩增的病例中37例有PIK3CA基因突变(44.0%)。有HER2基因扩增的乳腺癌PIK3CA基因突变率较无HER2基因扩增的乳腺癌低,差异具有统计学意义(χ2=5.431,P=0.020)。PIK3CA基因突变与HER2蛋白表达的关系受HER2阳性定义标准的影响,不具有确定性。分别按乳腺癌HER2检测指南(2006版)、乳腺癌HER2检测指南(2009版)及2012年WHO乳腺肿瘤分类标准对入组病例进行分组分析,其中按2006版标准,PIK3CA基因突变率在HER2蛋白表达组间无差异(χ2=2.751,P=0.253);按2009版标准,PIK3CA基因突变率在HER2蛋白表达3+与非3+组间有差异(χ2=5.478,P=0.019);按2012版标准,PIK3CA基因突变率在HER2阳性与阴性组间有差异(χ2=4.286,P=0.038)。结论 PIK3CA基因突变率在FISH检测的HER2基因扩增阳性与阴性之间有差异,HER2基因扩增的乳腺癌PIK3CA基因突变率低,与HER2蛋白表达的关系与阳性判断标准有关。

食管鳞状细胞癌中PD-L1的表达及其预后意义

目的分析PD-L1表达与食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)临床病理因素的相关性和预后价值。方法采用免疫组化法检测253例ESCC组织中PD-L1的表达,PD-L1阳性分别被定义为1%与5%的肿瘤细胞阳性。Kaplan-Meier法构建生存曲线,单因素和多因素Cox回归模型分析独立的预后因素。结果肿瘤表达PD-L1的患者有预后较好的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。把患者分为Ⅰ+Ⅱ期(60.9%,154/253)和Ⅲ+Ⅳa期(39.1%,99/253)两个亚组,在Ⅰ+Ⅱ期患者中,PD-L1表达是独立的预后因子,提示患者预后较好(1%为分界值,P=0.046和0.021;5%为分界值,P=0.011和0.004);而在Ⅲ+Ⅳa期患者中,PD-L1表达与患者预后无明显相关性(1%为分界值,P=0.586和0.682;5%为分界值,P=0.807和0.620)。结论不同分期的ESCC中,PD-L1表达的预后意义存在差异。在Ⅰ+Ⅱ期患者中,PD-L1表达是独立的预后因子,而在Ⅲ+Ⅳa期患者中无预后意义。

368例内镜切除早期食管癌及癌前病变回顾性分析

目的回顾性分析内镜下切除的食管鳞状上皮病变的临床病理学特征与预后。方法收集2007~2013年接受内镜切除治疗的368例早期食管癌或癌前病变患者,分析其临床病理学特征。Kaplan-Meier法构建生存曲线,单因素和多因素Cox回归模型分析独立的预后因素。结果男性252例,女性116例,中位年龄61岁(16~84岁)。诊断为增生、上皮内瘤变低级别、上皮内瘤变高级别、上皮内癌(m1)、黏膜固有层浸润癌(m2)、黏膜肌层浸润癌(m3)、黏膜下浸润深度超过200μm(sm2)和黏膜下浸润深度不超过200μm(sm1)的病例数分别为47(12.8%)、61(16.6%)、61(16.6%)、54(14.7%)、38(10.3%)、63(17.1%)、12(3.3%)与32(8.7%)例。1年、3年和5年累积异时性食管病变发生率分别为4.1%、12.9%和32.6%。淋巴结或远处转移率在m3为1.54%,sm2为6.25%。1年、3年及5年总生存率分别为99.5%、97.3%和87.5%。sm2与非sm2患者转移率差异有显著性(P=0.021);但m3和sm2差异无显著性(P=0.252)。sm2和非sm2患者异时性食管病变发生率及生存率差异有显著性(P=0.401和P=0.634)。结论食管浅表鳞状上皮肿瘤内镜下切除是一种有效、相对安全的治疗手段,在特定的sm2患者,内镜切除依然是合适的;需要随访监测sm2患者第二原发肿瘤。

