扣子七中人参皂苷的HPLC-MS-MS方法研究

扣子七为五加科人参属植物大叶三七 Panaxjaponicus C.A.Mey.var.major(Burkill)C.Y.Wu et K.M.Feng的干燥根茎,分布于云南,重庆,湖北等地[1].在渝东鄂西,扣子七用于养阴,清肺,散淤,止血,定痛[2],其化学成分的研究尚未见报道.

基于PCR技术的中药DNA分子标记鉴别

综述基于 PCR技术的中药 DNA分子鉴别研究 ,重点论述了 RAPD法和 DNA直接测序法的应用 ,提出了DNA分子鉴别研究的思路与实验设计。

6种川产姜黄属药用植物叶绿体trnK基因序列变异分析及其分子鉴定(英文)

目的 建立 6种川产姜黄属 (Curcuma)药用植物快速简单的分子鉴定方法。方法 采用叶绿体赖氨酸tRNA基因 (trnK)测序与序列变异分析方法。结果 6种姜黄属药用植物 (包括姜黄C .longa、莪术C .phaeocaulis、川郁金C .sichuanensis、川郁金C .chuanyujin、川黄姜C .chuanhuangjiang、川莪术C .chuanezhu)完整trnK基因长度在2 6 99～ 2 70 5bp。序列可变区包括matK基因编码区和trnK外显子与matK内含子之间区域 ,共有 6个单核苷酸多态性 (SNPs)位点、1个 9 bp的缺失重复序列和 2个 4 bp、14 bp插入重复序列。结论 trnK基因序列可变位点可以作为6种川产姜黄属药用植物快速简单的分子鉴定标记 。

三七及其伪品的DNA测序鉴别

目的:分析三七Panax notoginseng及其伪品竹节参P.japonicus、蓬莪术Curcuma phaeocaulis、温莪术C.wenyujin、桂莪术C.kwangsiensis的核基因和叶绿体基因序列,为三七的正品药材基原鉴定提供分子依据。方法:采用PCR直接测序技术测定三七及其4种伪品的18S rRNA基因和matK基因核苷酸序列并作序列变异分析。结果:三七和竹节参的18S rRNA基因序列长度相同,均为1809 bp;matK基因长度亦相同,为1259 bp。蓬莪术、温莪术和桂莪术18S rRNA基因长度均为1811 bp、matK均为1548bp。根据排序比较,三七与4种伪品间的DNA序列存在很大差别。结论:通过序列差异比较分析,DNA测序技术可成为三七正品基原鉴定的准确、有效手段。

3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺在北细辛、华细辛及汉城细辛不同部位的分布及含量分析

目的考察3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺在《中华人民共和国药典》(简称"《中国药典》")收载的北细辛、华细辛及汉城细辛不同部位中的分布和含量。方法采用HPLC-DAD测定北细辛、汉城细辛和华细辛的果、叶、根及根茎中马兜铃酸Ⅰ等3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺的含量,并以LC-MS检测细辛根及根茎中马兜铃酸Ⅰ是否存在。结果通过对30份细辛果、97份细辛叶和97份细辛根及根茎样品检测的结果表明:3种细辛的果中均分布较高含量的马兜铃酸Ⅰ(0.095-2.200 mg?g-1)、9-羟基马兜铃酸Ⅰ(0.012-0.103 mg?g-1)、马兜铃内酰胺Ⅰ(0.025-0.147 mg?g-1)和马兜铃内酰胺Ⅱ(0.120-0.144 mg?g-1),未检测到马兜铃酸Ⅱ;3种细辛的叶中(除了2份样品)均分布有马兜铃酸Ⅰ,含量为0.010-0.140 mg?g-1,其它4种成分未检测到;HPLC法在细辛根及根茎的97份样品中均未检测到3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺中的任何1种,但经过灵敏度更高的LCMS检验,所测定的4份细辛根及根茎样品中均分布极微量的马兜铃酸Ⅰ(0.4-2.4μg?g-1)。结论本研究通过检测大量的细辛采集样品和多省市的细辛商品,报道了3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺在《中国药典》收载细辛不同部位中的分布和含量情况,为《中国药典》(2005年版)把细辛药用部位由"全草"修订为"根及根茎"而保证细辛的临床用药安全提供了科学数据的支撑。

中药三七化学成分的HPLC/ESI-MS分析(英文)

