尽管新一代基因编辑技术CRISPR/Cas9拥有众多优点,但在执行单个碱基水平的突变时其效率往往很低。由于DNA的双链断裂具有很多的不确定性,又加上基于供体模板的同源末端重组(homology directed repair,HDR)仅仅发生在分裂活跃的细胞中,...尽管新一代基因编辑技术CRISPR/Cas9拥有众多优点,但在执行单个碱基水平的突变时其效率往往很低。由于DNA的双链断裂具有很多的不确定性,又加上基于供体模板的同源末端重组(homology directed repair,HDR)仅仅发生在分裂活跃的细胞中,而非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)在整个细胞周期中都可以发生,因此,传统CRISPR/Cas9在单碱基分辨率上进行基因编辑时存在一定弊端。碱基编辑器(base editor,BE)的出现则在一定程度上弥补了这一缺陷。胞嘧啶碱基编辑器(cytosine base editor,CBE)或腺嘌呤碱基编辑器(adenine base editor,ABE)都能够在不引起双链断裂的情况下实现C·G到T·A或A·T到G·C的转换,极大地提高了单碱基编辑的应用价值。本文侧重对出现较早的CBE的原理、发展、应用及存在的问题进行综述,以期为高效单碱基突变工具在生物医学和畜牧业生产中的应用提供有益的参考和借鉴。展开更多
东弗里升绵羊是优秀的乳肉兼用品种,探究东弗里升绵羊和地方特色品种洼地绵羊杂交改良,有利于挖掘种质资源,培育新品种。本研究利用程序化冷冻方法制备东弗里升细管冻精,分析精子冷冻前后的活力和运动能力。同时对28只洼地绵羊进行同期...东弗里升绵羊是优秀的乳肉兼用品种,探究东弗里升绵羊和地方特色品种洼地绵羊杂交改良,有利于挖掘种质资源,培育新品种。本研究利用程序化冷冻方法制备东弗里升细管冻精,分析精子冷冻前后的活力和运动能力。同时对28只洼地绵羊进行同期发情内窥镜输精处理,记录受胎率及后代生长发育数据。结果表明:冷冻降低精子的运动能力,精液冷冻后曲线速度(VCL)、精子头侧摆幅度(ALH)和快速运动精子比例与鲜精相比降低(P<0.05);28只洼地绵羊内窥镜输精妊娠率为71.43%(20/28),产羔率为128.57%(36/28),窝产2~3羔比例为72.22%(13/18);随窝产羔数增加,羔羊平均出生重降低;东洼杂交F_(1)代同时期体重均高于洼地绵羊,其中18月龄东洼杂交F_(1)代母羊体重高于洼地绵羊母羊(P<0.05);东洼F_(1)代育肥期平均日增重(305 VS 264 g)、耗料增重比(4.1 VS 3.5)均高于洼地绵羊(P>0.05)。因此,通过细管冻精腹腔内窥镜技术进行东弗里升与洼地绵羊杂交能够提高洼地绵羊的生产性能。展开更多
文摘尽管新一代基因编辑技术CRISPR/Cas9拥有众多优点,但在执行单个碱基水平的突变时其效率往往很低。由于DNA的双链断裂具有很多的不确定性,又加上基于供体模板的同源末端重组(homology directed repair,HDR)仅仅发生在分裂活跃的细胞中,而非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)在整个细胞周期中都可以发生,因此,传统CRISPR/Cas9在单碱基分辨率上进行基因编辑时存在一定弊端。碱基编辑器(base editor,BE)的出现则在一定程度上弥补了这一缺陷。胞嘧啶碱基编辑器(cytosine base editor,CBE)或腺嘌呤碱基编辑器(adenine base editor,ABE)都能够在不引起双链断裂的情况下实现C·G到T·A或A·T到G·C的转换,极大地提高了单碱基编辑的应用价值。本文侧重对出现较早的CBE的原理、发展、应用及存在的问题进行综述,以期为高效单碱基突变工具在生物医学和畜牧业生产中的应用提供有益的参考和借鉴。
文摘东弗里升绵羊是优秀的乳肉兼用品种,探究东弗里升绵羊和地方特色品种洼地绵羊杂交改良,有利于挖掘种质资源,培育新品种。本研究利用程序化冷冻方法制备东弗里升细管冻精,分析精子冷冻前后的活力和运动能力。同时对28只洼地绵羊进行同期发情内窥镜输精处理,记录受胎率及后代生长发育数据。结果表明:冷冻降低精子的运动能力,精液冷冻后曲线速度(VCL)、精子头侧摆幅度(ALH)和快速运动精子比例与鲜精相比降低(P<0.05);28只洼地绵羊内窥镜输精妊娠率为71.43%(20/28),产羔率为128.57%(36/28),窝产2~3羔比例为72.22%(13/18);随窝产羔数增加,羔羊平均出生重降低;东洼杂交F_(1)代同时期体重均高于洼地绵羊,其中18月龄东洼杂交F_(1)代母羊体重高于洼地绵羊母羊(P<0.05);东洼F_(1)代育肥期平均日增重(305 VS 264 g)、耗料增重比(4.1 VS 3.5)均高于洼地绵羊(P>0.05)。因此,通过细管冻精腹腔内窥镜技术进行东弗里升与洼地绵羊杂交能够提高洼地绵羊的生产性能。