食管鳞状细胞癌中HER-2基因扩增和蛋白表达

目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中HER-2基因扩增和蛋白表达状况以及与临床病理指标的关系。方法收集96例ESCC组织,采用免疫组化法检测HER-2蛋白表达,采用FISH法检测HER-2基因扩增,并对患者进行随访。结果免疫组化结果显示3例HER-2呈3+,15例2+,11例1+,67例-,3+的病例中2例HER-2基因扩增,15例2+的病例中1例拷贝数>6.0。HER-2蛋白过表达与基因扩增存在显著相关性(P<0.000 1)。HER-2基因扩增/蛋白过表达与肿瘤组织无坏死(P=0.012)、低临床分期(P=0.040)存在一定相关性。HER-2基因扩增/蛋白过表达患者呈预后好的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HER-2在ESCC中有一定的基因扩增率和蛋白过表达率,两者具有相关性,且HER-2基因/蛋白过表达是潜在预后好的指标。

骨桥蛋白在炎症性肠病患者结肠组织中的表达

背景:骨桥蛋白(OPN)是一种分泌型磷酸化糖蛋白,参与细胞信号转导,促进细胞黏附和迁移。近年研究发现炎症性肠病(IBD)患者血浆OPN水平升高,患者结肠黏膜中可检出OPN表达。目的:了解OPN在IBD患者结肠黏膜组织中的表达情况,探讨其在IBD发病机制中的作用。方法:以免疫组化半定量方法检测53例溃疡性结肠炎(UC)、62例克罗恩病(CD)和15例源自结肠腺瘤患者的正常结肠组织标本中OPN的表达。结果:OPN广泛表达于结肠黏膜上皮细胞和固有层渗出细胞。UC组和CD组结肠上皮细胞的OPN平均光密度值显著低于对照组(11.84+0.98和10.04+1.37对12.64+1.45,P<0.05),结肠黏膜固有层渗出细胞的OPN阳性细胞百分率则显著高于对照组(20.31%±4.50%和12.69%+3.06%对3.85%+0.66%,P<0.001)。UC和CD患者的病情严重程度与结肠上皮细胞和固有层渗出细胞中的OPN表达量均无相关性。结论:OPN在IBD患者结肠黏膜上皮和固有层中的表达不一致,结肠上皮细胞中OPN表达下调可能与肠黏膜屏障功能受损有关,而黏膜固有层渗出细胞中OPN表达上调可能与免疫反应有关。

C反应蛋白定性检测在良恶性胸腹水鉴别诊断中的临床意义

目的:探讨C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)定性检测在良恶性胸腹水鉴别诊断中的临床价值。方法:采用胶乳凝集法定性检测3820例患者胸腹水中的CRP,在反应板孔中先后加入标本及胶乳试剂,充分混匀,2 min后观察结果。如肉眼可见凝集颗粒,则为阳性。结果:672例恶性胸腹水标本中CRP阳性率为6.1%,其中32例淋巴造血系统肿瘤患者的胸腹水中CRP阳性率为75.0%,640例上皮性恶性肿瘤患者胸腹水中CRP阳性率为2.7%;3148例良性胸腹水中CRP阳性率为21.8%。良性胸腹水CRP阳性率显著高于恶性胸腹水,淋巴造血系统肿瘤胸腹水CRP阳性率显著高于上皮性恶性肿瘤胸腹水(P<0.01)。结论:CRP定性检测对于鉴别良恶性胸腹水以及鉴别淋巴造血系统肿瘤与上皮性恶性肿瘤胸腹水有一定价值。

