5018例新生儿耳聋基因检测结果分析

我国新生儿听力筛查工作始于20世纪80年代末,2007年解放军总医院在国际上率先提出了在新生儿听力筛查中融入聋病易感基因筛查实施联合筛查的新理念与模式,首创了＂新生儿听力及基因联合筛查＂的整体实施流程与技术操作系统。

孕中期产前筛查结果分析

目的探讨石家庄市孕妇孕中期产前筛查对发现染色体病及开放性神经管畸形的意义。方法对孕中期孕妇5306例血清采用时间分辨荧光法进行甲胎蛋白(AFP)、人绒毛膜促性腺激素游离亚单位(Freeβ-hCG)定量测定。对高危孕妇进行高危咨询,核准孕妇信息的准确性,排除假性高危。建议21-三体综合征、18-三体综合征孕妇进行羊水穿刺产前诊断,建议开放性神经管畸形高危孕妇做彩超进行产前诊断。结果筛查5306例孕妇,21-三体综合征高危者99例,18-三体综合征高危者24例,开放性神经管畸形高危者38例,共计161例高危,高危率占3.03%。结论孕中期母体血清筛查能有效降低缺陷儿出生率,对预防出生缺陷及人口素质的提高起到积极作用。

影响苯丙酮尿症患儿治疗的因素探讨

目的 探讨促进和妨碍苯丙酮尿症患儿进行正规治疗的主要因素.方法 采用查阅病历与问卷调查的方式,对2000年1月～2008年9月河北省确诊的苯丙酮尿症患儿的治疗情况及各种可能的影响因素进行调查,采用单因素、多因素Logistic逐步回归对数据进行分析.结果 单因素分析显示：患儿性别、母亲生产年龄,治疗组和放弃治疗组之间差异无统计学意义（χ^22.895、4.781,均P〉0.05）;父亲文化程度、母亲文化程度、父亲职业、母亲职业、家庭住址、家庭月收入、父母对疾病的认知程度,以上因素两组间差异有统计学意义（χ^234.000、34.424、46.464、31.034、104.214、7.311、45.498,P均〈0.05）.多因素Logistic逐步回归分析显示：家庭月收入、父母对疾病的认知程度两组间差异有统计学意义（χ^20.243、0.165,P均〈0.05）.结论 家庭收入、父母对疾病的认知程度是影响家庭是否对患儿进行治疗的决定性因素,应针对以上因素,采取有效措施,提高苯丙酮尿症患儿的治疗率,减少残疾的发生.

石家庄地区枫糖尿病患儿串联质谱筛查及BCKDHA、BCKDHB、DBT基因突变分析

目的:了解中国河北省石家庄地区新生儿中枫糖尿病(maple syrup urine disease,MSUD)的患病率,分析相关基因突变特点。方法:采用串联质谱技术对石家庄地区2014年1月—2021年12月出生的185683例新生儿进行MSUD筛查,对筛查阳性患儿进行BCKDHA、BCKDHB、DBT基因突变检测。结果:确诊2例MSUD患儿,患病率为1∶92842。2例患儿的初筛及例2复查串联质谱血液亮氨酸、缬氨酸水平升高,例1因召回复查前已夭折,无复查串联质谱结果。确诊2例MSUD患儿均为经典型,分别检测到BCKDHB和DBT基因复合杂合突变,基因突变分析发现了4种突变位点:c.331C>T、c.289G>T、c.75_76delAT及c.1359_1360delAG;其中c.289G>T和c.1359_1360delAG为未报道基因突变,未检测到BCKDHA基因突变位点。例1于生后10 d夭折;例2于生后8 d开始出现症状,及时干预治疗后好转。结论:串联质谱技术应用于新生儿疾病筛查可及早发现MSUD患儿;相关基因检测可明确遗传学病因,为遗传咨询提供依据;石家庄地区MSUD的患病率为1∶92842;发现的4种基因突变位点中2种为未报道基因突变,丰富了基因突变谱。