目的 建立分析中药三七的HPLC UV MS方法 ,鉴定三七的化学成分。方法 色谱柱 :PhenomenexLunaC1 8柱 (2 5 0mm× 4 6mmID ,5 μm) ;流动相 :0 0 0 5 %甲酸水溶液 (A)和 0 0 0 5 %甲酸乙腈溶液 (B) ,梯度洗脱 ;紫外检测波长范围 :1 95 -4 0 0nm ;采用正负离子检测模式。结果 三七成分获得了良好的分离与检测。通过与对照品的保留时间、正负离子质谱比较 ,鉴定了 1 4个成分 ,根据正负离子质谱数据和文献 ,分析推断了 4 1个成分 ,其中 ,野三七皂苷 H、野三七皂苷 E、竹节参皂苷 L5、丙二酰基人参皂苷 Rg1 、以及三七皂苷 J、 A、 R1 、 G、 R2 和人参皂苷 Rh3的异构体为首次在三七中发现。结论 本方法灵敏度高、分离度好 ,适合三七成分的鉴定。本结果有助于进一步对三七进行活性成分研究及质量控制。

中日产川芎的matK、ITS基因序列及其物种间的亲缘关系

目的 分析中国产川芎LigusticumchuanxiongHort.及日本产川芎CnidiumofficinaleMakino的核基因组ITS和叶绿体基因组matK序列 ,为探讨中日产川芎物种间的亲缘关系提供分子依据。方法 采用PCR直接测序技术测定川芎和日本川芎的ITS基因和matK基因核苷酸序列并作序列变异分析。结果 川芎和日本川芎的matK序列长度均为 12 68bp ,编码 4 2 2个氨基酸。ITS1 5 8S ITS2序列长度均为 699bp ,其中 18SrRNA基因 3′端序列 5 4bp ,ITS1序列 2 15bp ,5 8SrRNA基因序列 162bp ,ITS2序列 2 2 2bp ,2 6SrRNA基因 5′端序列 4 6bp。根据排序比较 ,川芎原植物与其商品药材间的matK基因和ITS基因序列完全相同 ,而川芎与日本川芎间matK基因则仅有 1个变异位点 ,即在上游 95 9nt处 1个转换替代 (T→C) ,反映在氨基酸序列则发生一个非同义取代V(GTG)→A(GCG) ;ITS基因也仅有 1个变异位点 ,即在ITS1上游 5 4nt处 1个转换替代 (T→C)。结论 通过进化速率较快的基因序列同源性分析 ,基本可以认为中日所产川芎基原一致 ,日本川芎学名似应改为LigusticumchuanxiongHort.

中药细辛商品药材的基源研究

从中国28省市收集到细辛商品药材158份,发现其中仅3/4来源于中国药典品种,其余1/4来源于非中国药典品种。11l份来源于北细辛,在26省市使用;25份来源于单叶细辛,在10省区使用;另22份来源于华细辛、杜衡等9种植物。

黄芩清除自由基活性与黄芩苷含量的相关性研究

目的 :开发简便、可靠的评价黄芩品质新方法。方法 :测定清除DPPH自由基活性 ,并以HPLC法测定黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷和汉黄芩素的含量。结果 :黄芩提取物的清除DPPH自由基活性与黄芩苷含量呈相关关系。结论 :测定清除DPPH自由基活性可以作为评价黄芩品质的有效方法之一。

银柴胡类生药的商品调查研究

通过全国范围调查，收集到２７个省、市、自治区的８８份银柴胡生药商品，鉴定结果表明其中仅６０％来源于中国药典品种，其余４０％来源于非药典品种。５２份来源于披针叶繁缕，在全国２４个省市使用，其中，约有２／３为１或２年生栽培品。商品中１８％为灯心草蚤缀根，在１０省区使用，其余２２％来源于丝石竹属、蝇子草属和蚤缀属３个属的５种植物根。

丁香水溶性化学成分的研究

目的：研究丁香水溶性化学成分。方法：利用HP-20大孔吸附树脂、反相硅胶柱色谱、反相制备薄层色谱、制备型反相高效液相色谱进行分离,NMR和MS等方法进行结构鉴定。结果：从丁香干燥花蕾的水提物中分离鉴定了5个化合物,分别为槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷（1）,槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷6″-甲酯（2）,槲皮素-3-O-葡萄糖苷（3）,丁香酚-β-芸香糖苷（4）,杨梅酮（5）。结论：化合物1～4为首次从丁香属植物中分离得到。

HPLC结合APIMS/MS法研究屏边三七的皂甙成分

应用HPLC与API-MS/MS相结合,分析了屏边三七95％乙醇提取物的三萜皂甙成分,结果表明,屏边三七除含有屏边三七皂甙R_1,R_2外,还含有少量人参皂甙Rb_1,Rc,Rb_2和Rd.