散发性结直肠癌中hMLH1及hMSH2基因与p53、PCNA表达关系的研究

目的:研究hMLH1及hMSH2两种错配修复(mismatchrepair,MMR)蛋白在散发性结直肠癌的表达变化,与p53、PCNA表达的关系,并评估其可能的临床意义。方法:采用EnVision免疫组化两步法对150例散发性结直肠癌石蜡切片进行hMLH1、hMSH2、p53及PCNA表达的检测。结果:(1)150例散发性结直肠癌中,hMLH1失表达有24例,占16%(24/150),hMSH2失表达有5例,占3.3%(5/150);两者之和占总散发性结直肠癌病例的19.3%(29/150)。hMLH1或hMSH2蛋白失表达与患者肿瘤部位、组织学类型密切相关。近端结肠、低-未分化腺癌及黏液腺癌MMR蛋白失表达比例高(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤大体类型、肿块大小、浸润深度、淋巴结转移与否远处转移与否以及患者的Dukes分期均无显著相关(P>0.05);(2)hMLH1/hMSH2蛋白失表达组p53阳性表达率及PCNA标记指数均低于表达组(P<0.05)。结论:(1)一定比例的散发性结直肠癌中存在MMR基因的缺陷,并具有相对特殊的临床病理特征;(2)hMLH1/hMSH2蛋白失表达与p53表达及PCNA标记指数呈负相关。

痰中检测核不均一核糖核蛋白A2/B1早期诊断肺癌的意义

目的:探讨检测痰中核不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)在肺癌早期诊断中的意义。方法:收集63例疑诊肺癌患者的痰标本,分别采用痰涂片、痰细胞块切片细胞学检查(镜检找到癌细胞即诊断为肺癌)及痰细胞块切片免疫组织化学检测hnRNP A2/B1(表达阳性即诊断为肺癌)进行诊断,比较2种诊断方法的结果。结果:痰涂片及痰细胞块切片细胞学检查诊断肺癌的敏感度为31.8%,特异度为100%。痰细胞块检测hnRNP A2/B1诊断肺癌的敏感度为80%,特异度为68.4%。检测痰hnRNP A2/B1的敏感度显著高于痰细胞学检查(P<0.01)。结论:痰细胞块结合免疫组织化学法检测hnRNP A2/B1有助于发现早期肺癌。

乳腺癌中甲状腺转录因子-1的表达及意义

目的甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor-l,TTF-1)主要表达于甲状腺癌和肺腺癌,常作为发生于这些部位肿瘤的辅助诊断指标。通过筛查TTF-1在乳腺癌中的表达,探讨其病理诊断及鉴别诊断意义。方法制备含70例乳腺癌标本的组织芯片,用免疫组化Compact Polymer法检测TTF-1的表达。结果 70例乳腺癌组织芯片标本中,2例表达TTF-1,阳性率为2.9%,阳性定位于细胞核,均为弥漫强阳性。其中1例为浸润性导管癌2级,1例为浸润性小叶癌。结论乳腺癌中可出现TTF-1表达,发生率虽然低,但是在肿瘤中出现TTF-1阳性表达并不能除外乳腺癌的可能,在日常病理工作中尤其是在判断转移性肿瘤原发部位时,需引起医务工作者的注意。

检测核不均一核糖核蛋白A2/B1在胸水细胞学鉴别诊断中的意义

目的:观察核不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)在胸水转移性肺腺癌细胞和间皮细胞中的表达,评价其用于两者鉴别诊断的价值。方法:采用细胞块技术对100例胸水进行免疫组织化学检测,观察hnRNPA2/B1在肺腺癌细胞和间皮细胞中的表达。结果:hnRNPA2/B1标记肺腺癌细胞的敏感度为100%,特异度为70%。结论:检测hnRNPA2/B1对鉴别胸水肺腺癌细胞和间皮细胞很有帮助。

