严重创伤救治规范的研究与推广

创伤是全球性的社会突出问题，每年全世界死于创伤的人数达580万［1］。建筑工伤和交通伤成为日常创伤的主要原因，目前严重创伤已成为我国青壮年的第一位死亡原因，这不仅由于创伤的持续高发，也与我国创伤救治的整体发展滞后密切相关。

促周围神经再生中药复方--复方红芪

周围神经损伤是临床常见问题[1],尽管目前周围神经修复技术已经有了很显著的进步,但即使新鲜、清洁的周围神经断裂伤,能及时运用显微外科技术进行修复,也往往不能完全再生,患者神经功能恢复不能令人满意[2].因此,如何促进周围神经损伤后的再生,恢复其功能已日益成为相关研究的重点.

人工虎骨粉对大鼠骨折愈合的影响

目的研究人工虎骨粉对大鼠骨折愈合的影响。方法 SPF级成年健康SD大鼠72只,麻醉状态下制作右侧胫中段骨折模型,模型制作完成后随机分为实验组和对照组,实验组术后每日灌服人工虎骨粉混悬液,对照组每日灌服蒸馏水。术后2周、4周、2月、3月分别进行影像学观察和组织学观察,术后2月、3月分别进行骨折侧生物力学测量、健侧生物力学测量,并计算骨折生物力学恢复率。结果影像学检查:术后4周,实验组骨痂形成较对照组更广泛、明显;术后2月,实验组皮质骨形成较对照组多。组织学观察:术后2周,实验组骨痂中软骨细胞较对照组明显多;术后4周,实验组骨小梁数量较多,骨痂改建较好;术后2月,实验组骨折处皮质层较厚度对照组大。生物力学测量:术后2月,骨折侧生物力学和骨折生物力学恢复率对照组分别为2.28±0.41N、40.94±10.55%,实验组分别为3.29±0.68N(P<0.05)、58.85±11.22%(P<0.05);术后3月,骨折侧生物力学和骨折生物力学恢复率对照组分别为2.67±0.52N、47.17±13.78%,实验组分别为4.14±0.47N(P<0.05)(P<0.05)、62.19±13.45%(P<0.05)。结论人工虎骨粉具有明显的促进骨折愈合作用,并可有效提高正常骨生物力学强度。

小间隙套接修复周围神经技术及新型套接材料

周围神经损伤是临床常见创伤,许多病例致伤后终生残疾。影响治疗效果的关键因素是损伤的神经是否得到良好的再生,而缝接技术是神经再生的最重要基础。近百年来,全世界在临床上一直沿用的神经外膜缝合方法,由于无法使神经干内数千条不同性质的神经纤维准确对接,在很大程度上影响着神经的修复效果。与此同时,研究发现再生的神经纤维能够选择性长入与其性质相同的远端神经,即周围神经选择性再生现象。

周围神经缺损修复新方法--神经延长术

周围神经缺损在临床上常见,也是临床治疗的难点[1]。创伤性神经缺失、神经肿瘤医源性切除、神经延期修复时的神经短缩等均可导致不同程度的神经缺损[2-5],我国每年周围神经缺损患者高达30～50万例。对于小的周围神经缺损,

神经微丝蛋白免疫荧光染色法观察运动终板

目的:了解应用神经微丝蛋白免疫荧光染色法观察运动终板的效果。方法:取SPF级大鼠6只,麻醉状态下取材双侧比目鱼肌神经入肌点组织,以多聚甲醛固定,冰冻切片,行神经微丝蛋白免疫荧光染色,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察运动终板形态,并用激光共聚焦显微镜软件对运动终板形态进行三维重建。结果:染色切片在荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下均可观察到运动终板爪形结构形态,激光共聚焦显微镜采集图像进行三维重建后,可以得到运动终板立体结构。结论:神经微丝蛋白免疫荧光染色法是一种较好的运动终板的观察方法。

17β-雌二醇对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的诱导调控

背景:研究发现骨髓间充质干细胞上存在雌激素受体,雌激素通过调节骨髓间充质干细胞的增殖、分化特性发挥促成骨作用。目的:观察17β-雌二醇对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的诱导作用,并探讨其作用机制。方法:在基础成骨诱导培养基培养的第3代大鼠骨髓间充质干细胞中分别加入0(对照组),0.001,0.01,0.1nmol/L17β-雌二醇干预。Elisa法检测培养的骨髓间充质干细胞分泌Ⅰ型胶原的水平,RT-PCR及Western blotting法分别检测Runx2因子mRNA及蛋白水平。结果与结论:与对照组比较,在给予0.001,0.01,0.1nmol/L17β-雌二醇干预后第5天,骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原表达显著升高(P<0.05),第7天仍旧呈高表达(P<0.05)。同时,在17β-雌二醇干预的第5,7天,Runx2因子mRNA及蛋白表达水平随17β-雌二醇浓度的增加而升高(P<0.05),并呈剂量依赖性。表明17β-雌二醇可诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞转化,其可能通过上调Runx2因子表达发挥促成骨作用。