产前诊断中CNV-seq和染色体核型分析应用效果

目的:探讨有创产前诊断细胞培养染色体核型分析及基因组拷贝数变异测序(CNV-seq)技术在产前诊断中的应用效果。方法:2019年1月-2020年12月在本院产前咨询有临床适应证需行羊膜腔穿刺孕妇364例,分别采用CNV-seq技术和染色体核型分析,对比分析两种检测方法的优势及局限性。结果:染色体核型分析364例标本中,存在100例染色体异常,检出率为27.5%,其中染色体数目异常62例、染色体结构异常10例、染色体多态16例、嵌合体12例;CNV-seq结果显示364例标本中染色体拷贝数变异99例,检出率为27.2%,其中染色体数目异常59例、染色体结构异常2例、嵌合体11例、额外检出CNVs 27例。结论:两种方法染色体非整倍体检出能力相当,在产前诊断中两种方法联合应用可互为补充,弥补各自的不足,提高染色体异常胎儿的检出率。

新生儿高苯丙氨酸血症筛查及PAH基因变异和缺失分析

目的 了解石家庄市新生儿高苯丙氨酸血症(HPA)的发病率、临床分型以及相关基因的变异特征。方法选择2017年3月至2021年5月在石家庄市新生儿疾病筛查中心进行HPA筛查的487 380名新生儿,经免疫荧光法检测其足跟血苯丙氨酸浓度,采用基因测序技术对可疑阳性患儿苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因进行检测,患儿父母采用Sanger法进行目标基因变异验证,进一步将基因测序结果与正常人比对,找出片段缺失区域并进行分析。结果487 380名新生儿中筛查出阳性儿191例,确诊HPA 104例,均为PAH缺乏症,发病率为1/4686。104例患儿中共检测出62种基因变异,包括错义变异37种、剪接变异10种、无义变异7种、同义变异2种、整码变异1种以及杂合缺失5种。PAH基因常见的变异位点有c. 158 G>A(18.7%)、c. 728 G>A(10.5%)、c. 611 A>G(6.7%)、c. 331 C>T(4.8%)和c.721C>T(4.8%),并发现未报道基因片段缺失(外显子6杂合缺失)及基因变异(c.630T>G、c.61-1G>A、c.912+5G>T和c.1055+241C>A)。结论 石家庄市HPA发病率较高,为1/4686;发现了62种PAH基因变异,包括5种片段缺失;此外发现5种未报道的基因变异,丰富了基因数据库。

石家庄地区3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症患病率及MCCC1、MCCC2基因变异分析

目的:初步明确3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症(3-methylcrotonyl-CoA carboxylase deficiency,MCCD)在石家庄地区新生儿中的患病率及基因变异特点。方法:采用串联质谱技术对石家庄地区2014年1月—2021年12月出生的185683例新生儿进行MCCD筛查,对筛查阳性患儿进行3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶1(3-methylcrotonyl-CoA carboxylase 1,MCCC1)基因和MCCC2基因变异分析,随访患儿的生长发育情况。结果:确诊2例患儿,患病率为1.08/10万;其中1例为MCCD2型,基因分析检测到MCCC2基因复合杂合变异,基因型为c.592C>T和c.1144_1147delAAAAinsTTTT,其中c.592C>T为致病性变异,c.1144_1147delAAAAinsTTTT为未报道基因变异,致病性评级为疑似致病;串联质谱筛查结果提示患儿血3-羟基异戊酰肉碱(3-hydroxyisovalerylcarnitine,C5OH)水平升高,初筛C5OH水平为12.26μmol/L(正常值0.07~0.61μmol/L),随访至1岁3个月患儿生长发育正常,为无症状型。另1例为母源性MCCD 1型,患儿初筛血C5OH水平升高,为6.28μmol/L,6个月后降至0.75μmol/L,基本正常;患儿基因检测结果为MCCC1杂合变异,基因变异为c.1679_1680insA,为尚未报道基因变异,致病性评级为疑似致病;患儿随访至4岁3个月,发育正常。结论:初步明确了MCCD在石家庄地区新生儿中的患病率为1.08/10万;发现了3种基因变异位点,其中2种为未报道基因变异,丰富了MCCC1、MCCC2基因变异谱,为遗传咨询提供了依据。

石家庄市新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查及基因突变分析

目的分析石家庄市新生儿先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)的发病率及CYP21A2基因突变情况,为患儿的个体化治疗和遗传咨询提供依据。方法采用免疫荧光法对石家庄市2018年9月至2021年12月活产新生儿进行筛查,对可疑阳性患儿进行基因检测,分析基因与临床表型的联系。结果257751例新生儿中,筛查阳性203例,召回后根据临床表现和生化检测确诊10例患儿,发病率为1/25775。确诊患儿中,男8例,女2例;失盐型6例,单纯男性化型4例,其中3例进行了基因测序分析,均为21-羟化酶缺乏症。进行基因检测的3例患儿中,纯合突变1例,杂合突变2例,共5种突变类型,突变位点主要包括c.518T>A、c.293-13C>G、c.955C>T、c.923dupT和外显子1~7杂合缺失。结论石家庄市新生儿CAH的患病率为1/25775;男性患病率高于女性,且以失盐型为主;CYP21A2基因突变分析发现5种基因突变类型,补充和完善了石家庄市新生儿CYP21A2基因数据库。