食管鳞状细胞癌中微管不稳定蛋白stathmin表达及其与预后的关系

目的探讨微管不稳定蛋白stathmin在食管鳞状细胞癌中的表达水平及其与临床病理特征、预后的关系。方法收集2007年1月至2010年12月在复旦大学附属中山医院手术切除的496例食管鳞状细胞癌患者的临床病理资料,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织stathmin的表达情况,分析其表达差异与患者临床病理特征和预后的关系。结果496例食管鳞状细胞癌患者中,266例为Ⅰ~Ⅱ期,230例为Ⅲ~Ⅳ期。Stathmin蛋白不表达、低表达和高表达的比例分别为2.4%、87.1%和10.5%。Stathmin高表达与肿瘤分化差相关(P=0.040)。生存分析发现:stathmin高表达组患者的无疾病生存期(disease free survival,DFS)和总生存期(overall survival,OS)与不表达/低表达组相比,有预后差的趋势,但差异无统计学意义(DFS:P=0.159;OS:P=0.176)。在Ⅰ~Ⅱ期患者中,stathmin高表达组比stathmin不表达/低表达组的预后差(DFS:P=0.032;OS:P=0.018);但是在Ⅲ~Ⅳ期患者中,stathmin高表达组与stathmin不表达/低表达组的预后差异无统计学意义(DFS:P=0.785;OS:P=0.613)。Ⅰ~Ⅱ期中stathmin高表达患者的预后,与Ⅲ~Ⅳ期stathmin不表达/低表达患者或者高表达患者差异无统计学意义。结论Ⅰ~Ⅱ期食管鳞状细胞癌中,stathmin高表达的患者预后差。

脂质性肺炎3例并文献复习

目的探讨脂质性肺炎的临床病理学特征。方法回顾性分析3例脂质性肺炎的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断等并复习相关文献。结果男性1例,女性2例,年龄分别为73岁、34岁和53岁,3例既往均有手术史,详细追问获得油剂使用史。因咳嗽、咳痰或发热就诊。影像学上2例分别记录为两肺散在多发磨玻璃影,两肺见片状和小斑点状密度增高影,1例右肺可见散在条片状和高密度结节影。镜下均可见肺泡腔内聚积大量组织细胞,组织细胞胞质空亮,胞质内形成网格状分隔,部分肺泡腔呈明显渗出改变,渗出液内散在胞质空亮的组织细胞,可出现肺泡上皮增生。免疫表型:CD68强阳性,六胺银和PAS染色阴性,上皮性标记(CK7、TTF-1、SPA等)示肺泡上皮排列整齐,极性良好。结论脂质性肺炎临床表现和影像学表现均缺乏特异性,易误诊,大量胞质空亮的组织细胞偶有提示诊断的价值,追寻病史有助于病理诊断。

间质性肺炎误诊为肺癌3例并文献复习

目的探讨间质性肺炎的临床病理特征。方法回顾性分析3例间质性肺炎误诊为肺癌的影像学表现和临床病理特征,并进行随访和相关文献复习。结果男性2例,女性1例,年龄分别为51、68和59岁,其中例1有长期吸烟史,3例影像学均为典型的间质性肺炎表现,高分辨率CT示3例均为肺内散在网格状、蜂窝状高密度影,以下叶为主。镜下均可见间质纤维组织增生,不同程度的炎症细胞浸润及肺泡上皮不典型增生。免疫表型:增生的肺泡上皮TTF-1、CK7、Napsin A均阳性,p63阴性,Ki-67增殖指数为2%~10%。3例首次病理诊断均被误诊为肺低分化腺癌,例1、3临床分别行2次活检,经临床反馈或多学科协作组讨论后,病理诊断均在第2次活检后得到更正。结论间质性肺炎伴不同程度肺泡上皮异型增生时与肺腺癌在病理学形态上可有重叠,鉴别诊断较为困难,易误诊,诊断时需密切结合其影像学表现,多学科协作讨论有助于加强对该疾病的认识。