人工虎骨粉干预大鼠成骨细胞增殖和Ⅰ型胶原的表达

背景:人工虎骨粉主要用于骨质疏松症、骨折、类风湿关节炎等骨科疾病的治疗,并在临床中取得较好的疗效,但其成骨作用的药物机制尚未明确。目的:观察人工虎骨粉对大鼠成骨细胞增殖和Ⅰ型胶原表达的影响。方法:采用新生SD大鼠颅盖骨组织二次酶消化法培养原代成骨细胞,其中人工虎骨粉干预组细胞培养液的药物终质量浓度分别为10-4,10-5,10-6g/L。对照组给予不含人工虎骨粉的无血清DMEM细胞培养液。结果与结论:噻唑蓝比色法检测结果显示,人工虎骨粉可显著提高成骨细胞增殖活力(P<0.05),流式细胞仪检测结果显示,人工虎骨粉可提高S期和M/G2期细胞分布比例,并伴有G0/G1期细胞比例降低;RT-PCR和ELISA的检测结果显示,各质量浓度人工虎骨粉处理成骨细胞48h,均可以提高成骨细胞Ⅰ型胶原的表达(P<0.05)。结果表明人工虎骨粉对体外培养的大鼠原代成骨细胞具有促增殖作用并可以促进Ⅰ型胶原的合成和分泌。

可降解生物套管小间隙套接法修复周围神经损伤的临床观察

目的:观察可吸收生物套管小间隙套接法修复周围神经损伤的临床效果。方法:收集30例新鲜上肢周围神经损伤的患者,经过知情同意后采用随机数字的方法分为两组,各15例,试验组采用可降解的甲壳质生物套管进行套接法修复,对照组采取传统的神经外膜缝合修复。对术后的神经恢复情况进行临床观察,根据沈宁江和英国医学委员会推荐的评分方法,计算功能恢复的综合优良率,术后6个月进行电生理检查。结果:30例患者中28例得到随访,试验组和对照组各14例。套管套接组手术操作简单,平均缝合时间[(8.0±0.8)min]比传统神经外膜平均缝合时间[(10.0±0.6)min]缩短20%,套管套接组伤口如期愈合,未见排异反应或过敏反应及异常引流。术后6个月的电生理检测结果:生物套管套接组感觉神经传导速度恢复率77.37%,运动神经传导速度恢复率70.09%;传统神经外膜缝合组感觉神经传导速度恢复率61.69%,运动神经传导速度恢复率56.15%;感觉、运动神经恢复率的比较分别采用Fisher’s精确概率法,两组之间差异无统计学意义(感觉神经恢复率P=0.678,运动神经恢复率P=0.695)。神经修复后6个月的综合优良率显示:套管套接组优良率78.57%,传统神经外膜缝合组优良率28.57%,经Fisher’s精确概率法比较,两组差异有统计学意义(P=0.021)。结论:可吸收生物套管小间隙套接法修复周围神经损伤操作简单,临床效果明显好于传统的神经外膜缝合,具备临床替代神经外膜缝合的可行性。

股骨转子下截骨全髋置换术治疗HartofilakidisC1和C2型髋关节发育不良的对比研究

目的:比较转子下截骨全髋置换术治疗Hartofilakidis C1和C2型成人髋关节发育不良的差异及安全性。方法:回顾性分析2007年1月至2011年12月就诊于北京积水潭医院的32例髋关节发育不良患者的临床资料,其中C1型17例,C2型15例,均行转子下截骨全髋关节置换术,术前评估和术后随访采用HSS(hospital for special surgery knee score)和WOMAC(the Western Ontario and Mc Master Universities)评分,拍摄髋关节X线片,测量双下肢不等长,记录跛行等并发症。结果:C1型HSS评分由43.7±4.6提升到87.2±7.1,WOMAC评分由43.6±4.3提升至87.5±6.7;C2型HSS评分由44.4±5.4提升到86.5±8.0,WOMAC评分由44.1±4.1提升至86.7±8.1,术后功能评分均较术前有明显改善(均P<0.001)。C2型中4例出现术中骨折,C1型中1例出现术中骨折,术后随访均愈合。术后X线片提示关节假体位置满意,无松动,股骨截骨处均愈合,无感染。结论:股骨转子下截骨全髋置换术治疗高位脱位的髋关节发育不良患者可以取得较好疗效,不同亚型(C1和C2型)在疗效上无明显差异,C2型应注意避免发生术中骨折。