河北省石家庄市新生儿短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症筛查及基因突变分析

目的了解短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(short-chain acyl-coenzyme A dehydrogenase deficiency,SCADD)在河北省石家庄市新生儿中的患病率和临床特征,以及酰基辅酶A脱氢酶(acylcoenzyme A dehydrogenase,ACADS)基因突变情况。方法2014年1月至2021年12月,河北省石家庄市共分娩185683例活产新生儿,行串联质谱筛查,检测丁酰基肉碱(butylcarnitine,C4)、C4/乙酰基肉碱(acetylcarnitine,C2)、C4/丙酰基肉碱(propionylcarnitine,C3)。筛查阳性患儿进一步行基因检测,Sanger测序进行验证。185683例活产新生儿中,纳入118502例出生胎龄信息准确完整的新生儿,分为早产儿组(5597例)、足月儿组(112369例)、过期产儿组(536例),比较3组间C4、C4/C2及C4/C3水平。统计学方法采用单因素方差分析、t检验和Pearson相关性分析。结果185683例新生儿中,确诊4例SCADD患儿,患病率为1/46421。基因检测到ACADS基因2例复合杂合突变、1例纯合突变及1例杂合突变;发现了4种突变位点,分别为:c.625 G>A、c.1031A>G、c.1157 G>A和c.1130 C>T,均为已知突变。4例患儿初筛C4水平为0.65~0.84μmol/L。随访4例确诊患儿的生长发育情况,未出现临床表现。早产儿、足月儿、过期产儿组的C4分别为(0.192±0.073)、(0.168±0.058)、(0.158±0.052)μmol/L(F=447.700,P<0.001);C4/C2分别为0.0115±0.0047、0.0106±0.0040、0.0104±0.0038(F=110.200,P<0.001);C4/C3分别为0.1175±0.0714、0.1161±0.0563、0.1180±0.0593(F=2.481,P=0.084)。早产儿C4、C4/C2水平均高于足月儿(P值均<0.001);过期产儿C4水平低于足月儿(P<0.001)。出生胎龄与C4水平、C4/C2值均呈负相关(r值分别为-0.119与-0.036,P值均<0.001)。结论串联质谱联合基因测序技术可及早确诊SCADD患儿。河北省石家庄市新生儿的SCADD患病率为1/46421;检测到4种ACADS基因已知突变位点。

石家庄地区遗传咨询263例染色体检查分析

我室在细胞遗传学检查263例中,发现异常染色体核型39例,异常发生率15％,其中21三体核型27例,占异常核型的69％。其发病严重影响着人体健康及家庭幸福、而减少和控制患儿出生,做好产前筛查是关键。