管状囊性肾癌2例临床病理报告

本文报道了2例管状囊性肾癌患者,均为男性,因肉眼血尿入院检查发现肾脏肿物,肿物巨检均为囊实性。镜下肿瘤组织成分均由大小不一小管及小囊腔构成,其间见胶原纤维,肿瘤细胞胞浆嗜伊红,核浆比大,可见明显核仁,囊腔内衬扁平细胞至高柱状鞋钉样细胞,Fuhrman分级基本为Ⅲ级。1例伴有乳头成分。免疫组织化学染色显示,2例肿瘤均阳性表达VIM、PAX-8、P504S。随访结果显示,2例患者分别于术后36、39个月死亡。结合相关文献复习认为,管状囊性肾癌好发于男性,肿物巨检呈囊实性,镜下见特征性大小不一囊腔和小管,上皮细胞核仁明显,主要应与以多房囊性生长方式为主的肾肿瘤相鉴别。本文2例患者随访结果提示其恶性程度较高。

联合检测D2-40、calretinin及HBME-1在浆膜腔积液细胞学鉴别诊断中的意义

目的观察D2-40、calretinin及HBME-1在浆膜腔积液间皮和转移性癌细胞中的表达,评价其用于鉴别诊断的价值。方法用细胞块技术对87例浆膜腔积液标本进行免疫组化检测,观察D2-40、calretinin和HBME-1在癌细胞和间皮细胞中的表达。结果D2-40、calretinin和HBME-1标记间皮细胞的敏感度分别为48.1%、81.0%、77.2%,特异度分别为90.2%、69.5%、61.0%。三者联合的敏感度和特异度分别为70.9%和81.7%。三者标记卵巢癌腹水间皮细胞的特异性都不高。结论D2-40、calretinin和HBME-1合用可辅助鉴别诊断转移性癌与间皮。

腹盆腔原发性室管膜瘤1例并文献复习

目的探讨颅脊髓外室管膜瘤临床病理特点、诊断和鉴别诊断。方法总结1例多次复发切除的腹盆腔原发性室管膜瘤临床病理特点，对患者3次手术切除标本进行形态学观察、免疫组化检测并文献复习。结果国内外文献报道颅脊髓外室管膜瘤（除去骶尾部）共44例，发生部位包括卵巢24例、子宫韧带6例、纵膈9例、肝1例、肺1例、小肠1例、网膜1例、子宫直肠间隙1例。其中国内报道的5例均发生于卵巢，而该例为腹腔及盆腔多发病灶，未累及卵巢，国内外尚未见报道。44例患者均为女性，中位年龄36岁（13～71岁），多数经历多次手术切除，瘤细胞常同时表达GFAP、ER、PR。该例患者初次发病年龄36岁，截止目前已经历3次手术，每次肿瘤形态不完全一致，血管周无细胞区以及乳头状结构在第三次手术切片中表现相对充分。3次手术肿瘤组织均表达GFAP、ER、PR。结论颅脊髓外室管膜瘤属低度恶性肿瘤，可多次切除，免疫表型具有一定的特征性。

原发性血色病伴肝癌临床病理观察

目的探讨原发性血色病的临床病理特征。方法对1例原发性血色病伴肝癌及肝癌术后复发患者进行临床、病理组织学和特殊染色观察,并结合文献探讨其发病机制、病理形态及鉴别诊断。比较放血疗法治疗前后患者肝铁沉积变化及病理组织学改变。结果原发性血色病为常染色体隐性遗传性铁贮积病,过量铁在肝、胰、心、肾、皮肤及脾等部位广泛沉积,造成靶器官实质细胞破坏,导致脏器功能损害。肝是最早和最严重的铁聚集部位,肝硬化和肝癌是本病的主要致死原因。反复放血排出体内的铁是此病最有效、最经济的治疗方法。结论此病早期无特异表现,极易漏诊,确诊有赖于肝活检的病理诊断。早期诊断、早期治疗可明显延长患者的生存期。