259例北京市道路交通事故死亡分析

目的了解北京市交通伤害死亡的流行病学特点,为有关部门制定预防和控制交通伤害措施提供科学依据。方法按照死者性别、年龄、职业、事故发生时间、道路行为方式、肇事车型、死亡原因等相关参数,对2004～2009年北京市急救中心收集的道路交通致死事故进行回顾性分析。结果共收集道路交通致死事故259例,死者男女性别比为2.45:1,21～50岁为高发人群(69.11%)。以23:00～1:00时段致死车祸发生频率最高(15.08%);7～8月和10～11月致死事故高发,分别为20.85%、23.17%;从一周分布上来看,星期三发生率最低(11.97%),最常发生于星期六(17.37%)、星期日(16.22%)。死者的职业前两位为工人(39.00%)、农民(15.83%);受伤部位以颅脑损伤为主(81.85%)。死者主要道路行为方式为步行(47.49%)、骑自行车(21.24%);肇事车辆多见于小型汽车(65.64%)。2005年后致死事故总体呈现下降趋势。结论需要加强对行人和驾驶人员的交通安全教育,提高交通安全意识。交管部门应严格执法,尤其应加强夜间及周末的执法力度,加强对电动自行车的管理,重视轨道交通安全设施建设。

两种股骨颈骨折内固定物的物理参数比较

背景:3枚空心松质骨拉力螺钉内固定已经成为股骨颈骨折内固定的标准操作技术,但其并发症较多,改进内置物的设计是减少并发症的途径之一。课题组设计了一种新型的内固定物,即自锁空心加压防旋转刀片,并对其进行了一系列研究。目的:比较两种股骨颈骨折内固定物-自锁空心加压防旋转刀片与AO7.3mm空心钉的物理参数。设计、时间及地点:随机对照实验,于2008-04/07在北京大学人民医院创伤骨科实验室完成。材料:8对尸体骨来源于北京大学医学部解剖学教研室,自锁空心加压防旋转刀片由北京航空航天大学机械学院加工车间制作。方法:将8对尸体骨标本随机分为自锁空心加压防旋转刀片固定组和7.3mm空心钉固定组,于股骨颈最窄处截骨,制作经颈型股骨颈骨折模型,测定每个标本的骨折断面面积以及股骨头的体积。然后直视下复位骨折,按照预先设计的操作步骤分别应用自锁空心加压防旋刀片和AO7.3mm空心钉进行固定;在固定完毕后的X射线片上测定内固定物在股骨头内的深度,计算体积。主要观察指标:内置物截面积/骨折断面面积以及内置物体积/股骨头体积。结果:两组骨折断面面积、内置物截面积/骨折断面面积、股骨头体积比较差异均无显著性(P>0.05)。空心钉组内置物体积、内置物体积与股骨头体积的比值大于自锁空心加压防旋刀片组(P<0.05)。结论:与AO7.3mm空心钉相比,自锁空心加压防旋刀片固定股骨颈骨折,减小了内置物所占股骨头空间,减少了内置物的数量,明显简化了操作难度,创伤小,有可能替代空心松质骨拉力螺钉成为治疗股骨颈骨折的首选内固定物。

深圳市宝安区2011～2014年772例交通伤死亡分析

目的研究近4年深圳市宝安区772例道路交通伤死亡的流行病学特点,为本市区交通伤预防、安全宣教及科学救治提供科学依据。方法回顾性研究2011年1月至2014年12月经深圳市交警处理的交通伤数据,通过统计学分析深圳市宝安区近4年772例交通事故后24小时内致死患者发生的时间分布情况（年份、月份、日期及发生时间等）;空间分布情况（发生路口路段、道路类型等）;交通伤患者死亡情况（死亡患者类型、受伤类型等）。结果 2011~2014年深圳市宝安区共发生道路交通伤24小时内致死患者772例,呈逐年递减趋势,其中2011年276例、2012年183例、2013年174例、2014年139例;交通伤致死患者中男594例,女178例,男女比例为3.32∶1;交通伤致死患者中〈18岁91例,18~40岁376例,41~65岁271例,〉65岁34例;交通伤致死患者中主因颅脑损伤致死患者613例（79.4%）,主因胸腹脏器损伤致死患者133例（17.2%）,主因失血性休克26例（3.4%）;交通伤致死患者中行人158例（20.5%）,自行车骑乘人员252例（32.6%）,摩托车驾驶人员133例（17.2%）,机动车驾驶员或乘客229例（29.7%）。结论深圳市宝安区近4年交通伤致死率仍处于较高水平,行人、自行车及摩托车骑乘人员是主要致死人群,颅脑损伤是主要致死原因,应当加强交通安全教育,制定科学的防范措施,鼓励自行车及摩托车骑乘人员佩戴安全头盔是有效降低本区域交通伤致死的重要措施。