石家庄市新生儿听力及耳聋基因联合筛查结果分析

目的通过分析石家庄市新生儿听力和耳聋基因联合筛查数据,探讨本区域新生儿听力筛查与耳聋基因筛查之间的关系,及早发现耳聋并对高危个体进行生活和用药指导。方法新生儿出生后3d采用耳声发射技术和自动听性脑干诱发电位两步筛查法进行听力筛查,同时采足跟血3滴应用荧光定量PCR法对遗传性耳聋常见3个基因6个位点GJB2(235delC、299-300delAT)、SLC26A4(IVS7-2A>G、2168A>G)和mtDNA12SrRNA(1555A>G、1494C>T)进行检测。听力筛查初筛未通过者需在42d进行复筛,3个月后对听力复筛未通过者及耳聋基因携带者召回进行常规听力检测。结果10 948例新生儿中9 563例通过听力初筛,初筛通过率87.35%(9 563/10 948)。1 385例未通过听力初筛的新生儿中,于42d复筛287例,复筛率20.72%(287/1 385);246例新生儿通过复筛,复筛通过率85.71%(246/287);41例未通过复筛,除去未来复筛的1 098例新生儿,最终听力筛查检出率0.42%(41/9 850)。10 948例新生儿中共检出438例携带有耳聋基因突变,耳聋基因突变携带率4.00%(438/10 948)。41例未通过听力复筛的新生儿中7例携带耳聋基因突变,携带率为17.07%(7/41);除去未来复筛的1 098例新生儿,9 809例新生儿通过了听力筛查,其中耳聋基因携带399例,携带率4.07%(399/9 809)。将耳聋基因携带率在听力筛查通过组与未通过组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。除去未来复筛的1 098例新生儿,9 850例新生儿中共有406例耳聋基因携带者,人群携带率4.12%(406/9 850),将耳聋基因携带率在听力筛查通过组与随机人群组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。最终未通过听力复筛且携带耳聋基因突变的7例新生儿中有3例235delC杂合突变,2例IVS7-2A>G杂合突变,1例IVS7-2A>G纯合突变和1例IVS7-2A>G/2168A>G复合杂合突变的患儿已确诊听力损失。结论未通过听力筛查的新生儿耳聋基因携带率显著高于通过听力筛查的新生儿;通过听力筛查的新生儿与随机人群的耳聋基因携带率差异无统计学意义。听力及耳聋基因联合筛查可以提前发现耳聋,使耳聋患儿早诊断早治疗;对高危个体进行生活和用药指导,可避免或减少耳聋的发生;还可为当地政府和医疗部门大力宣传听力及基因联合筛查的重要意义提供依据。

石家庄地区128399例新生儿多种遗传代谢病串联质谱筛查结果分析

目的回顾性分析石家庄市新生儿多种遗传代谢病筛查情况,了解遗传代谢病单病种患病率及基因突变情况。方法采用串联质谱技术-非衍生法检测滤纸干血斑中11种氨基酸、30种酰基肉碱和游离肉碱的含量及相互之间的比值,对石家庄市2014年1月至2018年5月出生的新生儿进行多种遗传代谢病筛查,采用二代测序技术对疑似患儿进行基因突变检测,并用Sanger测序法验证。结果 128 399例新生儿中初筛阳性3 811例,阳性率为2.97%;召回3 620例,确诊102例,总体患病率为1/1 259,阳性预测值为2.8%(102/3 620)。102例患儿中氨基酸代谢异常患儿50例,其中苯丙酮尿症患儿35例(70%);有机酸代谢异常患儿36例,其中甲基丙二酸血症患儿34例(94.4%);脂肪酸代谢异常患儿16例,其中原发性肉碱缺乏症患儿9例(56.3%)。53例患儿基因测序及父母验证结果发现纯合突变4例、复合杂合突变37例、杂合突变11例,二代测序技术进行基因缺失重复检测时发现基因整体杂合缺失1例。基因测序共发现56种突变,其中11种未见报道。结论石家庄市新生儿遗传代谢病患病率较高的为苯丙酮尿症、甲基丙二酸血症和原发性肉碱缺乏症;初步构建了石家庄市遗传代谢病患儿基因突变谱,并发现多个未报道基因突变。

1530例女性阴道炎异常分泌物的病原学检测

目的 :分析女性阴道炎的主要病因。方法 :应用上海大众股份有限公司提供的《超高倍显微分析仪》对 2 0 0 2年 8月～2 0 0 3年 8月该院妇科门诊 1 5 30例女性阴道异常分泌物进行病原学检测。结果 :妇科门诊女性阴道炎有 6 5 .0 3%的异常分泌物系单一病因所致 ,有 34.97%系混合感染所致。结论 :妇科门诊在诊断和治疗女性阴道炎时 ,病原学检测很重要。

6945例新生儿耳聋基因突变方式调查

目的:分析新生儿耳聋基因突变携带率,构建信息储备库,为临床诊断、遗传咨询提供可靠数据。方法:选取2014年1—10月在石家庄市妇幼保健院出生的6 945例新生儿于出生3 d后采足跟血,应用荧光聚合酶链反应(PCR)法行先天性遗传性耳聋GJB2基因235del C位点、迟发性耳聋SLC26A4基因(IVS7-2A>G和2168A>G)和药物性耳聋线粒体12S r RNA基因(1555A>G和1494C>T)检测,所有检测均在家属知情同意下进行。结果:6 945例新生儿中共发现突变携带者239例,检出率为3.44%。其中114例(1.64%)携带235del C杂合突变,1例(0.01%)携带235del C纯合突变;97例(1.40%)携带IVS7-2A>G杂合突变,1例(0.01%)携带IVS7-2A>G纯合突变,14例(0.20%)携带2168A>G杂合突变;9例(0.13%)携带1555A>G均质突变,2例(0.03%)携带1555A>G异质突变,1例(0.01%)同时携带有IVS7-2A>G杂合突变、1555A>G异质突变和235del C杂合突变。结论:GJB2基因235del C位点和SLC26A4基因IVS7-2A>G位点是新生儿耳聋基因突变的主要方式。新生儿耳聋基因检测工作的开展有助于了解新生儿耳聋基因携带情况,在分子水平上为优生优育工作提供一定的指导。

