温敏性bFGF/Dex脂质体-水凝胶复合支架的神经化骨再生评价

目的:利用脂质体同时包载具有促进神经分化作用的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和成骨诱导小分子(Dex),与海藻酸钠溶液混合,构建一种具有温敏性和可注射性的bFGF/Dex脂质体-水凝胶复合支架,评价复合支架促进神经分化和新骨再生的作用。方法:通过薄膜分散法制备bFGF/Dex脂质体,与RGD多肽活化后的海藻酸钠溶液混合,通过自由基聚合反应合成温敏性bFGF/Dex脂质体-水凝胶复合支架。使用Zeta粒径仪检测脂质体的粒径、多分散度和Zeta电位,扫描电镜观察支架的微观结构,利用万能材料试验机测定支架的机械强度,通过RT-PCR和免疫荧光染色检测bFGF促进hBMSCs成神经分化相关基因和蛋白的表达。构建兔颅骨缺损模型,通过micro-CT及免疫组织化学染色,评价复合支架在体内促进神经化骨再生的作用。采用SPSS 26.0软件包对数据进行统计学分析。结果:成功构建温敏性bFGF/Dex脂质体-水凝胶复合支架,该支架在常温下(25℃)呈溶液状态且具有流动性,大于临界温度(32℃)时可迅速转变为凝胶状态。支架表面呈疏松多孔的蜂窝状,能够承担一定应力。体外成神经相关基因和蛋白表达提示,bFGF在诱导hBMSCs成神经分化中具有重要作用。动物实验结果表明,复合支架具有高效促进神经化骨再生的作用。结论:具有温敏性、可注射性和突出生物功能的智能bFGF/Dex脂质体-水凝胶复合支架,为颌骨缺损修复提供了新的材料。

骨替代材料在上颌窦底外提升同期牙种植中的作用探讨

目的:探讨牙种植术中上颌窦底外提升时是否需植入骨替代材料,并对比不同骨替代材料促进骨再生的作用。方法:构建兔上颌窦底外提升同期种植体植入模型,12只3月龄雄性新西兰大白兔,共24侧上颌窦,随机分为4组(n=6),即单纯血凝块组、空白脂质体-水凝胶组、载药脂质体-水凝胶组、同种异体骨粉组,3个月后将上颌窦完整取出,行micro-CT、H-E染色、Masson染色、免疫组织化学染色及骨组织磨片H-E染色等,评价不同实验组上颌窦底外提升后种植体周围骨再生效果。结果:Micro-CT、H-E染色和Masson染色显示,4组样本上颌窦底外提升后种植体周围均有不同程度的新骨形成。空白脂质体-水凝胶组较单纯血凝块组可见更多的新骨形成;与单纯血凝块组及空白脂质体-水凝胶组相比,载药脂质体-水凝胶组及同种异体骨粉组均可见更多的新骨形成,但载药脂质体-水凝胶组较同种异体骨粉组的骨基质中可见更多的新生血管。成血管指标免疫组织化学结果显示,载药脂质体-水凝胶组表达量更高;成骨指标免疫组织化学结果显示,载药脂质体-水凝胶组、同种异体骨粉组表达量更高。骨组织磨片H-E染色显示,种植体骨结合良好,载药脂质体-水凝胶组种植体周围有更多骨质包围。结论:上颌窦底外提升同期牙种植术中植入骨替代材料,既能维持上颌窦底黏膜的提升高度,又能提高成骨效率。可注射的载药脂质体-水凝胶较同种异体骨粉更适用于微创植入不规则的骨缺损部位,载药复合体通过持续缓释药物,有效发挥促血管化骨再生的作用。

用于颌骨缺损修复的可注射多功能脂质体-水凝胶复合体的构建及体外评价

目的:利用脂质体作为促血管化小分子去铁胺(DFO)和成骨诱导小分子地塞米松(Dex)的缓释载体,同时利用海藻酸钠水凝胶作为万古霉素(Van)的缓释载体,构建一种可注射多功能脂质体-水凝胶复合体,探讨复合体体外抑菌、促血管生成及促成骨作用。方法:通过薄膜分散法制备DFO/Dex脂质体,与Van海藻酸钠溶液混合,在钙离子作用下形成Van/DFO/Dex脂质体-水凝胶复合体,通过Zeta粒径仪检测脂质体的粒径、分散度(PDI)和Zeta电位;通过紫外可见光分光光度计检测复合体中Van、DFO和Dex的缓释曲线;WST-8定量实验评价复合体的体外抑菌作用;CCK-8和细胞活/死荧光染色评价复合体的细胞相容性;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测复合体促血管生成作用;ALP活性定量和染色评价Van/DFO/Dex脂质体-水凝胶复合体的体外促成骨分化作用。采用OriginPro软件对数据进行统计学处理。结果:成功构建可注射性Van/DFO/Dex脂质体-水凝胶复合体,测定脂质体的粒径为(121.6±6.35)nm,PDI为0.2~0.3,DFO包封率约为57%,Dex包封率约为23%。药物缓释曲线表明,Van、DFO和Dex呈分阶段持续释放。CCK-8和细胞活/死荧光染色显示,Van/DFO/Dex脂质体-水凝胶复合体具有良好的细胞相容性。WST-8定量检测表明,复合体具有良好的体外抑菌作用。血管生成相关基因的表达提示,复合体具有促血管生成的能力。ALP活性定量和染色表明,Van/DFO/Dex脂质体-水凝胶复合体能够提高成骨分化活性。结论:Van/DFO/Dex脂质体-水凝胶复合体是一种具有成骨、促血管生成及抗感染的多功能骨再生材料,其可注射性有利于不规则颌骨缺损的临床应用。