生物套管小间隙套接修复大鼠坐骨神经损伤过程中的疼痛评估

目的:探讨2 mm小间隙套接缝合和神经外膜缝合修复坐骨神经损伤后疼痛功能恢复的变化。方法:采用SD大鼠制作坐骨神经离断伤模型,断端旋转180°后分别采用2 mm小间隙套接修复和神经外膜缝合修复方式,于术后2、4、5、6、8、12周观察患肢50%缩足阈值,采用成组t检验进行统计学分析。结果:两组动物患肢2周时均出现明显的感觉减退,缩足阈值明显提高,达到15 g。4周时,两组缩足阈值均开始降低,小间隙套接修复组降低明显多于外膜缝合组,说明小间隙套接修复疼痛觉恢复早于外膜缝合组。术后5、6、8、12周,小间隙套接修复组缩足阈值升高至平台期[5周(12.70±5.64)g;6周(12.20±3.26)g;8周(12.31±4.19)g;12周(13.95±2.58)g];外膜缝合组缩足阈值呈下降趋势[5周(10.47±7.02)g;6周(9.42±6.86)g;8周(8.50±7.15)g;12周(8.06±5.93)g]。两组比较12周外膜缝合组缩足阈值显著低于小间隙套接修复组。结论:相比于传统的神经外膜缝合,生物套管2 mm小间隙套接修复大鼠坐骨神经离断性损伤,能够有效地提高周围神经损伤修复过程中的疼痛阈值,减少疼痛的发生。

降钙素基因相关肽对大鼠成骨细胞表达转录因子RUNX2的影响

目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对大鼠颅盖骨来源成骨细胞RUNX2因子表达水平的影响,进一步了解CGRP促进成骨的作用机制。方法:用酶消化法培养原代大鼠成骨细胞并鉴定;MTT法筛选促进成骨细胞增殖的有效浓度,将含有不同浓度CGRP的条件培养基加入大鼠成骨细胞培养体系中,药物作用48 h后,用半定量RT-PCR和Western blotting方法检测大鼠成骨细胞转录因子RUNX2在mRNA和蛋白水平的表达。结果:当CGRP浓度在10-8～10-6mol/L范围时,对成骨细胞增殖有明显促进作用,增殖率分别为71.9%,142.1%,321.0%,P<0.05;浓度为10-7和10-6mol/L的CGRP作用于成骨细胞48 h后,转录因子RUNX2在mRNA水平的表达量明显上调,分别增强(46.2±11.2)%和(58.6±14.0)%,P<0.05;转录因子RUNX2的蛋白表达变化趋势与其mRNA的表达变化趋势基本一致。结论:一定浓度的CGRP对大鼠成骨细胞转录因子RUNX2的表达有直接促进作用,RUNX2可能参与了CGRP刺激成骨细胞增殖反应的机制。

(2S,4S)-苯甲基-2-(6-氟-1H-吲哚-3-羰基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯的合成

以4-羟基-L-脯氨酸为原料,经Cbz保护、偶联、Mitsunobu反应和水解合成了抗肿瘤新药Birinapant的重要中间体——(2S,4S)-苯甲基-2-(6-氟-1H-吲哚-3-羰基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯,总收率83%,其结构经1H NMR和ESI-MS确证。

损伤控制在严重骨盆骨折合并其他脏器伤治疗中的应用

目的 探讨损伤控制理念应用在严重骨盆骨折合并伤救治过程中的临床价值. 方法 回顾性收集57例骨盆严重损伤合并不同部位多发损伤患者的临床资料,57例患者ISS评分32.7±3.18分（25～39分）.通过骨盆急救相对简单固定同时多学科协作对相关危及生命的损伤积极处理等损伤控制操作及损伤控制手术进行早期干预.分析各种损伤控制方法在不同骨盆合并伤中的应用效果. 结果 57例骨盆复杂骨折合并其他颅脑损伤、泌尿系统损伤、腹部损伤、四肢脊柱骨折、胸部损伤患者中,经伤害控制后,ISS评分明显下降至21.27±2.2分（7 ～ 29分）（P＜0.05）,55例患者成功手术治疗康复出院,2例死亡. 结论 根据骨盆骨折及合并伤特点实施损害控制,进行早期的生命损害救治,控制损伤发展,为骨盆骨折的手术治疗及最后转归创造机会.