新生儿高甲硫氨酸血症串联质谱筛查结果及MAT1A基因突变分析

目的回顾分析石家庄市新生儿高甲硫氨酸血症筛查情况,了解其发病率及MAT1A基因突变情况。方法采用串联质谱技术-非衍生法检测滤纸干血斑中甲硫氨酸水平,对石家庄市149094例活产新生儿进行筛查,进一步采用二代测序技术对筛查阳性患儿进行MAT1A基因突变检测,Sanger测序验证。结果149094例新生儿中确诊13例高甲硫氨酸血症患儿,发病率为1/11469。13例患儿中除1例伴有血同型半胱氨酸升高外,其余12例患儿均为单纯性高甲硫氨酸血症患儿。9例单纯性高甲硫氨酸血症患儿进行了基因检测,结果发现均携带MAT1A基因突变,其中杂合突变7例;复合杂合突变1例;基因整体杂合缺失1例。基因突变分析发现点突变9种,其中文献已报道4种,分别为c.791G>A、c.769G>A、c.1070C>T和c.874 C>T;文献尚未报道5种,分别为c.1086-3C>G、c.712G>A、c.188G>T、c.757G>A和c.178T>C。结论石家庄市新生儿高甲硫氨酸血症发病率为1/11469;基因测序发现了5种未报道基因突变,丰富了数据库。

15173例新生儿先天性甲状腺功能低下症筛查结果分析

石家庄市 1999年 7月开始进行新生儿疾病筛查 ,至 2 0 0 2年 9月 ,共筛查新生儿 15 173例 ,筛查出甲低可疑患儿 2 4例 ,确诊甲低患儿 5例 ,发病为 1∶30 34,高于全国发病率。

河北汉族人群6个STR基因座遗传多态性研究

目的：对河北汉族群体６个ＳＴＲ短串联重复序列基国频率研究，得到河北汉族群体Ｄ７Ｓ８２０、Ｄ１９Ｓ２５３，Ｄ１２Ｓ３９１，Ｄ５Ｓ８１８，Ｄ１６Ｓ５３９，Ｄ８Ｓ１１７９基因座的群体遣传学数据。方法：随机抽取１７３例河北省汉族人群无血缘关系个体的静脉血。肝素抗凝．碘化钾提取ＤＮＡ，应用ＰＣＲ技术扩增上述６个短串联重复序列基因座，采用高分辨的聚丙稀酰胺凝胶垂直板电泳，银染显色分析。结果：６个基因虚在河北汉族人群中都具有遗传多态性。Ｄ７Ｓ８２０，Ｄ１９Ｓ２５３，Ｄ１２Ｓ３９１，Ｄ５Ｓ８１８，Ｄ１６Ｓ５３９，Ｄ８Ｓ１１７９基因座的杂合度分别为：０．８２８，０．７５７，０．７６９，０．８３７，０．７８５，０．８５２。个体识别率分别为：０．９１４，０．９１９，０．９４，０．９０９，０．９１７，０．９４４。非父排除率分别为：０．６１８．０．７４，０．８０１．０．５５７，０．６５５，０．６９６。遗传多态性信息量分别为：０．７７１，０．７６，０．７６２，０．７０８，０．７７６，０．７９４。结论：上述６个ＳＴＲ基因座基因频率分布与Hardy-Weinberg平衡吻合良好，在河北汉族群体中具有较高的非父排除率与个体识别率，在群体遗传学研究及法医学?

先天性甲状腺功能减低症97例治疗效果分析

先天性甲状腺功能减低症（congenital hypothyroidism，CH）是国内外新生儿疾病筛查的主要疾病之一，是儿科常见的内分泌疾病，可导致患儿体格和智能发育落后。早期诊断和早期治疗能明显改善预后，使CH患儿生长发育和智能发育达到正常儿童水平心。