DNA Profiling inAuthentication of Panax Plants and Drugs:A New Approach to Old Problems

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＨＧｉｎｓｅｎｇｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｆａｍｏｕｓｈｅｒｂｓｏｆａｌｌｕｓｅｄｂｙｍａｎｋｉｎｇａｓｉｔｈａｓｂｅｅｎｖａｌｕｅｄｆｏｒｉｔｓｒｅ ｍａｒｋａｂｌｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｂｅｎｅｆｉｔｓａｓａｎｅｎｅｒｇｙｔｏｎｉｃｂｙｔｈｅｏｒｉｅｎｔａｌｐｅｏｐｌｅｓｉｎｃｅｔｈｅｄａｗｎｏｆｔｈｅｉｒｃｉｖｉｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｈａｓａｒｉｃｈａｎｄｅｘｔｅｎｓｉｖｅｈｉｓｔｏｒｙ .ＮｏｗＧｉｎｓｅｎｇｉｓｂｅｃｏｍｉｎｇｗｉｄｅｌｙｋｎｏｗｎａｎｄｕｓｅｄｉｎｔｈｅＷｅｓｔ,ａｎｄｌｉｋｅａｎｙｏｔｈｅｒＣｈｉｎｅｓｅｄｒｕｇｓ ,ｔｈｅａｕｔｈｅｎｔｉｃａｔｉｏｎｏｆＧｉｎｓｅｎｇｍｕｓｔｂｅｕｎ ｄｅｒｓｔｏｏｄｉｎｏｒｄｅｒｔｏｕｓｅｉｔｗｉｄｅｌｙａｎｄａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅｌｙ .ＴｈｅａｃｃｕｒａｔｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＧｉｎｓｅｎｇｉｓａｐｒｅｒｅｑｕｉｓｉｔｅａｎｄｂａｓｉｓｆｏｒｉｔｓｃｈｅｍｉｃａｌ,ｐｈａｒｍａ ｃｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ ,ａｓｗｅｌｌａｓｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ .Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｍｅａｎｓｏ...

基于核18S rDNA和叶绿体trnK序列鉴定姜黄属植物

姜科(Zingiberaceae)姜黄属(Curcuma)多种植物的根茎或块根如莪术(Curcumae Rhizoma)、姜黄(Curcumae Longae Rhizoma)、郁金(Curcumae Radix)等为常用中药,莪术为蓬莪术Curcuma phaeocaulis Val.、广西莪术C.kwangsinensis S.G.Lee et C.F.Liang和温莪术C.wenyujin Y.H.Chen et C.Ling根茎,具有行气破血、消积化食等功效;姜黄为姜黄C.longa L.根茎,具有行气破血、通经止痛等功效;郁金为莪术及姜黄块根,具有活血化瘀、行气止痛、利胆等功效。此3类药材常有混用,而且姜黄属植物鉴别主要基于新鲜状态,依赖腊叶标本较难鉴别。本研究通过分子系统学和生物信息学手段对姜黄属18种植物核糖体RNA小亚基基因(18S rDNA)和叶绿体赖氨酸tRNA基因(trnK)进行PCR直接测序,获得这2个基因的完整序列,以1种姜花属(Hedychium)和2种姜属(Zingiber)植物为外类群分析比较其序列变异,用PAUP法建立了18种姜黄属植物的亲缘关系。所得结果显示,18S rDNA序列长度1810bp,trnK为2696～2703bp。姜黄属植物基因种间变异范围为0～0.05%(18S rDNA)和0～0.19%(trnK),在种一级水平单系分化上得到100%bootstrap确证。18种姜黄属植物18S rDNA序列仅有1个变异位点,在系统树上广西莪术C.kwangsiensis和莪术C.zedoaria日本居群与其他16种形成分化。trnK基因序列可变区在2个trnK外显子与matK内含子之间,共有3个DNA插入/缺失,包括1个8-bp的缺失重复序列和1个4-bp、1个14-bp插入重复序列;5个单核苷酸多态性(SNPs)位点,trnK序列存在明显的种间基因条形码(DNA barcoding)。研究结果表明分子系统学可以作为姜黄属植物亲缘关系研究的重要手段,为部分姜黄属植物的种属归并提供了分子依据,trnK基因序列可变区作为DNA条形码候选基因可用于鉴定姜黄属植物及其药材。