单纯感觉／运动神经纤维动物模型的制作及鉴定

目的：制作单纯运动/感觉神经纤维动物模型并鉴定.方法：以SPF级SD大鼠为实验动物,随机分为感觉神经组（A组）、运动神经组（B组）、正常对照组（C组）,A组选择性切除L2~L4腹根,B组选择性切除L2~L4背根神经节、C组不做手术处理.术后2周、4周,取股四头肌行HE染色,腰髓行神经元核抗原（neuronal nuclei,NeuN）免疫组织化学染色,计数A组腰髓后角感觉神经元、B组腰髓前角运动神经元,股神经干分叉部分行锇酸染色,观察有髓神经纤维在皮支和肌支中的数量变化.结果：A组中大鼠右后肢股四头肌萎缩并逐渐加重,无自噬;B组中大鼠右后肢轻度肿胀,不同程度自噬,无肌肉萎缩.神经元计数：A组中,L2~L4段腰髓中平均每个10×20倍显微镜视野下感觉神经元计数分别为62.12±1.77（2周）、62.15±1.32（4周）;B组中,L2~L4段腰髓中平均每个10×20倍视野下前角运动神经元计数分别为30.12±0.44（2周）、30.00±1.87（4周）;C组中,平均每个10×20倍视野下后角感觉神经元计数为62.57±1.02,前角运动神经元计数为29.73±3.03;两个时间点与正常L2~L4段脊髓神经元计数差异无统计学意义.A组中,股神经肌支中部分神经纤维退变,皮支中无退变,有髓神经纤维计数为：1 558.17±50.14（2周）、1 544.00±47.42（4周）;B组中,股神经皮支神经纤维均退变、肌支中部分神经纤维退变,有髓神经纤维计数分别为387.67±48.50（2周）、393.50±27.86（4周）,2周和4周的计数结果比较差异无统计学意义.2周时退变的轴突及髓鞘尚未完全清除,4周时退变的轴突及髓鞘已完全清除.结论：通过选择性切除腹根/背根神经节可以获得单纯感觉神经/运动纤维动物模型.术后4周时,退变的轴突及髓鞘已完全清除,此时可获得良好的单纯性质周围神经,以此方法制作单纯感觉/运动神经纤维动物模型稳定可靠,可用于以后的实验研究中.

反式端侧缝合寄养对大鼠失神经骨骼肌的保护作用

目的:感觉神经寄养可以延缓失神经骨骼肌的萎缩,但传统的端端缝合寄养方式需切断供体神经远端而影响再生神经长入。本研究探讨反式端侧缝合寄养对大鼠失神经骨骼肌的保护作用。方法:雌性SD大鼠12只,随机分为反式端侧缝合组(n=6)和对照组(n=6)。切断胫神经,缝扎近端、远端断端。反式端侧缝合组切断腓肠神经,在靠近胫神经进入腓肠肌的胫神经外膜上开窗,腓肠神经近断端以反式端侧缝合于胫神经开窗处。对照组只结扎胫神经近、远端断端。术后12周测量腓肠肌湿重、肌纤维横截面积、运动终板周径。结果:反式端侧缝合组腓肠肌湿重恢复率(39.2%±6.8%)明显优于对照组(19.5%±4.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。光镜下对照组腓肠肌大面积萎缩,周围明显纤维化;反式端侧缝合组腓肠肌萎缩不明显,肌纤维结构排列紧密完整,周围少量纤维化。反式端侧缝合组腓肠肌的平均横截面积、运动终板平均周径均显著大于对照组[(1 148.85±547.18)μm2vs.(575.05±140.51)μm2,(102.84±53.29)μm vs.(59.60±26.71)μm],两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:感觉神经反式端侧缝合寄养可以保护大鼠失神经骨骼肌的结构。

(1R,3S,4S)-2-苄氧羰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-3-羧酸的合成

以(R)-(+)-α-甲基苄胺为原料,依次经缩合,Diels-Alder反应,还原,Cbz-保护和水解反应,合成了抗丙肝新药HCV NS3/4A蛋白酶拟肽类抑制剂的重要中间体——(1R,3S,4S)-2-苄氧羰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-3-羧酸,总收率66%,其结构经1H NMR和ESI-MS确证。